水稻稻曲病有效藥劑篩選及藥效評價

傅宇航 馬慧 蔡俊松 彭復(fù)蓉 畢朝位

摘要：通過對水稻稻曲病進行室內(nèi)毒力測定與田間藥效試驗，篩選出防治效果較好的殺菌劑。采用菌絲生長速率法測定9種殺菌劑對水稻稻曲病菌的室內(nèi)毒力，并進行7種殺菌劑的田間藥效試驗。氟環(huán)唑、吡唑醚菌酯、丙硫菌唑、嘧菌酯、丙環(huán)唑、咪鮮胺、戊唑醇的EC50值小于0.20μg/mL，抑菌效果較好。田間藥效試驗中，430 g/L戊唑醇SC 96.75 g a.i./hm2、125 g/L氟環(huán)唑SC 84.4 g a.i./hm2、250 g/L嘧菌酯SC 225.0 g a.i./hm2的防效最好，防效分別為83.59%、82.77%、81.13%。戊唑醇、氟環(huán)唑和嘧菌酯對水稻稻曲病具有良好的防效，可作為該病的有效防治藥劑。

關(guān)鍵詞：稻曲病；稻曲病菌；殺菌劑；室內(nèi)毒力；田間防效

中圖分類號：S482.2文獻標(biāo)志碼：A論文編號：cjas20191200323

Screening and Evaluation of Fungicides for Control of Rice False Smut Caused by Ustilaginoidea virens

Fu Yuhang， Ma Hui， Cai Junsong， Peng Furong， Bi Chaowei

（College of Plant Protection， Southwest University， Chongqing 400715， China）

Abstract： The study aims to screen out effective fungicides against rice false smut （caused by Ustilaginoidea virens） by indoor toxicity determination and field efficacy trial. Indoor toxicities of 9 fungicides against U. viren were tested by using mycelium growth rate method， and the control effects of 7 fungicides on rice false smut were detect in field trials. Indoor toxicity data revealed that epoxiconazole， pyraclostrobin， prothioconazole， azoxystrobin， propiconazole， prochloraz and tebuconazole had obvious inhibitory effect with EC50 value of less than 0.20μg/mL. Field trial results demonstrated that 430 g/L tebuconazole SC of 96.75 g a.i./hm2， 125 g/L epoxiconazole SC of 84.4 g a.i./hm2， 250 g/L azoxystrobin SC of 225.0 g a.i./hm2had excellent control effect of 83.59%， 82.77%， 81.13%， respectively. Therefore， tebuconazole， epoxiconazole and azoxystrobin are ideal fungicides for controlling rice false smut， and could be recommended to application in field.

Keywords： Rice False Smut； Ustilaginoidea Virens； Fungicides； Toxicity Test； Field Control Effect

0引言

水稻稻曲病（rice false smut）是由稻綠核菌（Ustilaginoidea virens）侵染引起一種真菌性病害，僅危害穗部，主要癥狀是稻穗逐漸膨大呈球狀，其表面散布黃色、墨綠色、黑色的粉末狀厚垣孢子，因此又稱假黑穗病、綠黑穗病、青粉病[1]。發(fā)病時，每穗有病粒1～5粒，嚴(yán)重時達20～30粒，減產(chǎn)可達20%～30%[2]。在嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量和米質(zhì)的同時，稻曲病菌產(chǎn)生的毒素對人、動物、植物均有毒害作用[3]。

從1934年魏景超首次報道國內(nèi)稻曲病發(fā)生[4]，近年來，由于各個稻區(qū)大穗型、密穗型高產(chǎn)品種（組合）的增多以及施肥水平的提高，尤其是粳稻在各地大面積推廣種植后稻曲病的發(fā)生越來越嚴(yán)重[5-7]，稻曲病已從次要病害上升為主要病害。浙江、湖南、安徽、湖北等地均發(fā)生過稻曲病的嚴(yán)重流行，發(fā)病面積30×104～100×104hm2，發(fā)病率高達30%以上[8-10]。在川渝地區(qū)，稻曲病同樣也成為制約水稻生產(chǎn)的關(guān)鍵因素之一，根據(jù)四川省農(nóng)業(yè)廳植保信息網(wǎng)統(tǒng)計，稻曲病在四川地區(qū)常年中等發(fā)生，面積大約為67×104hm2。目前，是否有水稻品種對稻曲病具有抗性仍存在爭議，有待進一步研究。至今尚未見開展系統(tǒng)的抗稻曲病遺傳育種，也沒有通過審定的抗稻曲病品種釋放[11-13]，對于該病的防治仍然以化學(xué)防治為主[14-16]。生產(chǎn)上用于防治水稻稻曲病的殺菌劑種類較少，常用的有三唑類如43%戊唑醇（好力克）SC、30%苯醚甲環(huán)唑？丙環(huán)唑（愛苗）EC等以及銅制劑如27.12%堿式硫酸銅（銅高尚）[11，17]。三唑類殺菌劑屬于單一作用位點殺菌劑，被國際殺菌劑抗性治理委員會（FRAC）列為中等抗性風(fēng)險的殺菌劑，2015年首次在江蘇報道發(fā)現(xiàn)對丙環(huán)唑具有抗性的稻曲病菌野生菌株[18]。銅制劑不具備內(nèi)吸性，且容易對水稻產(chǎn)生藥害。本試驗選擇不同作用機理的9種殺菌劑進行室內(nèi)毒力測定，選擇對水稻稻曲病菌抑菌活性較好的7種殺菌劑進行田間試驗。篩選出對水稻稻曲病具有理想防治效果的藥劑，以期為防治水稻稻曲病提供指導(dǎo)。

1材料與方法

1.1室內(nèi)毒力測定

1.1.1供試菌株稻曲病菌，病樣2018年7月采集于四川省達州市宣漢縣，由西南大學(xué)植物保護學(xué)院植物真菌病害實驗室分離鑒定并保存。

1.1.2供試培養(yǎng)基馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基（PSA）：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1000 mL。

1.1.3供試藥劑97%戊唑醇原藥、97%丙硫菌唑原藥、97%啶酰菌胺原藥，由常州常熟恒榮商貿(mào)有限公司提供。97%吡唑醚菌酯原藥、96%嘧菌酯原藥、95.2%丙環(huán)唑原藥、97.1%咪鮮胺原藥、97%噻呋酰胺原藥、97%氟環(huán)唑原藥，由湖北康寶泰精細化工有限公司提供。二甲基亞砜（DMSO）溶解各原藥，配成質(zhì)量濃度為1.0×104mg/L母液，置于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.4含藥培養(yǎng)基的配制根據(jù)預(yù)試驗篩選的藥劑質(zhì)量濃度，采取逐級稀釋法，將每種母液用DMSO稀釋成6個質(zhì)量濃度。在無菌條件下，將各濃度藥劑100μL注入定量的融化PSA培養(yǎng)基（體積50 mL、溫度50～ 55℃）中，制成含藥平板，以加入100μL DMSO為空白對照，各處理重復(fù)3次。

1.1.5測定方法采用菌絲生長速率法[19]，測定各藥劑對水稻稻曲病菌菌絲生長的抑制作用。將活化15天的菌落，用打孔器（直徑5 mm）從菌落邊緣切取菌餅，并倒置于含藥平板中心，放置28℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。20天后采取十字交叉法測定各菌落直徑。計算菌絲生長抑制率，利用SPSS求出毒力回歸方程，計算EC50值。

1.2田間藥效試驗

1.2.1供試藥劑430 g/L戊唑醇SC（好力克），拜耳作物科學(xué)公司；250 g/L吡唑醚菌酯EC（施樂健），125 g/L氟環(huán)唑SC（歐博），巴斯夫植物保護（江蘇）有限公司；250 g/L嘧菌酯SC（阿米西達），250 g/L丙環(huán)唑EC（敵力脫），瑞士先正達作物植保有限公司；45%咪鮮胺ME（翠喜），深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司；10%丙硫菌唑SC，紹興上虞銀邦化工有限公司。

1.2.2試驗地情況試驗田安排在四川省達州市宣漢縣明月鄉(xiāng)，此地常年種植水稻，稻曲病發(fā)生較為嚴(yán)重。選擇地勢平坦、臨近水源、灌溉方便的地塊，土壤為灰棕紫泥土壤，肥力中等。試驗前后未施用其他農(nóng)藥，肥水管理照常規(guī)進行。

1.2.3藥劑處理試驗共8個處理，3次重復(fù)，試驗小區(qū)完全隨機區(qū)組排列；各小區(qū)面積為30 m2，在水稻破口前5～7天施藥，共2次施藥，相隔時間為7～10天，具體時間為2019年7月26日、8月3日。噴液量為750L/hm2，每次施藥量為藥劑推薦使用劑量，具體為430 g/L戊唑醇SC96.75ga.i./hm2、250g/L吡唑醚菌酯EC93.75ga.i./hm2、125 g/L氟環(huán)唑SC 84.4 g a.i./hm2、250 g/L嘧菌酯SC 225.0 g a.i./hm2、250 g/L丙環(huán)唑EC 131.0 g a.i./hm2、45%咪鮮胺ME 270.0 g a.i./hm2、10%丙硫菌唑SC 99.0 g a.i./hm2，以清水為空白對照。

1.2.4調(diào)查方法和數(shù)據(jù)處理稻曲病調(diào)查1次，于第二次施藥后至稻穗成熟收獲前調(diào)查情況，具體時間為8月23日；每小區(qū)對角線5點取樣調(diào)查，每點調(diào)查相連5叢，共調(diào)查25叢稻穗，調(diào)查稻曲病病穗發(fā)病情況。水稻稻曲病分級標(biāo)準(zhǔn)：0級，單穗健康，無稻曲球病粒；1級，單穗稻曲病粒數(shù)1個；3級，單穗稻曲病粒數(shù)2個；5級，單穗稻曲病粒數(shù)3～5個；7級，單穗稻曲病粒數(shù)6～9個；9級，單穗稻曲病粒數(shù)10個及以上。病情指數(shù)的計算見公式（1），防效的計算見公式（2）。

對防效進行方差分析（SPSS統(tǒng)計軟件）并采用鄧肯氏新復(fù)極差法（DMRT）比較各藥劑的平均防效的差異顯著性。

2結(jié)果與分析

2.1室內(nèi)藥劑篩選

室內(nèi)毒力測定結(jié)果見表1。對水稻稻曲病菌具有較好抑制作用的殺菌劑有氟環(huán)唑、吡唑醚菌酯、丙硫菌唑、嘧菌酯、丙環(huán)唑、咪鮮胺、戊唑醇，EC50值均小于0.20μg/mL，可分為甲氧基丙烯酸酯類和麥角甾醇合成抑制劑。屬于甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑的吡唑醚菌酯和嘧菌酯EC50分別為0.0378、0.0669μg/mL。麥角甾醇合成抑制劑類殺菌劑抑菌效果最好的是氟環(huán)唑，EC50為0.0194μg/mL，抑菌效果最差的為丙硫菌唑，為0.1937μg/mL，丙環(huán)唑、咪鮮胺、戊唑醇的EC50分別為0.0234、0.0469、0.0232μg/mL。而同屬于琥珀酸脫氫酶抑制劑（SDHIs）的啶酰菌胺和噻呋酰胺對水稻稻曲病菌抑制效果較差，EC50值均大于150μg/mL。因此選用氟環(huán)唑、吡唑醚菌酯、丙硫菌唑、嘧菌酯、丙環(huán)唑、咪鮮胺、戊唑醇進一步進行田間藥效試驗。

2.2田間藥效試驗

7種殺菌劑對水稻稻曲病的防效見表2。2次施藥后，430 g/L戊唑醇SC（96.75 g a.i./hm2）、125 g/L氟環(huán)唑SC（84.4 g a.i./hm2）、250 g/L嘧菌酯SC（225.0 g a.i./hm2）的防效最好，分別為83.59%、82.77%、81.13%，三者差異不顯著。其次是250 g/L丙環(huán)唑EC（131.0 g a.i./hm2）和250 g/L吡唑醚菌酯EC（93.75 g a.i./hm2），防效分別為76.21%、74.57%，二者無顯著性差異。防治效果較差的是10%丙硫菌唑SC（64.8 g a.i./hm2）和45%咪鮮胺ME（270.0 g a.i./hm2），防效分別為66.37%、65.55%。推薦戊唑醇、嘧菌酯、氟環(huán)唑、丙環(huán)唑、吡唑醚菌酯用于田間防治水稻稻曲病。

3討論

室內(nèi)毒力試驗結(jié)果表明，抑菌效果較好的殺菌劑主要分為麥角甾醇合成抑制劑類（戊唑醇、氟環(huán)唑、丙環(huán)唑、丙硫菌唑、咪鮮胺）和甲氧基丙烯酸酯類（嘧菌酯、吡唑醚菌酯）。Chen[20]的研究表明稻曲病菌對4種麥角甾醇合成抑制劑類殺菌劑十分敏感，阮宏椿[21]通過室內(nèi)毒力測定篩選出嘧菌酯等甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑對稻曲病菌抑菌效果較好。對這2類殺菌劑進一步進行田間試驗，結(jié)果表明它們的防治效果均大于60%，其中430 g/L戊唑醇SC、125 g/L氟環(huán)唑SC、250 g/L嘧菌酯SC的防效大于80%，研究結(jié)果與宋益民[22]報道的基本一致。目前鮮有稻曲病菌野生菌株對這2類殺菌劑產(chǎn)生抗性的報道[23]，依然可以作為防治稻曲病的主要藥劑。

琥珀酸脫氫酶合成抑制劑類種類較多，筆者只選擇了噻唑-酰胺類的噻呋酰胺和吡啶酰胺類的啶酰菌胺，其他種類的該類殺菌劑抑菌效果還需要進一步驗證。Muniraju[24]對9種殺菌劑的田間試驗結(jié)果表明噻呋酰胺的嚴(yán)重度達14.65%，僅次于空白對照的35.62%，防治效果最差，與本試驗結(jié)果一致。在生產(chǎn)中，有報道將噻呋酰胺與其他種類的殺菌劑（戊唑醇、井岡霉素、氟環(huán)唑等）復(fù)配用于防治水稻稻曲病，防效可達85%以上且優(yōu)于2種單劑，而噻呋酰胺防效較差，介于40%～70%[25-26]，其增效機理有待進一步研究。

準(zhǔn)確合適的施藥時間是防治稻曲病的關(guān)鍵因素，目前最合適的施藥時間還沒有一個統(tǒng)一定論，本試驗的施藥時間主要依據(jù)何永海[27]和周奮啟[28]所報道的破口前5～7天和破口期。麥角甾醇合成抑制劑和甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑不僅對水稻稻曲病有較好的防治效果，而且可以同時防治稻瘟病[29]和水稻紋枯病[30]。

本試驗篩選了較為常見的3種作用機理殺菌劑，但是都是單一作用位點的殺菌劑，如果長時間大規(guī)模使用可能導(dǎo)致抗藥性菌株的出現(xiàn)，今后還需要不斷評估殺菌劑的防治效果以及篩選更多不同作用機理的殺菌劑。同時將這2類殺菌劑交替或者復(fù)配使用，可以延緩抗藥性的產(chǎn)生，延長藥劑的使用壽命，擴大防治譜[31]。

4結(jié)論

水稻稻曲病是危害最為嚴(yán)重的水稻病害之一，因其獨特的侵染機制，使用化學(xué)藥劑提前預(yù)防成為了最關(guān)鍵的防治手段。本試驗結(jié)果表明，430 g/L戊唑醇SC 96.75 g a.i./hm2、125 g/L氟環(huán)唑SC 84.4 g a.i./hm2、250 g/L嘧菌酯SC 225.0 g a.i./hm2對水稻稻曲病具有良好的田間防效，可作為該病的有效防治藥劑。

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