青藤堿在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

崔勝男，呂彥霖，雷曉陽(yáng)，蒲胤，賀電

貴州醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，貴陽(yáng)550004

青風(fēng)藤味苦，有祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)及利小便的功效，主要用于風(fēng)濕痹痛、關(guān)節(jié)腫脹及淋麻瘙癢等癥狀的治療。應(yīng)用青風(fēng)藤有效成分組合的復(fù)方成藥治療風(fēng)濕性疾病、痛風(fēng)和糖尿病周圍神經(jīng)病變等均有較好的療效，同時(shí)不良反應(yīng)小，價(jià)格低廉。青藤堿是從中草藥青風(fēng)藤的莖和根中分離提純而來(lái)的生物活性堿，具有免疫抑制和抗炎作用［1-2］。近年來(lái)對(duì)青藤堿的研究不斷深入，現(xiàn)已證實(shí)其具有多種藥理活性。同時(shí)，青藤堿在多數(shù)神經(jīng)系統(tǒng)疾病如多發(fā)性硬化、創(chuàng)傷性腦損傷、神經(jīng)病理性痛及腦卒中相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究中均展示出了優(yōu)秀的神經(jīng)保護(hù)功能?，F(xiàn)就青藤堿在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為青藤堿在抗神經(jīng)系統(tǒng)疾病領(lǐng)域中的臨床應(yīng)用及科研開發(fā)提供參考。

1 青藤堿在多發(fā)性硬化中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究

多發(fā)性硬化是一種慢性神經(jīng)炎癥性疾病，以神經(jīng)元持續(xù)丟失與免疫介導(dǎo)的脫髓鞘過(guò)程為特征，繼而導(dǎo)致軸突損傷和丟失，最常累及腦室周圍、小腦、腦干、脊髓、近皮質(zhì)和視神經(jīng)等部位，臨床上常表現(xiàn)為病灶時(shí)間與空間多發(fā)性的特點(diǎn)［3-4］。雖然早期多發(fā)性硬化可以通過(guò)免疫調(diào)節(jié)劑和免疫抑制劑得到改善，但進(jìn)展期大多缺乏特效療法［5-6］。臨床上仍然需要新的有效藥物來(lái)促進(jìn)髓鞘再分化和限制免疫細(xì)胞浸潤(rùn)。

KIASALARI等［7］用青藤堿作用于髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白誘導(dǎo)的多發(fā)性硬化C57BL/6 小鼠模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，25 或100 mg/kg 青藤堿均可抑制NLRP3炎癥體及其連接的Caspase1 焦磷酸化途徑，并抑制模型中小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活和促炎細(xì)胞因子的釋放，通過(guò)恢復(fù)抗炎細(xì)胞因子和改善運(yùn)動(dòng)功能，顯著減輕小鼠脊髓的神經(jīng)炎癥和脫髓鞘。這表明，青藤堿在多發(fā)性硬化的小鼠模型中發(fā)揮抗炎和抗凋亡作用，進(jìn)而發(fā)揮優(yōu)秀的神經(jīng)保護(hù)作用。

2 青藤堿在創(chuàng)傷性損傷中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究

創(chuàng)傷性腦損傷的常見(jiàn)病因有高處墜落、工傷事故、交通事故等，其中腦損傷包括腦水腫、腦挫裂傷、腦震蕩等，且腦損傷后續(xù)的繼發(fā)性腦損傷神經(jīng)細(xì)胞死亡等嚴(yán)重危害患者生命，目前尚無(wú)有效治療方法。李軍等［8］研究發(fā)現(xiàn)，30 或 60 mg/kg 青藤堿腹腔注射，均可降低腦外傷模型大鼠炎癥細(xì)胞因子及高遷移率族蛋白1 的表達(dá)水平，且60 mg/kg 青藤堿效果更明顯，有利于病情恢復(fù)。YANG 等［9］研究發(fā)現(xiàn)，30 mg/kg 青藤堿腹腔注射可以激活核因子E2 相關(guān)因子（Nrf-2）抗氧化反應(yīng)元件途徑，在創(chuàng)傷性腦損傷小鼠模型中發(fā)揮優(yōu)秀的神經(jīng)保護(hù)作用。姜安琪兒等［10］在大鼠腦外傷模型中應(yīng)用青藤堿，發(fā)現(xiàn)30 或60 mg/kg青藤堿腹腔注射均可降低急性腦外傷模型大鼠腦組織水通道蛋白（APQ）4、APQ-5 的蛋白與mRNA表達(dá)，減輕腦水腫和腦組織損傷，其治療效果呈量效相關(guān)性。

創(chuàng)傷性脊髓損傷是指外力直接或間接作用于脊髓，造成脊髓結(jié)構(gòu)和功能損傷，具有致殘性［11］。脊髓損傷后的病理生理過(guò)程一般可分為原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷。原發(fā)性損傷是指脊髓受到機(jī)械或物理?yè)p傷，其后果是不可逆的；原發(fā)損傷后發(fā)生的繼發(fā)性損傷增加了疾病的復(fù)雜性，進(jìn)一步加重?fù)p傷程度，擴(kuò)大損傷范圍。創(chuàng)傷性脊髓損傷后繼發(fā)性損傷會(huì)導(dǎo)致相關(guān)的運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)和神經(jīng)損傷，括約肌功能障礙、肌力異常等病理改變，因此對(duì)創(chuàng)傷性脊髓損傷后繼發(fā)性損傷的干預(yù)非常重要［12］。雖然二次損傷的分子機(jī)制仍不清楚，但氧化應(yīng)激和炎癥在細(xì)胞凋亡和損傷擴(kuò)大中起著至關(guān)重要的作用［13］。在神經(jīng)元細(xì)胞抗氧化應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)AN 等［14］發(fā)現(xiàn) 1 μmol/L 的青藤堿預(yù)處理即可激活PC-12 細(xì)胞中Nrf-2 抗氧化系統(tǒng)，包括Nrf-2、血紅素氧合酶1、磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化還原酶1 的信號(hào)通路，增強(qiáng)神經(jīng)元細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的抵抗力，保護(hù)神經(jīng)元細(xì)胞免受H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷，這表明青藤堿可以有效保護(hù)神經(jīng)元細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷。ZHANG 等［15］進(jìn)一步研究了青藤堿對(duì)創(chuàng)傷性脊髓損傷大鼠的治療作用及分子機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)40 mg/kg 青藤堿腹腔注射可提高創(chuàng)傷性脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能，減輕組織損傷，發(fā)揮了減輕組織水腫和防止血管破裂的作用；另外，青藤堿可激活損傷脊髓Nrf-2抗氧化系統(tǒng)，顯著減少炎癥細(xì)胞因子和氧化應(yīng)激因子的釋放，進(jìn)而減輕神經(jīng)功能缺損，抑制神經(jīng)元細(xì)胞凋亡。上述結(jié)果均表明青藤堿在脊髓損傷中可發(fā)揮優(yōu)秀的神經(jīng)保護(hù)作用。

3 青藤堿在神經(jīng)病理性痛中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究

神經(jīng)病理性痛是由軀體感覺(jué)系統(tǒng)受損或疾病導(dǎo)致的一種慢性疼痛，臨床表現(xiàn)常見(jiàn)為異常疼痛、自發(fā)性疼痛、觸誘發(fā)痛和痛覺(jué)過(guò)敏等，可誘發(fā)患者失眠、焦慮甚至抑郁等，病情具有復(fù)雜性，長(zhǎng)期性，且可產(chǎn)生治療抵抗，傳統(tǒng)鎮(zhèn)痛藥物治療效果不佳或存在嚴(yán)重的不良反應(yīng)［16-17］。研究發(fā)現(xiàn)，40 mg/kg 青藤堿腹腔注射治療可以顯著抑制神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型中脊髓背角神經(jīng)元凋亡，降低脊髓組織氧化應(yīng)激指標(biāo)水平，提高大鼠痛閾［18］。RAO 等［19］同樣研究發(fā)現(xiàn)，40 mg/kg 的青藤堿可顯著抑制神經(jīng)性疼痛大鼠模型中P2X3受體表達(dá)和激活，抑制p38 MAPK 磷酸化和激活，減輕大鼠的熱痛覺(jué)和機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏。在紫杉醇誘導(dǎo)的大鼠神經(jīng)病理性痛模型中，樊真真等［20］發(fā)現(xiàn)，10 或 40 mg/kg 青藤堿腹腔注射均可提升大鼠50%機(jī)械縮足反應(yīng)閾值并延長(zhǎng)熱縮足潛伏期。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明，在神經(jīng)病理性痛大鼠模型中，青藤堿可以抑制神經(jīng)元凋亡，提高疼痛閾值，減輕大鼠痛苦，在神經(jīng)病理痛模型中發(fā)揮鎮(zhèn)痛及神經(jīng)保護(hù)作用。

4 青藤堿在腦卒中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究

腦卒中是一種急性腦血管疾病，是由于腦血管突然破裂或因血管阻塞導(dǎo)致血液不能流入大腦而引起腦組織損傷的一組疾病，包括缺血性和出血性卒中。出血性腦卒中又稱腦出血，是由情緒激動(dòng)、過(guò)度操勞等導(dǎo)致血壓急劇增高，引起腦血管破裂出血，具有較高的致殘率和病死率［21］。雷皓尹等［22］通過(guò)腦內(nèi)尾狀核注射凝血酶Ⅶ誘發(fā)尾殼核出血構(gòu)建大鼠腦出血模型，采用改良Longa 分級(jí)法評(píng)價(jià)大鼠神經(jīng)功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)50、100、200 mg/kg 青藤堿灌胃治療可顯著降低大鼠神經(jīng)功能評(píng)分，減輕腦出血大鼠腦水腫并降低炎癥因子表達(dá)水平。

缺血性腦卒中又稱腦梗死，是老年患者臨床常見(jiàn)的腦血管疾病，是指腦循環(huán)發(fā)生阻塞從而導(dǎo)致大腦供血不足，進(jìn)而發(fā)生局限性腦功能缺損，伴有神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞損傷。多數(shù)患者出現(xiàn)殘疾或腦血管病等嚴(yán)重后遺癥，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，給家庭和社會(huì)帶來(lái)極大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［23-24］。在可逆性大鼠中動(dòng)脈閉塞模擬的腦缺血再灌注模型中，YANG 等［25］研究發(fā)現(xiàn)，缺血前尾靜脈注射青藤堿（90 mg/kg）可通過(guò)抗炎、減輕酸中毒、改善能量代謝、抑制ASIC-1a 水平等發(fā)揮腦保護(hù)作用。有學(xué)者［26-27］分別建立了實(shí)驗(yàn)性腦缺血小鼠模型和氧糖剝奪處理的星形膠質(zhì)細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞體外模型，發(fā)現(xiàn)青藤堿不僅可以減輕腦中動(dòng)脈閉塞后所帶來(lái)的腦梗死、腦水腫、神經(jīng)元凋亡和神經(jīng)功能缺損，還可通過(guò)依賴AMPK 的途徑抑制NLRP3 炎性體活化及靶向星形細(xì)胞多巴胺D2 受體和CRYAB/STAT3 途徑來(lái)抑制炎癥反應(yīng)，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)和抗炎作用。

5 青藤堿在阿爾茨海默病中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究

阿爾茨海默病是一種以淀粉樣斑塊和神經(jīng)纖維纏結(jié)為特征的神經(jīng)退行性疾病，主要表現(xiàn)為進(jìn)行性記憶和認(rèn)知功能障礙。淀粉樣β蛋白的寡聚體對(duì)神經(jīng)元有毒性，它們可以通過(guò)直接作用殺死神經(jīng)元，這被稱為直接神經(jīng)毒性。在神經(jīng)毒性的間接模式中，β 淀粉樣蛋白作用于膠質(zhì)細(xì)胞，引起毒性反應(yīng)和炎癥因子釋放，最終殺死神經(jīng)元。兩種毒性作用機(jī)制在阿爾茨海默病的發(fā)展中都起著重要作用［28-30］。SINGH 等［31］研究發(fā)現(xiàn)，100 μmol/L 的青藤堿可保護(hù)海馬神經(jīng)元HT22 細(xì)胞與人類神經(jīng)元免受淀粉樣β誘導(dǎo)的間接毒性，此外，青藤堿還可防止淀粉樣蛋白β誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞系C8D1A產(chǎn)生活性氧、NO和炎癥相關(guān)分子，從而產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用。

6 青藤堿在癲癇中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究

癲癇是一種常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，以大腦神經(jīng)元異常放電引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)短暫性障礙為特征。癲癇由多種病因引起，發(fā)病率及致殘率高，治療難度大，病程長(zhǎng)［32-33］。最近研究表明，NLRP1 炎性小體在癲癇發(fā)病及顳葉癲癇發(fā)作中起重要作用。NLRP1 炎性小體介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能是癲癇發(fā)病中關(guān)鍵的生理病理變化［34］。在戊四氮誘導(dǎo)建立的慢性癲癇大鼠模型中，GAO 等［35］研究發(fā)現(xiàn)，20、40、80 mg/kg 的青藤堿均可干擾病理過(guò)程，降低NLRP1炎性小體復(fù)合物的表達(dá)及炎癥細(xì)胞因子的釋放，增加大鼠癲癇發(fā)作潛伏期并縮短癲癇發(fā)作持續(xù)時(shí)間，減輕大鼠海馬神經(jīng)元損害，展現(xiàn)出優(yōu)秀的抗驚厥和神經(jīng)保護(hù)作用。另外，RAMAZI等［36］研究表明，在海馬內(nèi)海藻酸酯誘導(dǎo)的大鼠癲癇模型中，青藤堿可減輕海馬氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、減少細(xì)胞焦亡和凋亡。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明青藤堿在癲癇模型中可發(fā)揮優(yōu)秀的抗驚厥和神經(jīng)保護(hù)作用。

7 青藤堿在偏頭痛中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究

偏頭痛是一種反復(fù)發(fā)作的原發(fā)性頭痛，是臨床常見(jiàn)病和多發(fā)病，目前治療效果并不理想。有學(xué)者在大鼠偏頭痛模型研究中發(fā)現(xiàn)，100、150、200 mg/kg的青藤堿灌胃不僅可以阻斷疼痛刺激信號(hào)傳遞到腦干，還可以抑制腦干組織中c-Fos、c-Jun 表達(dá)，減輕顱內(nèi)疼痛［37］，并能夠顯著減少大鼠蛛網(wǎng)膜下腔小血管周圍炎癥細(xì)胞數(shù)，抑制偏頭痛的無(wú)菌性神經(jīng)源性炎癥反應(yīng)，治療效果呈劑量依賴性［38］。中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)是參與調(diào)節(jié)中樞疼痛的重要結(jié)構(gòu)。它包含與偏頭痛發(fā)作密切相關(guān)的各種炎癥因子、神經(jīng)肽、神經(jīng)遞質(zhì)及其相關(guān)受體。易桂標(biāo)等［39］研究發(fā)現(xiàn)，50、100、200 mg/kg 的青藤堿灌胃可通過(guò)抑制中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)NF-κB 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和環(huán)氧合酶2 表達(dá)，抑制炎癥因子釋放，從而改善偏頭痛大鼠的行為癥狀變化，呈劑量依賴性。另外，詹劍等［40］同樣發(fā)現(xiàn)了100 mg/kg 的青藤堿灌胃治療可以減輕偏頭痛大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)的神經(jīng)源性炎癥反應(yīng)，上調(diào)中樞性鎮(zhèn)痛神經(jīng)遞質(zhì)5-HT活性，以達(dá)到緩解偏頭痛發(fā)作的作用。

綜上所述，隨著國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的不斷深入，青藤堿對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病的神經(jīng)保護(hù)作用已在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)中充分證實(shí)?，F(xiàn)有的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均表明，青藤堿可以阻斷或干擾神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)生發(fā)展中的多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，通過(guò)減輕炎癥、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡等途徑表現(xiàn)出神經(jīng)保護(hù)能力。作為一種多靶點(diǎn)的神經(jīng)保護(hù)藥，青藤堿在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的預(yù)防和治療方面具有良好的臨床應(yīng)用前景。然而，關(guān)于青藤堿對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制，多數(shù)藥效及藥理研究?jī)H局限于細(xì)胞和動(dòng)物研究，臨床研究欠缺。倘若將青藤堿應(yīng)用于臨床治療，尚需大量的臨床數(shù)據(jù)資料支持。