維甲酸受體在食管胃癌前病變中的表達研究

金 哲，崔少杰，金建軍

食管癌(esophagus cancer,EC)、胃癌(gastric cancer,GC)都是常見的惡性腫瘤，尤其以日本以及東亞地區高發。我國是食管癌、胃癌的發生大國，發病率較高，病死率也很高。研究發現，食管癌、胃癌的發生是一個多因素、多步驟、慢性進行性的發展過程，包括食管、胃黏膜上皮細胞的增殖和凋亡失平衡，癌基因、抑癌基因以及生長因子等[1]。多數文獻支持癌前病變與食管癌、胃癌有著密切關系，且是多步驟進行性發展的過程。異型性級別越高，癌變的發生率也越高[2]。因此，對食管/胃癌前病變的發病機制、診斷以及治療的研究成為診治的關鍵環節。維甲酸(retinoic acids,RA)是臨床上廣泛應用的一種誘導分化劑，但必須通過維甲酸受體才能發揮生物活性[3]。這些受體有兩大類：其一為維甲酸受體(retinoic acid receptors,RARs)，其二為維甲酸X受體(retinoic X receptors,RXRs)，兩類受體都有α、β、γ 3個亞型。研究發現，兩種受體及其亞型在不同器官、組織的分布可能不同，在不同的病理狀態下表達也不一樣[4-6]。那么維甲酸受體在癌前病變組織中表達如何，在食管癌、胃癌的發生發展過程中起何作用，文獻較少報道。本研究用分組對照的方法，調查維甲酸受體的表達與食管/胃癌前病變的關系，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象選取近5 a來在我院消化內科門診或病房就診的患者，均具有胸骨后或上腹部不適。經胃鏡活檢診為慢性胃黏膜炎癥或食管炎癥伴輕、中或重度異型增生，另外可伴或不伴腸化生者共100例，作為觀察組；單純慢性淺表性胃炎、食管炎患者100例，作為對照組。觀察組100例：男49例，女51例，年齡(56.46±11.18)歲，其中食管炎伴異型增生40例，胃炎伴異型增生60例。在這100例中輕、中、重異型增生分別為50、32、18例，另外合并腸化生47例。對照組100例：男50例，女50例，年齡(55.53±12.19)歲。其中食管炎者40例，胃炎者60例。兩組年齡、性別等一般情況的差異無統計學意義。

1.2 入選標準年齡限定范圍在20～72歲之間，病程6個月以上；合并其他臟器疾病者除外；胃鏡取病理要求：一般病人于食管病變處、胃竇部近幽門1～2 cm的相當于3、6、9點鐘部位，以及胃角各鉗取組織1塊，若存在明顯胃黏膜局限病灶者，于病灶部位再鉗取組織2～3塊，標本分別裝瓶做好標記，用福爾馬林及時固定、送檢。

1.3 病理診斷由同一組病理醫師負責，先做病理診斷和分級，根據中國胃食管反流病共識意見和中國慢性胃炎共識意見(2006年) 制定的異型增生分級標準，分輕、中、重3級(本研究腸化生暫不做分級)。然后采用免疫組化法檢測維甲酸受體(抗-維甲酸受體α來源于上海安研商貿有限公司，其余所用檢測試劑均來源于福州邁新生物技術有限公司)。

1.4 維甲酸受體檢測結果判定采用積分法，按Mark Kelley實驗室標準[7]。

1.5 統計學處理數據用統計軟件SPSS 17.0進行全面分析，等級資料和計數資料分別用秩和、χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 單純慢性淺表性胃炎食管炎和食管胃癌前病變組織中維甲酸受體表達見表1。癌前病變組織中維甲酸受體陽性表達低于單純慢性炎癥組，陰性表達高于對照組，兩組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 兩組間維甲酸受體表達情況的比較 例(%)

2.2 不同級別癌前病變組織中維甲酸受體表達見表2。癌前病變組織中從輕度到重度維甲酸受體陽性表達率由高到低，陰性表達率由低到高，三者比較，差異有統計學意義(P<0.05)。

表2 不同級別癌前病變組織中維甲酸受體表達 例(%)

2.3 合并腸化生與不合并腸化生的異型增生組織中維甲酸受體表達見表3。合并腸化生與不合并腸化生的異型增生組織中維甲酸受體表達差別很小，兩者比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

表3 合并與不合并腸化生的異型增生組織中維甲酸受體表達 例(%)

3 討論

維甲酸是臨床上廣泛應用的一種誘導分化劑，但必須通過維甲酸受體才能發揮生物活性。Petkovich等[8]首先報道了維甲酸類受體，它是一種轉錄調節蛋白，這種受體有兩大類：RARs和RXRs，兩個受體家族分別有α、β、γ 3個亞型，這些受體能夠參與調節細胞的發育、增殖、分化等。研究發現每種受體及其亞型在不同器官、組織的分布可能不同，在不同的病理狀態下表達也不一樣。消化道組織中的RARs含量較豐富，其中RAR-α數量最多且分布廣泛。Wei等[9]通過放射配體結合分析法測出：結腸惡性腫瘤組織細胞核內RAR的含量僅為1.16 fmol·μg-1DNA，平均含量很低，而在正常結腸組織細胞核內RAR的含量則高達2.64 fmol·μg-1DNA，平均含量很高。他們推測細胞核內RAR表達減少很有可能和結腸腫瘤的發生有關。本研究發現癌前病變組織中維甲酸受體表達明顯低于單純慢性胃炎、食管炎組織，且異型增生程度越重，表達越低，提示食管癌、胃癌的發生發展可能與維甲酸受體表達降低有一定關系。本研究合并腸化生與不合并腸化生異型增生組織中維甲酸受體表達差異無統計學意義，需要擴大樣本量進一步研究證實。

有研究提示癌組織中維甲酸受體表達減少是RAR-α基因的啟動子區被甲基化引起的。還有人發現，MCF-7乳腺癌細胞株中RAR-α基因轉錄活性很低，合成量下降，也和啟動子區高甲基化有關,致使信號轉導通路失調,促進了腫瘤的發生和發展[10]。還有研究發現經維甲酸治療后，RAR-α基因的mRNA恢復正常表達[11-12]。這些為維甲酸治療腫瘤和癌前病變提供了理論依據。

另一些研究發現RAR-βmRNA 在正常上皮細胞中的表達提高，而在惡性腫瘤細胞中則降低[13-14]；在有的肝臟惡性腫瘤細胞中RAR-β升高，而在有的宮頸、肺和乳腺等臟器的惡性腫瘤中RAR-β表達則下降，恢復RAR-β表達則可以抑制腫瘤的生長[12,15]。

以上這些無疑對腫瘤發生機制的研究提供了幫助，為腫瘤的防治和食管癌、胃癌癌前病變的治療提供了新的思路。