‘琯溪蜜柚’中乙螨唑、啶蟲脒的殘留測定及套袋對殘留的影響

胡彧嫻

摘要：為評價乙螨唑、啶蟲脒在‘琯溪蜜柚’上使用的安全性以及套袋對殘留量的影響，對其殘留消解動態(tài)進(jìn)行研究。在蜜柚上施藥進(jìn)行田間試驗(yàn)，2種施藥劑量分套袋和無套袋處理，QuEChERS結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行殘留檢測。結(jié)果表明，乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留消解動態(tài)均符合一級動力學(xué)方程，乙螨唑套袋處理的半衰期（T1/2）為5.30～5.47天，無套袋處理的T1/2為4.34～4.54天；啶蟲脒套袋處理的T1/2為3.42～3.80天，無套袋處理的T1/2為3.04～3.70天。乙螨唑套袋處理的半衰期略長于無套袋處理的半衰期，而套袋對啶蟲脒的半衰期影響不大。施藥后65天在蜜柚中沒有檢出乙螨唑和啶蟲脒殘留。

關(guān)鍵詞：乙螨唑；啶蟲脒；琯溪蜜柚；殘留；套袋

中圖分類號：S481.8文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A論文編號：cjas2020-0162

基金項目：2018年漳州市自然科學(xué)基金項目“琯溪蜜柚中多殘留QuEChERS HPLC-MS/MS檢測方法的建立及套袋控殘技術(shù)研究”（ZZ2018J30）。

Determination of Etoxazole and Acetamiprid Residue in Citrus maxima‘Guanxi miyou’and Effect of Bagging on Residues

Hu Yuxian

（Zhangzhou Agricultural Test and Inspection Centre，Zhangzhou363000，F(xiàn)ujian，China）

Abstract： To evaluate the safety of etoxazole and acetamiprid in Citrus maxima‘Guanxi miyou’and the effect of bagging on residues， a study on the residual degradation dynamics of etoxazole and acetamiprid was carried out. A field experiment was conducted on Citrus maxima‘Guanxi miyou’， two dosages were sprayed in bagging and non-bagging treatments， and then the residue was determined by QuEChERS combining with HPLC- MS/MS. The results showed that the residual degradation dynamics of etoxazole and acetamiprid followed the first-order kinetic equation， the half-life （T1/2） of etoxazole was 5.30-5.47 d in the bagging treatment， and 4.34-4.54 d in the non-bagging. T1/2 of acetamiprid was 3.42-3.80 d in the bagging treatment， and 3.04-3.70 d in the non-bagging. T1/2 of etoxazole was a little longer in the bagging treatment， but the T1/2 of acetamiprid had no obvious difference between the bagging and non- bagging treatment. The residues of etoxazole and acetamiprid in Citrus maxima‘Guanxi miyou’were not detected on the 65thday after spraying.

Keywords： Etoxazole； Acetamiprid； Citrus maxima‘Guanxi miyou’； Residue； Bagging

0引言

乙螨唑?qū)儆趪f唑類殺螨劑[1]，廣泛用于柑桔、棉花、花卉、蔬菜等作物上的葉螨防治[2]，具有殺卵、殺幼蟲活性[3]。啶蟲脒是一種廣譜的速效性殺蟲劑，具有觸殺、胃毒和較強(qiáng)的滲透作用[4]，在國內(nèi)廣泛用于防治蔬菜、水果等作物的蚜蟲[5]，對柑桔蚜蟲防治效果尤其突出[6]。‘琯溪蜜柚’是國內(nèi)柚類主栽良種之一[7]，原產(chǎn)于福建省平和縣[8]，是當(dāng)?shù)氐闹饕?jīng)濟(jì)作物。由于‘琯溪蜜柚’產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)效益較高，近年來種植規(guī)模不斷擴(kuò)大，現(xiàn)在平和已成為國內(nèi)最大的柚類生產(chǎn)基地縣和出口基地縣[8]。然而，隨著單一化種植及農(nóng)藥、化肥的不合理使用，蜜柚上的蟲害發(fā)生日趨嚴(yán)重，已影響到蜜柚的品質(zhì)和產(chǎn)量。乙螨唑和啶蟲脒作為防治蜜柚蟲害的主要農(nóng)藥品種之一，在生產(chǎn)上被廣泛使用。

國內(nèi)對乙螨唑的研究主要集中在藥效試驗(yàn)與復(fù)配研發(fā)方面[9-11]，對其檢測方法和殘留代謝研究報道并不多，僅在枸杞[12]、蘋果[13]、柑桔[14]上有相關(guān)報道。對啶蟲脒的檢測方法和殘留動態(tài)方面已有諸多報道，主要集中在毛葉棗[15]、辣椒[16]、草莓[17]、黃瓜[18]、蘋果[19]、開心果[20]等作物上。但乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留及消解規(guī)律均沒有相關(guān)研究數(shù)據(jù)。

目前，果實(shí)套袋已成為生產(chǎn)綠色果品的主要栽培技術(shù)之一，其具有降低農(nóng)藥殘留[21]、減少果實(shí)病蟲為害及提高果實(shí)品質(zhì)[7，22]等優(yōu)點(diǎn)。筆者以‘琯溪蜜柚’為試材，建立QuEChERS結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜快速檢測方法，研究乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留動態(tài)，并研究套袋對其殘留量的影響，旨在評價農(nóng)藥使用的安全性，為‘琯溪蜜柚’在種植過程中的科學(xué)用藥及其綠色化發(fā)展提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料與儀器設(shè)備

供試‘琯溪蜜柚’為7年生。供試農(nóng)藥為20%乙螨唑懸浮劑（100 mL/瓶，河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司）、 20%啶蟲脒可溶粉劑（25 g/袋，江蘇龍燈化學(xué)有限公司）。

乙螨唑、啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)品（100 mg/L，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所）；無水MgSO4和NaCl均為分析純；N-丙基乙二胺（PSA，德國CNW公司）；乙腈、甲酸、甲醇均為色譜純。

T-18 basic ULTRA TURRAX高速勻漿機(jī)（德國IKA公司）；3-18K高速離心機(jī)（德國Sigma公司）；DIONEX Ultimate 3000- Thermo TSQ Quantum Ultra EMR高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國ThermoFisher公司）。

1.2田間試驗(yàn)設(shè)計

參照《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》[23]，于漳州市平和縣小溪鎮(zhèn)厝丘村蜜柚園中實(shí)施田間試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)4個處理，2種施藥劑量，并分套袋和無套袋2種處理。每個處理6株蜜柚，設(shè)3個重復(fù)；以清水噴霧的無套袋處理為空白對照（表1）。

于2018年7月8日（此時蜜柚已謝花約90天）按常規(guī)方法對整株蜜柚進(jìn)行均勻施藥，施藥后2天內(nèi)無降雨，套袋處理待蜜柚表面的藥液完全干燥才能進(jìn)行。采用1次施藥多次采樣的方法，分別于施藥后0（約 2 h，此時果實(shí)表面藥液已干）、1、3、7、15、30、65天采集蜜柚樣品測定殘留量。

1.3分析方法

1.3.1提取與凈化參考蔡恩興[24]建立的QuEChERS方法。稱取10 g（精確至0.01 g）攪碎成勻漿的蜜柚全果樣品于50 mL離心管中，加入20.0 mL乙腈、1.0 g NaCl和4.0 g無水MgSO4，在勻漿機(jī)中高速勻漿提取2 min，4500 r/min離心5 min，吸取2.0 mL上清液加到內(nèi)含0.10 g PSA和0.30 g無水MgSO4的離心管中，渦旋1 min，過0.22μm有機(jī)濾膜，待高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

1.3.2檢測條件

（1）液相色譜條件。色譜柱為Atlantis T3 Column（100 mm×2.1 mm，3μm）；流動相為0.1%甲酸（A相）和甲醇（B相）；流速為0.25 mL/min；進(jìn)樣體積為2.0μL；乙螨唑保留時間為7.31 min；啶蟲脒保留時間為5.28 min；流動相及梯度洗脫程序見表2。

（2）質(zhì)譜條件。質(zhì)譜掃描模式為電噴霧正離子掃描（ESI+）；離子傳輸管溫度為300℃；噴霧溫度為270℃；噴霧電壓為4000 V；鞘氣（N2）流速為3.62 L/min，輔助氣（N2）流速為5.38 L/min，放電電流為4.0μA，SRM檢測模式；乙螨唑和啶蟲脒質(zhì)譜檢測參數(shù)見表3。

2結(jié)果與分析

2.1質(zhì)譜條件的優(yōu)化

選擇ESI+離子源，將1 mg/L的農(nóng)藥標(biāo)樣經(jīng)注射泵注入質(zhì)譜，調(diào)節(jié)合適的注射泵流速及離子源氣流、電壓、溫度等使待測物信號大于106響應(yīng)，且響應(yīng)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。通過全掃描確定母離子，選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM模式）進(jìn)行二級質(zhì)譜自動優(yōu)化，分析質(zhì)譜圖及碰撞能量，最終確定單個農(nóng)藥的質(zhì)譜檢測參數(shù)。

2.2線性范圍和靈敏度

將蜜柚空白樣品按上述QuEChERS方法進(jìn)行處理，得到空白基質(zhì)溶液，配制基質(zhì)匹配系列標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)樣分析，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2種農(nóng)藥在0.5～500μg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，乙螨唑的線性回歸方程如式（1），啶蟲脒的線性回歸方程如式（2）。

以3倍和10倍信噪比（S/N）計算檢出限和定量限，乙螨唑的檢出限為0.05μg/kg、定量限為0.17μg/kg，啶蟲脒的檢出限為0.06μg/kg、定量限為0.20μg/kg。

2.3添加回收試驗(yàn)

在蜜柚空白樣品中分別加入2、20和200μg/kg 3個水平的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，每個水平重復(fù)5次。按1.3.1和1.3.2方法進(jìn)行前處理和上機(jī)測定，乙螨唑的回收率為86.6%～97.6%、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為2.6%～12.0%，啶蟲脒的回收率為80.2%～ 109.4%、RSD為7.2%～9.6%。表明該方法適用于蜜柚中乙螨唑和啶蟲脒的殘留測定。

2.4殘留動態(tài)及消解規(guī)律

2.4.1殘留量與消解率乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留消解動態(tài)試驗(yàn)結(jié)果（表4～5）顯示，不同施藥劑量處理的原始沉積量存在一定差異。按推薦劑量（5000倍液）處理，乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚上的原始沉積量分別為0.115～0.121、0.132～0.143 mg/kg，而加倍劑量（2500倍液）處理分別為0.213～0.232、0.241～0.255 mg/kg，說明2種農(nóng)藥的原始沉積量與其施藥劑量有關(guān)。

在施藥劑量和采樣時間相同的條件下，2種農(nóng)藥套袋處理的消解率均略低于無套袋處理，但在施藥后30天消解率均大于98%，最終趨于一致。

2.4.2殘留消解規(guī)律及最終殘留對2種農(nóng)藥進(jìn)行回歸分析（表6～7），其殘留消解動態(tài)均符合一級動力學(xué)方程。乙螨唑在蜜柚中4種處理的相關(guān)系數(shù)（r）在0.9925～0.9960之間，消解系數(shù)（k）在0.1267～0.1596之間，套袋處理的半衰期（T1/2）為5.30～5.47天，消解99%所需要的時間（T0.99）為35.1～36.3天；無套袋處理的T1/2為4.34～4.54天，T0.99為28.8～30.1天，套袋處理的半衰期略長于無套袋的半衰期。

啶蟲脒4種處理的相關(guān)系數(shù)（r）在0.9941～0.9999之間，消解系數(shù)（k）在0.1824～0.2278之間，套袋處理的T1/2為3.42～3.80天，T0.99所需要的時間為22.7～25.2天；無套袋處理的T1/2為3.04～3.70天，T0.99為20.2～24.5天，套袋對啶蟲脒的半衰期影響不大。

在蜜柚成熟收獲時（施藥后65天）進(jìn)行采樣，測定其最終殘留量，2種農(nóng)藥的4種處理均未檢出其殘留。

3討論

本試驗(yàn)建立了QuEChERS結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜快速檢測方法，對蜜柚中乙螨唑和啶蟲脒的殘留量進(jìn)行測定。乙螨唑的檢出限為0.05μg/kg，定量限為0.17μg/kg，回收率為86.6%～97.6%；啶蟲脒的檢出限為0.06μg/kg，定量限為0.20μg/kg，回收率為80.2%～ 109.4%。該分析方法操作簡單，靈敏度較高，符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

2種農(nóng)藥在蜜柚中的殘留消解動態(tài)均符合一級動力學(xué)方程，乙螨唑套袋處理的T1/2為5.30～5.47天，無套袋處理的T1/2為4.34～4.54天，套袋處理的半衰期略長于無套袋的半衰期，原因可能是套袋后乙螨唑受光解、雨淋等外界環(huán)境因素影響較小，因而消解較慢。而啶蟲脒套袋處理的T1/2為3.42～3.80天，無套袋處理的T1/2為3.04～3.70天，套袋對啶蟲脒的半衰期影響不大，這可能與啶蟲脒具有內(nèi)吸性有關(guān)，在一定程度上受外界因素干擾較少，但有待于進(jìn)一步研究確認(rèn)。

目前，在GB 2763—2019[25]中最新規(guī)定乙螨唑、啶蟲脒在蜜柚上的最大殘留限量（MRL）分別為0.1、2 mg/kg，根據(jù)殘留消解動力學(xué)方程測算（表6），乙螨唑套袋處理的安全間隔期分別為0.9、6.2天，無套袋處理的安全間隔期分別為0.9、5.7天，不同的施藥劑量對其安全間隔期有較大的影響；而啶蟲脒在蜜柚上的MRL值較大，按常規(guī)方法進(jìn)行噴施則無安全間隔期問題。本研究先充分施藥再進(jìn)行套袋，采用1次施藥多次采樣檢測的方法，并在果實(shí)成熟后測定其最終殘留量，2種農(nóng)藥的4種處理均未檢出其殘留，表明2種農(nóng)藥在蜜柚上使用具有較好的安全性。對蜜柚進(jìn)行套袋可以減少農(nóng)藥使用次數(shù)，節(jié)省生產(chǎn)成本，促進(jìn)蜜柚產(chǎn)業(yè)綠色發(fā)展。

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