微生物快速檢驗技術的應用研究進展

天津市第三中心醫院分院（300250）李麗華 宋金娜 李丹丹

微生物感染性疾病是臨床比較多發的疾病之一，該病會對病人造成比較大的損傷，甚至會對病人的生命安全造成威脅。再加上部分病人長期濫用抗生素類藥物，患病期間身體體質比較差，很容易導致細菌的抗藥性提升，還會使病人出現其他并發癥，給臨床治療造成較大難度。此外，城市化不斷發展，人口流動速度不斷增大，這也使傳染病呈現聚集性傳播高發特征，擴大了傳染病的受感染人群。給傳染病防治帶來了新的困難。要想打破傳統微生物檢驗技術的弊端，就需要探索出一套具有安全穩定、快速精準的檢驗技術，以提升臨床診斷的可靠性和時效性，因此，這也成為相關領域人士的重要研究內容。

1 微生物自動化鑒定技術

傳統實驗室的臨床微生物檢測需要經過細菌培養才能獲得最終檢測結果，這種檢測方式耗時費力、操作難度高，對檢測人員的技術能力要求較為嚴格，一旦在細菌培養中出現操作失誤，會直接影響到檢測結果的準確性。此外，由于細菌培養和繁殖的時間比較長，直接拉長了整個檢測周期，無法滿足當前臨床傳染性疾病的治療和防控工作要求。為了更好地應對這一現實問題，逐漸將電子自動化技術與微生物檢驗技術相結合，探索出了具有自動化特征的細菌培養鑒定技術[1]。

1.1 全自動微生物鑒定專家系統 實現了全自動化檢測，在保證檢測準確性的前提下，提升了檢測速度，在幾小時內就可以獲得細菌的藥敏測試等檢測結果。依托這一檢測技術，可以對細菌藥敏結果進行全方位分析，保證細菌藥敏結果解釋的準確性和合理性，從而為傳染性疾病的臨床治療與防控提供決策建議。

1.2 全自動血液細菌培養儀 這一技術具有比較突出的臨床應用優勢，操作簡單而且檢測人員工作量比較少，基本上實現了全過程自動化檢測。在標本收入培養瓶后只需要根據儀器提示將培養瓶放入到儀器中，配合熒光檢測器，培養儀就會自動完成培養和動態檢測，準確找出陽性瓶，極大提升了檢測靈敏度和檢測效率[2]。

2 免疫學實驗技術

2.1 免疫酶技術 該技術目前已經被應用在微生物臨床檢測中，主要是通過酶的催化作用將物質進行轉化，利用了抗原抗體反應特異性原理。在實驗中將酶定為標記物，然后觀察酶催化底物時所發生的顏色反應，從而得到抗原抗體反應結論。這種技術可以應對臨床多種傳染性疾病的治療需要，例如肺炎支原體傳染病治療、流感病毒治療等。目前在臨床檢驗中，運用最為廣泛的免疫酶技術是ELISA（酶聯免疫吸附試驗），該技術具有比較高的靈敏度，能夠完成病毒抗原和抗體的檢測需要。

2.2 熒光免疫技術 該技術是利用免疫學技術與熒光標記相結合而產生的。將熒光素視為標記物，通過熒光顯微鏡對標本進行觀察，然后對抗原或者抗體的基本情況進行確定。這種技術的主要應用優勢在于檢測效率高、靈敏度高等特征顯著[3]。

3 生物分子學技術

3.1 聚合酶鏈反應技術（PCR技術） 該技術主要是對DNA的復制進行模擬，擴大檢測目標基因的整體數量，已經廣泛應用在消化性潰瘍、結腦（結核性腦膜炎）、腦膜炎球菌性腦膜炎和衣原體感染等疾病的臨床檢查中。能夠對待檢微生物進行快速檢驗，具有檢測靈敏度高、檢測速度快等臨床應用優勢，尤其適合一些突發公共衛生事件的臨床微生物檢測需要，可以快速完成細菌的耐藥性檢測和流行病學檢測。3.2 分子雜交及其相關技術 在傳統意義上，該技術主要應用于分子生物學領域，后經不斷發展，在臨床微生物檢測中的應用也逐漸增多。主要是將被檢測單鏈核酸分子通過DNA雜交，使其變成穩定的雙鏈核酸分子。在分子雜交階段呈現高度特異性，該實際臨床微生物檢驗過程中具有準確度高，不受到細菌干擾，檢測簡便、檢測速度快等應用優勢，非常適合微生物快速檢驗的臨床疾病治療和防控需要[4]。

4 分子生物傳感器

分子生物傳感器是微生物快速檢測領域中的一類新興技術，非常適合微生物傳染性疾病的臨床診斷與防治工作，具有檢測結果準確、操作技術簡單、檢測速度比較快等臨床應用優勢，且應用范圍和應用效果正在逐漸提升。該技術實現了化學、物理及生命科學等多個學科的技術綜合，能夠實現對待檢測細菌的快速分析。DNA生物傳感器是目前醫療領域臨床應用最為廣泛的技術，可以幫助醫生更詳細地了解疾病各個階段的發展情況，提升了診斷準確度，也能幫助醫生制定出更為科學、詳細的治療方案，尤其在臨床癌癥治療領域具有比較突出的應用效果[5]。

5 基因芯片技術

基因芯片技術是目前醫療臨床疾病診斷中比較先進的檢測技術之一，靈敏度高、準確度高、檢測速度快、可以實現多類型疾病的共同檢測。針對傳統實驗室微生物檢測技術耗時比較長，檢測結果不全面等缺陷，醫生可以積極采用基因芯片技術，配合臨床治療經驗，提升了臨床診斷的可靠性和準確性。通過基因芯片技術，醫生可以實現快速了解致病菌種類，從而制定科學的治療方案。而且，還能對病菌的耐藥性進行檢驗，這樣可以提高醫生在使用抗生素類藥物治療傳染性疾病時的有效性，避免由于病毒耐藥性而延誤治療時機。基因芯片需要做好以下幾個檢驗準備的操作技術環節：芯片的制備，需要讓DNA按順序排列在芯片上；樣品的制備，對標本進行提取，如果標本數量不足，還需要進行繁殖擴增處理[6]。

6 細菌毒素技術

細菌毒素主要包含菌體外毒素和菌體內毒素兩種，因此，在微生物快速檢測過程中，主要從外毒素檢測和內毒素檢測兩種方法入手。毒素毒力會直接影響到細菌的致病性能力[7]。在臨床微生物檢測中，采取細菌毒素技術能夠比較明顯地提高微生物檢測效率，通過在標本內提取毒素實現快速檢驗目標，檢測結果準確率更為理想。該技術可以幫助醫生對細菌在體內的感染程度進行全面了解，通過內毒素和外毒素兩種檢測方式對細菌種類進行鑒定（外毒素檢測主要應用于白喉毒素和肉毒毒素等方面檢測，內毒素檢測主要檢測病人是否存在革蘭氏陰性菌、內毒素血癥等致病菌），從而實現臨床治療和防控的目的[8]。

7 討論

當前，傳染性疾病呈快速發展、快速傳播的態勢，無論是在身體層面還是心理層面，都對人們造成了比較大的影響。傳統微生物檢驗技術已經無法滿足新時期的臨床傳染性疾病診斷、預防和治療需要，必須要借助快速發展的科學技術，完善微生物檢驗技術，全面提升我國醫療臨床微生物檢驗技術的靈敏度和效率，使微生物檢驗技術可以走向自動化、數字化的發展道路。臨床微生物檢驗人員要充分利用微生物自動化鑒定技術、免疫學技術、生物分子學技術、分子生物傳感器、基因芯片技術、細菌毒素技術等現有快速檢驗技術，并做好新技術的研究與探索，不斷創新出新的微生物快速檢驗技術，從而提升臨床微生物檢驗速度、質量、準確性，為人們提供更優質的醫療服務，提高傳染性疾病的防控能力，保障人們的身體健康及生活安全。