宮頸癌發生發展相關的LncRNA篩選及功能研究

董君偉，賈海生

作為全球女性中第三大最常見的癌癥和惡性腫瘤相關死亡率的第四大突出原因，宮頸癌在全世界每年發生530 000例病例，近27.5萬例死亡，高于其他婦科腫瘤[1]。近年來，由于宮頸細胞學和宮頸活檢的進展，已經通過更好的檢測方法診斷出早期和局部晚期宮頸癌[2]。宮頸癌的篩查和先進的醫療手段使宮頸癌的發病率降低了40%～50%。在許多發達國家，死亡率降低了60%，預后良好率也有所提高[3]。然而，宮頸癌仍然是主要的公共衛生問題，尤其是在晚期病例中[4]。過去的研究主要集中在識別可預測生物學行為的腫瘤特異性標志物上，主要是由于細胞運動的重要性和宮頸癌進展中的侵襲性[5]。為了進一步研究宮頸癌的治療，需要開展更多研究以研究宮頸癌的分子機制[6]。非編碼RNA(ncRNA)是基因調控的關鍵因素，影響正常細胞和癌細胞的表型[7]。 這些ncRNA被認為在腫瘤發生的起始中起著重要的調節作用[8]。最近，一類新的轉錄本，長鏈非編碼RNA(LncRNA)，已在真核基因組中廣泛轉錄[9]。LncRNA的長度約為200 nt至100 kb，是功能性非編碼RNA分子之一[10]。 據報道，宮頸癌中涉及幾種LncRNA[11]。到目前為止，僅對一小部分LncRNA進行了詳細表征[12]。一些LncRNA調控重要的癌癥過程，包括增殖、凋亡、轉移和耐藥性[13]。仍需要鑒定更多影響癌癥相關基因表達的LncRNA。

1 材料與方法

1.1 細胞及材料試劑

本研究中宮頸癌細胞Hela購于美國ATCC細胞庫。胎牛血清FBS、DMEM培養基、胰蛋白酶購自美國Thermo Fisher；Trizol試劑、脂質體2000購自美國Invitrogen；siRNA購自廣州市銳博生物科技有限公司；逆轉錄試劑及熒光定量PCR試劑購自翊圣(上海)有限公司；……