miRNA126與酒精性肝病及其治療相關性的研究

李梁杰 李岳 黃如 Byar Shubh Narayan 程開

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154000)

酒精性肝病(ALD)是由長期大量飲酒所致的慢性肝病，其發病機制尚不明確，且目前酒精攝入的安全閾值尚有爭議，其早期診斷困難并且缺乏針對性的治療，很容易被忽視和漏診。骨髓造血干細胞(HSCs)的自我更新與多向分化或許是酒精性肝纖維化治療的一個方向，并且骨髓細胞移植本身就是血液病的既定治療方法。而且循環中的miRNA在極端條件下(低pH，酸性環境，RNase抗性)具有極大的穩定性，被認為是可替代的非侵入性生物標志物。

1 酒精性肝病的現狀及其治療

酒精性肝病(ALD)是由長期大量飲酒所致的慢性肝病。炎癥等致病因素激活肝星狀細胞(HSC),膠原合成增加、降解減少是其基本病理表現。酒精性肝病(ALD)是世界范圍內最常見的慢性肝病。酒精性脂肪肝(ALD)可從酒精性脂肪肝(AFL)發展為以肝臟炎癥為特征的酒精性脂肪性肝炎(ASH)。慢性ASH最終會導致纖維化和肝硬化，在某些情況下還會導致肝細胞癌(HCC)。此外，嚴重的ASH(伴有或不伴有肝硬化)可導致酒精性肝炎，這是ALD的一種急性臨床表現，與肝功能衰竭和高死亡率有關[1]。全球疾病負擔(GBD)項目估計，2016年有1 256 900人死于肝硬化和慢性肝病。其中，334 900人(27%)可歸因于酒精。此外，有24.5萬人死于與酒精有關的肝癌，占所有肝癌死亡人數的30%，疾病負擔沉重[2]。在世界范圍內，大多數初次被診斷為ALD的患者均未經過早期有關過度飲酒(AUD)的篩查，失去了早期ALD的診斷機會[3]。

我們回顧了最近的研究結果，這些研究表征了與ALD相關的特定的細胞內信號通路、轉錄因子、腸道通透性、活性氧(ROS)、腸源性脂多糖(LPS，又名內毒素)、先天免疫、趨化因子、表觀遺傳學特征、microRNAs和干細胞，從而提高了我們對ALD發病機制的理解[4，5]。盡管取得了這些進展，但目前還沒有針對性的治療方法。

目前，ALD的基礎治療仍然是戒酒、營養支持和藥物治療。藥物治療無反應者的不良結局強調了對這些患者進行早期肝移植評估的必要性。在歐洲，超過30%的肝移植是針對ALD進行的[2]。然而，由存在各種問題，包括缺乏捐助者、手術損傷、排斥和高費用，肝移植的應用受到很大的限制[6]。

細胞移植療法是近年提出的一種微創替代療法，可能并發癥較少，是肝病細胞治療發展的寶貴資源。然而，肝細胞移植很少在人體臨床試驗中產生治療效果，主要是因為移植細胞的數量過低，無法達到預期的生物效應，例如，膽汁的結合。鑒于肝細胞移植的上述問題，骨髓細胞(BMC)目前進入考慮范圍[6]，BMC移植本身就是一種既定的血液病治療方法。人體干細胞在保持分化能力的同時，可以大量增殖，是發展肝病細胞治療的極有價值的資源。特別是造血干細胞(HSCs)已經被證明通過細胞融合的過程采用了受體細胞的表型[7，8]。細胞融合被認為是BMC與肝細胞分化的原因[9，10]。最近的數據顯示，自體同源的BMC表達MMP-9和MMP-13，因此，它們可能是庫普弗細胞(Kupffer cell)的前體，并有助于肝纖維化的自發回歸[11]。另一方面，福布斯等人報道說，骨髓細胞也能分化成星狀細胞，這將加速纖維化[12]。最新研究表明，干細胞治療可以減少肝臟炎癥，進而改善纖維化，這可能是肝硬化患者的有前景的一種治療措施[13]。

2 miRNA與酒精性肝病的研究現狀

microRNAs(miRNAs)是1993年首次描述的20～22個核苷酸長度的非編碼RNA。miRNAs在多種細胞過程中發揮核心作用，包括發育、免疫、細胞周期控制、新陳代謝、病毒或細菌疾病、干細胞分化和腫瘤發生[14,15]。纖維化和癌癥是慢性肝病的兩大并發癥。microRNAs與纖維化和癌癥的發展有關，構成了潛在的治療靶點，因此在酒精性肝病中的研究也日益廣泛，如：miR-155被發現是與酒精相關的調節肝細胞自噬和外切體產生的介質有關，自噬是通過消除酒精來維持體內穩定的關鍵途徑[16]；miR-21是在多種纖維化模型中激活的肝星狀細胞(HSC)中表現出最強上調的microRNA[17]；MicroRNA-200A靶向ZEB2誘導酒精性肝病細胞凋亡[18]；miR-122a在調節腸道通透性方面發揮著重要作用[19]。目前，miRNA與ALD的相關研究多數在于對ALD發病機制的研究，對miRNA與ALD相關的臨床治療的研究相對較少。

3 miRNA126及其研究

microRNAs在免疫系統中的生理和病理作用一文中標記出，造血干細胞(HSCs)是表達micro126的細胞類型[20]。miRNA-126位于染色體9q34.3，是表皮生長因子樣域蛋白7(EGFL7)的一個內含子[21]，miRNA-126通常表現出細胞抑制特性，包括miRNA-126的表達可抑制 IL-23R介導的TNF-α或IFN-γ在膠原蛋白誘導類風濕性關節炎小鼠模型中的成纖維細胞樣合成細胞的產生[22]，現有實驗證明，TNF-α、IFN、IL-6、IL-1等在酒精性肝病中占有重要作用[23]。阻斷miRNA-126成熟，驅動肺纖維化發生[24]。在“肝臟miR-126是檢測乙型肝炎病毒感染肝細胞癌的潛在血漿生物標志物”[25]一文中指出：在肝癌組織中檢測到6個miRNAs(60%)(miR-15a、miR-21、miR-29b-3p、miR-126、miR-142-3p和miR-193a-5p)，而在血液中只檢測到兩個miRNAs(miR-142-3p和miR-126)(20%)。文章表明，循環中的miRNAs可能并不總是反映miRNAs的細胞內輪廓，只有少數選擇性miRNAs富集在血漿中。文章還表明：miR126可能是由肝臟分泌的miRNAs，并且miR-126在乙型肝炎病毒感染肝細胞癌的肝組織和血漿中具有高度特異性。micro126作為造血干細胞的表達類型，在多種疾病中表現出抑制纖維化特征, 但是，miRNA126與酒精性肝病纖維化是否相關，目前還沒有人研究過。

從化學物質到病毒的各種因素都會引發肝損傷，臨床上可以通過生化標記物來評估，包括血清轉氨酶(ALT和AST)。然而，這些臨床使用的肝損傷標志物有幾個局限性，包括對新鮮血液樣本的要求，缺乏組織特異性，并且無法區分肝細胞損傷和炎癥(導致慢性肝病的兩個重要的肝臟病理決定因素)。與當前的臨床“標準”相比，循環中的miRNA有幾個優點。miRNA在極端條件下(低pH，酸性環境，RNase抗性)具有極大的穩定性，被認為是可替代的非侵入性生物標志物[26，27]。其實,不僅是血清,人的其他體液如尿液、汗液、唾液等中同樣存在穩定表達的miRNA。因此這些miRNA在某些特定條件下也有望成為很好的診斷標志物[28]。Al-Kafaji G等人表明2型糖尿病腎病患者循環microRNA-126表達降低：一個潛在的基于血液的生物標記物，此外，循環miR-126與甘油三酯或低密度脂蛋白之間的負相關性可能表明miR-126可能參與糖尿病腎病(DN)的脂質代謝[29]。如果能夠開發出一種操控miRNA分子的新型技術,對酒精性肝病的早期診斷和治療都具有重大意義。

4 展望

miRNA可以通過調控基因的表達導致ALD,構成了ALD潛在的治療靶點。循環中的miRNA具有極大的穩定性，且人的其他體液如尿液、汗液、唾液等中同樣存在穩定表達的miRNA，被認為是可替代的非侵入性生物標志物。曾經有報道稱，2015年，由朱興奮和覓瑞創始人周礪寒、鄒瑞陽研發的胃癌早篩試劑盒獲得專利。這項技術讓miRNA檢測走向了癌癥早篩的臨床應用。但是目前還沒有miRNA用于臨床治療的先例。骨髓造血干細胞(HSCs)的自我更新與多向分化或許是酒精性肝纖維化治療的一個方向，并且骨髓細胞移植本身就是血液病的既定治療方法。miRNA126作為造血干細胞(HSCs)表達的一種RNA, 在多種疾病中表現出抑制纖維化特征，最近研究表明干細胞治療可以減少肝臟炎癥，進而改善纖維化，這可能是肝硬化患者的有前景的一種治療措施。如果將miRNA126與干細胞治療相結合，或許是酒精性肝病的一個治療靶點。研究人員就希望能夠開發出一種操控miRNA分子的新型技術, 或許miRNA126可以作為改善晚期酒精性肝硬化患者肝功能的靶點。