豬冷凍精液深部輸精技術(shù)應(yīng)用研究

孫志峰，焦福林

（1.山西省畜牧獸醫(yī)學(xué)校，山西 太原 030024；2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，山西 太原 030032）

豬的人工授精技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生豬生產(chǎn)中，所用精液多為常規(guī)液態(tài)保存精液，但液態(tài)精液不便于遠距離運輸，不能使優(yōu)良的種公豬的遺傳物質(zhì)得到有效的保存，尤其非洲豬瘟暴發(fā)以來，我國種豬存欄量的急劇減少，嚴(yán)重威脅到未來的育種和生產(chǎn)，迫切需要更加安全的保種和生產(chǎn)繁育方式，保證盡快恢復(fù)生豬生產(chǎn)。

豬冷凍精液技術(shù)是指利用干冰（-79 ℃）、液氮霧等作冷卻源，將精液特殊處理后，保存在超低溫的液氮（-196 ℃）狀態(tài)下長期保存，解凍后輸精的過程[1]。冷凍精液具有儲存時間長，運輸方便，不受時間、地域的限制，便于開展省際、國際之間的協(xié)作，能夠保護優(yōu)良種公豬遺傳物質(zhì)，提高優(yōu)良種豬的利用率。常規(guī)輸精是將精液輸?shù)阶訉m頸部，深部輸精是將精液輸?shù)阶訉m內(nèi)，可分為輸卵管輸精法、子宮角輸精法和子宮體輸精法，現(xiàn)在規(guī)模化豬場常用的是子宮體輸精法，較常規(guī)輸精縮短了精子與卵子結(jié)合距離，提高母豬受胎率、分娩率和產(chǎn)仔數(shù)。

本試驗以長白后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬為研究對象，將豬冷凍精液采用深部輸精和常規(guī)輸精技術(shù)，研究其對母豬分娩率和產(chǎn)仔數(shù)的影響，為指導(dǎo)母豬生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗時間與地點

本試驗于2019年3月在山西省清徐縣天祿豐種豬育種股份有限公司所屬種豬場開展。

1.2 試驗材料與分組

1.2.1 冷凍精液 購于上海祥欣種公豬站。

1.2.2 輸精管 常規(guī)輸精管規(guī)格海綿頭直徑2 cm，輸精管直徑0.5 cm、長45.5 cm。深部輸精管規(guī)格海綿頭直徑1.8 cm，硬管直徑0.5 cm、長47.5 cm，軟管直徑0.2 cm、長70 cm，膠套直徑0.5 cm。

1.2.3 分組 選取體重日齡相近的長白后備母豬60頭，隨機分為2組，每組30個重復(fù)，每個重復(fù)1頭，對照組為常規(guī)輸精，試驗組為深部輸精；選取3～5胎長白經(jīng)產(chǎn)母豬100頭，隨機分為2組，每組50個重復(fù)，每個重復(fù)1頭，對照組為常規(guī)輸精，試驗組為深部輸精。

1.3 試驗方法

1.3.1 冷凍精液解凍 先將稀釋液放入36 ℃恒溫水浴鍋內(nèi)解凍，再迅速從液氮中取出裝有精液冷凍細管，3 s內(nèi)放入50 ℃恒溫水浴鍋中解凍16 s，迅速取出用干凈毛巾或紙巾擦干冷凍精液細管外部。用剪刀先剪斷細管封口一端，再剪斷細管另一端讓精液流入稀釋液中，每4個細管為一份，倒入一瓶稀釋液中。

1.3.2 精液活力檢測 輕輕晃動加入精液的稀釋液瓶，在36 ℃水溫中平衡3 min，顯微鏡加熱載物臺調(diào)至38 ℃，檢測精液活力，低于60%不予使用。

1.3.3 常規(guī)輸精 將常規(guī)輸精管前端向上傾斜45 °插入陰道，當(dāng)輸精管海綿頭到達子宮頸口時感到有阻力，旋轉(zhuǎn)輸精管，讓子宮頸外口卡住海綿頭，搖勻輸精瓶內(nèi)的精液，5～10 min將精液輸?shù)阶訉m頸部。每頭豬輸精2次，間隔8～16 h。

1.3.4 深部輸精 將深部輸精管前端向上傾斜45°插入陰道，當(dāng)輸精管海綿頭到達子宮頸口時會感到有阻力，這時應(yīng)將輸精管順時針或逆時針旋轉(zhuǎn)，確定宮頸外口卡住海綿頭，然后以扣固定內(nèi)管，緩慢將軟管向前推進10 cm左右，到達輸精部位，搖勻輸精瓶內(nèi)的精液，30～40 s將精液推進子宮體。每頭豬輸精2次，間隔8～16 h。

1.3.5 記錄 記錄配種時間，公母豬耳號，母豬返情數(shù)，分娩母豬頭數(shù)，母豬總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)和初生窩重。母豬分娩率就是分娩母豬數(shù)與配種母豬數(shù)的比值，用百分比表示。

1.3.6 飼養(yǎng)管理 配種后母豬限位欄飼養(yǎng)，試驗豬群在同一棟豬舍專人管理，每日飼喂2次，飼喂量妊娠前期2 kg/d，后期3 kg/d，正常免疫。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用Excel 2007建立數(shù)據(jù)庫，數(shù)值以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 24.0軟件進行統(tǒng)計分析。

2 試驗結(jié)果

2.1 冷凍精液深部輸精對后備母豬的影響

通過表1、表2可以看出，冷凍精液深部輸精的后備母豬分娩率較常規(guī)輸精提高10個百分點（P＜0.05），窩均總產(chǎn)仔數(shù)提高0.91頭（P＜0.05），產(chǎn)活仔數(shù)提高0.12頭（P＞0.05）。

表1 后備母豬冷凍精液深部輸精對分娩率的影響

表2 后備母豬冷凍精液深部輸精對產(chǎn)仔數(shù)的影響

2.2 冷凍精液深部輸精對經(jīng)產(chǎn)母豬的影響

通過表3、表4可以看出，冷凍精液深部輸精的經(jīng)產(chǎn)母豬分娩率較常規(guī)輸精提高8個百分點（P＜0.05），窩均總產(chǎn)仔數(shù)提高1.19頭（P＜0.01），產(chǎn)活仔數(shù)提高0.31頭（P＞0.05）。

表3 經(jīng)產(chǎn)母豬深部輸精對分娩率的影響

表4 經(jīng)產(chǎn)母豬深部輸精對產(chǎn)仔數(shù)的影響

3 結(jié)論與分析

3.1 冷凍精液深部輸精顯著提高經(jīng)產(chǎn)母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)

深部輸精技術(shù)可以將公豬精液送入母豬子宮體內(nèi)，更接近母豬受精的輸卵管部位，使精子與卵子接觸距離縮短，提高母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)。牛思凡等[2]研究認(rèn)為采用深部輸精技術(shù)母豬的窩均總產(chǎn)仔數(shù)提高1.01頭（P＜0.05）；吳國芳等[3]對海東地區(qū)的母豬進行深部輸精與常規(guī)輸精效果比較，研究表明母豬子宮深部輸精量分別減少33%和67%的情況下，受胎率分別提高1.70%和1.13%（P＜0.05），窩產(chǎn)仔數(shù)分別提高0.89和0.41頭（P＜0.05）；付永利等[4]采用60 mL深部輸精與80 mL常規(guī)輸精相比較，結(jié)果表明受胎率和總產(chǎn)仔數(shù)分別提高3.60%和0.72頭（P＜0.05）。冷凍精液較液態(tài)精液具有保持時間長的優(yōu)勢，更適合珍貴優(yōu)良豬種遺傳物質(zhì)的傳遞，本試驗將冷凍精液采用深部輸精技術(shù)應(yīng)用于長白豬，顯著提高了經(jīng)產(chǎn)母豬的分娩率、窩均總產(chǎn)仔數(shù)。

3.2 冷凍精液深部輸精顯著提高后備母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)

深部輸精在后備母豬上應(yīng)用研究較少，尤其是冷凍精液深部輸精。宋忠旭等[5]選用大白后備母豬82頭，隨機分為深部輸精組和常規(guī)輸精組，結(jié)果表明，兩組受胎率、分娩率、產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)差異不顯著。彭妙蓮等[6]將深部輸精與懸掛式輸精結(jié)合起來，研究表明提高了大白豬和杜洛克豬的受胎率、分娩率、產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)，提高了長白豬產(chǎn)活仔數(shù)，但差異均不顯著。本試驗將冷凍精液采用深部輸精技術(shù)應(yīng)用于長白后備豬，提高了分娩率、窩均總產(chǎn)仔數(shù)，差異顯著，可能與精液的保存、輸入以及母豬等方面有關(guān)。