早期糖尿病腎病患者血清CTRP9水平變化及其與25（OH）D的相關(guān)性

童夢霞，郭久暢，張琳，王茜，張晗，章瑩，岳瑜，廖鑫，高琳

遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，貴州遵義563003

糖尿病腎病（DN）是糖尿病最常見、最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，其發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜，治療效果不理想，因此早期預(yù)防尤為重要。C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9（CTRP9）是近年新發(fā)現(xiàn)的脂肪因子，與脂聯(lián)素（APN）具有高度同源性［1］，在調(diào)節(jié)代謝、保護(hù)血管內(nèi)皮、抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)心臟、抗炎等方面有重要作用［2］。CTRP9 可抑制腎小球和腎小管糖原積累，緩解高血糖介導(dǎo)的氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡，從而改善腎功能不全［3］。研究表明，25（OH）D 在肥胖、胰島β 細(xì)胞功能調(diào)控、氧化應(yīng)激等方面發(fā)揮重要作用，且其水平可能影響DN 嚴(yán)重程度［4］。本研究通過觀察單純糖尿病和早期DN 患者血清中CTRP9、25（OH）D水平變化，探討兩者相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019 年9 月—2020 年5 月我院收治的169 例2 型糖尿病患者，均符合WHO 1999年制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他類型糖尿病；惡性腫瘤病史及使用激素藥物史；其他原因引起的腎臟病變及腎功能不全；合并骨質(zhì)疏松及其他骨代謝異常；甲狀腺及甲狀旁腺疾病；1 個(gè)月內(nèi)使用過降糖或降脂藥物；3 個(gè)月內(nèi)使用過維生素D 及鈣劑；急慢性感染、糖尿病相關(guān)急性并發(fā)癥；絕經(jīng)期女性。根據(jù)中國2 型糖尿病防治（2017 年版）標(biāo)準(zhǔn)［5］，將患者分為單純糖尿病組（T2DM 組，UACR＜30 mg/g）88 例和早 期DN 組（DN 組，UACR 30～300 mg/g）81 例。T2DM 組男28 例、女60 例，年齡（51.71±10.57）歲；DN 組男25 例、女56 例，年齡（52.32 ± 10.73）歲。另擇65 例健康體檢者作為正常對照組，男21 例、女44 例，年齡（53.08±9.65）歲。三組性別、年齡具有可比性。三組其他臨床資料比較見表1。本研究獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對象均知情同意。

1.2 血清CTRP9、25（OH）D 檢測方法 采集受試者清晨空腹靜脈血，采用電化學(xué)發(fā)光法測定25（OH）D，試劑購于德國羅氏公司；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定空腹血清CTRP9 水平，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司。

1.3 早期DN 患者血清CTRP9 與25（OH）D 水平的相關(guān)性分析方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s 表示，不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以M（Q25，Q75）表示；多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較方差齊的采用LSD 法，方差不齊采用Dunnett"s T3法。正態(tài)分布采用Pearson相關(guān)分析，非正態(tài)分布采用Spearman相關(guān)分析；CTRP9 的影響因素分析采用多元逐步回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 三組臨床資料比較［±s/M（Q25，Q75）］

表1 三組臨床資料比較［±s/M（Q25，Q75）］

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；與T2DM組比較，#P＜0.05。

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2 結(jié)果

2.1 三組血清CTRP9、25（OH）D 水平比較 與正常對照組比較，T2DM組和DN組血清CTRP9、25（OH）D 均降低（P 均＜0.05）；與T2DM 組比較，DN 組血清CTRP9、25（OH）D降低（P均＜0.05）。見表2。

表2 三組血清CTRP9、25（OH）D比較（ng/mL，±s）

表2 三組血清CTRP9、25（OH）D比較（ng/mL，±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；與T2DM組比較，#P＜0.05。

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2.2 血清CTRP9 水平與早期DN 患者25（OH）D 及其他臨床特征的相關(guān)性 血清CTRP9 與病程、BMI、FPG、FINS、TG、HbA1c、HOMA-IR、UACR 呈負(fù)相關(guān)（r分別為-0.290、-0.253、-0.463、-0.171、-0.192、-0.374、-0.339、-0.316，P 均＜0.05），與HDL-C、eGFR、25（OH）D 呈正相關(guān)（r 分別為0.253、0.210、0.683，P 均＜0.05）。以CTRP9 為因變量，以病程、BMI、FPG、FINS、TG、HDL-C、HbA1c、HOMA-IR、UACR、eGFR、25（OH）D 為自變量，進(jìn)行多元逐步回歸分析。結(jié)果顯示，25（OH）D（X1，β=0.593，P＜0.01）、FPG（X2，β=-0.244，P＜0.01）是CTRP9 的獨(dú)立影響因素。回歸方程YCTRP9=95.820+0.593X1-0.244X2。見表3。

表3 血清CTRP9影響因素的多元逐步線性回歸分析

3 討論

CTRP9 與APN 有相似的球狀結(jié)構(gòu)域和代謝功能，在所有CTRP 旁系同源物中，CTRP9 顯示與APN的氨基酸序列同一性最高，因此CTRP9 的代謝調(diào)節(jié)作用與APN 類似。CTRP9 是一種保護(hù)性脂肪因子，可減少氧化應(yīng)激，保護(hù)血管內(nèi)皮功能，其水平升高是終末期DN 血管鈣化的保護(hù)因素［6］。FUJITA 等［7］認(rèn)為，血清CTRP9 可能是糖尿病患者腎血管損傷的生物標(biāo)志物。CTRP9 過表達(dá)可降低細(xì)胞外蛋白質(zhì)沉積，抑制腎小球硬化、腎小管間質(zhì)纖維化、高血糖介導(dǎo)的氧化應(yīng)激，從而延緩DN 進(jìn)展［3］。DN 以腎小球損害為主，eGFR 反映了腎小球?yàn)V過功能，UACR 是DN 的診斷依據(jù)。本研究結(jié)果顯示，DN 組血清CTRP9水平明顯低于T2DM組，且CTRP9與eGFR呈正相關(guān)，與UACR 呈負(fù)相關(guān)。提示T2DM 在發(fā)展為早期DN 的過程中CTPR9 降低，同時(shí)eGFR 降低、UACR升高，表明CTRP9可能在早期DN的發(fā)生發(fā)展中起保護(hù)作用。

有研究表明，CTRP9 基因敲除小鼠更易形成胰島素抵抗［8］。PETERSON 等［9］報(bào)道，高脂肪飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠血清CTRP9 水平降低了50%，CTRP9 轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)所需的胰島素量明顯減少，胰島素敏感性增加，過表達(dá)CTRP9 的小鼠在外周組織中的葡萄糖處置率升高，因此血糖濃度更低。CTRP9 通過刺激AMPK、Akt、p44/42 等通路，增加線粒體的生物合成和脂肪氧化，并且過表達(dá)CTRP9 的轉(zhuǎn)基因小鼠骨骼肌線粒體含量更高，加快機(jī)體新陳代謝，從而降低血脂濃度［10］。以上研究均表明，CTRP9 與糖脂代謝及胰島素抵抗密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，T2DM 組及DN 組血清CTRP9 水平均低于正常對照組，DN 組最低，且CTRP9 與BMI、FPG、FINS、TG、HbA1c、HONMA-IR 呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)PG 是CTRP9 水平升高的獨(dú)立影響因素。進(jìn)一步說明CTRP9 與糖脂代謝、胰島素抵抗密切相關(guān)。

維生素D 在維持β 細(xì)胞功能、胰島素產(chǎn)生和分泌及組織對胰島素的敏感性中起一定作用。有研究顯示，維生素D 與糖尿病多種慢性并發(fā)癥存在相關(guān)性，認(rèn)為維生素D 缺乏的糖尿病患者罹患腎病的風(fēng)險(xiǎn)升高［11］。維生素D 也可以抑制腎素分泌，減少氧化應(yīng)激和增加腎臟抗氧化能力，其干預(yù)治療的慢性腎臟病患者的尿白蛋白水平有所下降，并且能顯著減少足細(xì)胞丟失和凋亡、抑制腎小球纖維化［12］。本研究結(jié)果顯示，DN 組25（OH）D 顯著低于T2DM 組，表明25（OH）D與糖脂代謝、胰島素抵抗、DN密切相關(guān)。

目前，國內(nèi)外尚無相關(guān)研究直接顯示CTRP9 與25（OH）D 之間代謝的關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，CTRP9 與25（OH）D 呈 正 相 關(guān)，且25（OH）D 是CTRP9 水平升高的獨(dú)立影響因素。我們推測，CTRP9與25（OH）D 可能存在的關(guān)系包括：①CTRP9與APN的氨基酸序列同一性最高，有動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)維生素D可能通過增加脂肪組織中APN mRNA 表達(dá)來提高APN 水平［13］，CTRP9 可能與維生素D 存在類似的關(guān)系；②CTRP9可降低腫瘤壞死因子α（TNF-α）誘導(dǎo)的NF-κB 活化以及細(xì)胞間黏附分子1（ICAM-1）、血管細(xì)胞黏附分子1（VCAM-1）和單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1）表達(dá)［14］，維生素D 可以通過抑制NF-κB，抑制高糖誘導(dǎo)的血管緊張素，從而減輕腎損害［15］；③CTRP9可通過激活A(yù)MPKa 信號通路、下調(diào)TGF-β 抑制成纖維細(xì)胞成熟［16］，維生素D 也可抑制轉(zhuǎn)化因子β（TGF-β），從而阻止腎臟纖維化，減輕DN的腎臟損害［15］。因此推測，CTRP9與25（OH）D 在降低炎癥反應(yīng)及減輕腎臟損害方面具有相似的作用，CTRP9 與25（OH）D降低共同參與了早期DN的發(fā)生發(fā)展。

綜上所述，早期DN 患者血清CTRP9、25（OH）D水平均降低，25（OH）D 是CTRP9水平升高的獨(dú)立保護(hù)因素；CTRP9與25（OH）D 降低可能共同參與了早期DN的發(fā)生發(fā)展，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。