談強制免疫疫苗免疫效果跟蹤監測時樣品采集要點

佟玉紅

談強制免疫疫苗免疫效果跟蹤監測時樣品采集要點

佟玉紅

（遼寧省農業發展服務中心，遼寧 沈陽 110032）

強制免疫疫苗免疫效果跟蹤監測是對疫苗免疫效果的真實評價。如何采集到高質量的樣品，對正確評價疫苗免疫效果起到至關重要的作用。筆者就采集前的準備、采樣時間安排、采樣技術、樣品編號、個人防護、保存運送等十個方面進行了闡述。

為科學評價重大動物疫病強制免疫疫苗的免疫效果，更好地保障強制免疫工作高質量完成，遼寧省對所有中標企業的疫苗在全省各市開展疫苗免疫效果跟蹤監測評價，遴選優質疫苗，為疫苗招標采購提供科學依據。筆者從事此項工作多年，為了能采集到高質量的免疫前、后樣品，結合自身實踐談一下采樣要點，以期對免疫監測工作有所幫助。

1 選擇監測場（戶）要嚴格

疫苗免疫效果監測評估對象要選擇出生后未免疫的動物，而且數量充分，臨床健康，飼養管理、飼養環境良好。

2 采樣前準備工作要充分

一要準備采樣人員的防護用品，如防護服、口罩、手套、防護鏡、鞋套等。二要準備標簽、記號筆、采樣記錄單、記錄本等。三要準備好采樣器材，如注射器、采血針管、酒精棉等采血器材，數量要充足、質量要合格。

3 采樣時間要科學

每個免疫評估動物群均采取4次采樣程序，每次采集的有效樣品家禽一般40份、豬牛羊一般20份。由于不同動物抗體監測時間不同，采集樣品時間也不同，安排免疫和采樣時間要充分考慮到免疫的時效性，科學制定樣品采集方案，嚴格按照規定時間操作，否則，會影響免疫效果監測評價。

3.1 第1次采樣 所有評價動物群均在免疫前進行第1次采樣。

3.2 第2次采樣 禽流感和豬瘟疫苗在首次免疫后21 d進行采樣，口蹄疫、小反芻獸疫疫苗在首次免疫后28 d進行第2次采樣。

3.3 第3次采樣 禽流感、豬瘟和口蹄疫疫苗在二免疫后間隔30 d進行第3次采樣，小反芻獸疫疫苗在首次免疫后間隔60 d進行第3次采樣。

3.4 第4次采樣 第3次采樣30 d后進行第4次采樣。

4 采樣技術要掌握

采樣前應了解采集樣品的有關規定。各類動物均有其不同的特性和執行標準，采集程序和要求也有所不同，因此，采樣前應先掌握有關要求后再去實施，確保樣品送檢得出的檢驗或監測報告的準確性。采樣人員應熟知容器性能、操作方法和采樣技術。禽類通常選擇翅靜脈采血。牛、馬、羊可采取耳靜脈、頸靜脈、前臂靜脈和尾靜脈采血。豬可以采取前腔靜脈采血，用量少時也可從耳靜脈抽取。

5 樣品處理要科學

畜禽血清樣品采集時要用真空采血管或者注射器采集動物血液1～2 ml，注射器內留一些空間，傾斜放置至血液凝固后方可裝袋（最好在溫和環境下放置，以便血清的析出）。

5.1 標準血清樣品采集關鍵因素 一是容器，玻璃試管優于塑料離心管；二是斜面，與空氣接觸面要大，傾斜靜置1～2 h；三是溫度，最佳溫度是體溫；四是時間，室溫靜置最短2 h；五是離心，轉速要低，以1 000轉/ min離心10～15 min。用移液管吸出血清置于離心管中，保證容器完好不遺漏不破損。

5.2 膠凍狀血清成因分析 一是采血前剛喂食，沒有空腹；二是凝血時間不夠；三是營養過剩的脂肪血。

6 樣品編號要有序

樣品編號要統一編制，可以市名稱拼音第一個大寫字母開頭，同動物品種拼音第一個大寫字母組成，比如沈陽市雞（SJ），大連市豬（DZ），鞍山市牛（AN），撫順市羊（FY）。同一品種疫苗2個養殖場，每個養殖場編碼要連續排列。如沈陽市第一個雞場樣品編號為SJ1～SJ40，第二個雞場樣品編號就應是SJ41～SJ80，依此類推。備用樣品不用編號，與編號樣品同放包裝袋中。

7 填寫采樣單要規范

采樣單內容要齊全，如樣品編號、樣品名稱、動物種類、日齡、疫苗名稱、疫苗批號、生產廠家、免疫次數、免疫時間、采樣日期、養殖場名稱、地址、聯系人及聯系方式等。編號與采樣單要一致，具有唯一性和可追溯性。

8 個人防護要全面

在采集樣品過程中，由于人畜密切接觸，易感染人畜共患病。因此，采樣人員要穿好防護服、防護靴，佩戴醫用口罩和乳膠手套，不直接接觸動物樣品。

9 環境污染要避免

要注意人為傳播疫病和污染環境，對打開末用完的疫苗、采樣器材、防護用品等要做好現場清理和無害化處理，避免二次污染。

10 保存運送是關鍵

樣品短時間內可在4～8 ℃ 度低溫保存，不超過2周。如時間較長應凍結保存，注意避免反復凍融。運送時，如果能在采集24 h后送抵實驗室，則可放在4 ℃ 左右的容器中運送。只有在24 h內不能送至實驗室時才可把樣品冷凍，并以此狀態運送。運送時要減少震蕩以免溶血，做好被盜、遺失、外泄、破損等防范。

[1] 孫世穎. 樣品采集的要求及注意事項[J]. 當代畜牧, 2014（11）: 45-46.

[2] 徐百萬. 動物免疫采樣與監測技術手冊[M]. 北京: 中國農業出版社, 2007.

[3] 羅運良, 曹新民. 新編獸醫手冊[M]. 長沙: 湖南科學技術出版社, 2011.

（2021–03–25）

S851.33

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1007-1733（2021）05-0044-02