響應面法分析煙草花藥胚狀體誘導的最佳條件

黃子彧，劉昭偉，周 毅，劉 勝，羅 亮，胡博尊，羅 柱，戴林建

（1.株洲煙草公司茶陵分公司，湖南 茶陵 412400；2.湖南農業大學，湖南 長沙 410128）

自1967 年，Bourgin 和Nitsch 成功利用煙草花藥得到單倍體植株以來，國內外開展了許多對煙草花藥培養的研究工作，不斷優化培養過程[1-2]。花藥培養的誘導頻率受多個因素的影響，如基因型、培養條件、花粉發育時期、培養基等[3-6]。陳春艷等[7]認為4℃低溫預處理48 h 能顯著提高花藥胚狀體的誘導率。賈永炯[8]的研究發現在含0.4～0.8 mg/L 2,4-D 的Nitsch培養基上胚狀體發生頻率有所提高。李春玲等[9]與王立浩等[10]考察了不同碳源及其濃度對花藥胚狀體誘導的影響，結果發現，3%的蔗糖對花藥的誘導率最高。劉仁祥等[11]對活性炭、大量元素與微量元素之間的關系做了研究，發現活性炭能平衡大量元素和微量元素之間的關系，從而促進胚狀體的形成。

響應面法（Response surface methodology，RSM）是一種優化反應條件的有效方法，RSM 是數學方法和統計方法結合的產物，用于對受多個變量影響的問題進行建模和分析，其最終目的是優化響應值。RSM 最先應用于化學工業領域，后來隨著研究的深入和擴展，逐漸應用于生物學、醫學以及食品學領域[12-14]。響應面法能系統地優化反應條件，分析各因素間的互作效應。前人的試驗多是研究某單一因素對花藥誘導頻率的影響，并且關于采用響應面法優化煙草花藥培養的報道尚不多見。因此，筆者在前人研究的基礎上，以IAA、6-BA 以及大量元素濃度為考察對象，采用響應面法，試圖找到誘導煙草花藥胚狀體的最佳條件，為優化煙草花藥培養體系提供依據。……