基于斑馬魚模型的補骨脂毒性相關成分群的高效辨識研究

李佳妍，劉欣欣，寧 青，李彥東，石子琪，韋英杰*

基于斑馬魚模型的補骨脂毒性相關成分群的高效辨識研究

李佳妍1, 2，劉欣欣1, 2，寧 青1, 2，李彥東2，石子琪1, 2，韋英杰1, 2*

1. 南京中醫藥大學第三臨床醫學院，江蘇 南京 210028 2. 江蘇省中醫藥研究院，國家中醫藥管理局中藥釋藥系統重點研究室，江蘇 南京 210028

基于斑馬魚模型結合相關分析高效辨識補骨脂毒性成分群。采用高效液相色譜法測定7個產地18個批次補骨脂中4個香豆素類、4個黃酮類和補骨脂酚的含量。以斑馬魚（6 dpf）死亡率、臟器中毒形態、半數致死濃度（lethal concentration 50，LC50）值為指標，采用斑馬魚模型評價18個批次補骨脂水煎液的毒性。將各類成分的含量分別與斑馬魚LC50值進行相關分析，辨識毒性成分群，并通過對代表成分的斑馬魚毒性評價進行驗證。不同產地18個批次補骨脂水煎液中香豆素類、黃酮類、補骨脂酚的含量差異較大，4個香豆素類成分、黃酮成分（新補骨脂異黃酮）和補骨脂酚含量最大值分別是最小值的3.47～5.60、5.30、6.47倍。斑馬魚毒性評價結果顯示18個批次補骨脂水煎液對斑馬魚毒性差異較大，其中LC50最大值是最小值的7.2倍。毒性與成分含量相關分析結果表明，斑馬魚毒性與黃酮類成分、補骨脂酚的相關性較好（2分別為0.623 4、0.587 8），與香豆素類成分的相關性較低（2為0.187 7）。各類代表成分的毒性評價結果表明，補骨脂酚和3個黃酮成分（補骨脂甲素、新補骨脂異黃酮、補骨脂乙素）是補骨脂致毒的關鍵成分，香豆素類成分的安全性相對較好。斑馬魚模型可高效、靈敏反映不同批次補骨脂毒性的差異，通過毒性與成分含量的相關分析，能夠快速發現補骨脂中毒性相關成分群，為從中藥復雜體系快速發現毒性及其相關物質提供依據。

補骨脂；毒性成分；斑馬魚；相關分析；補骨脂甲素；新補骨脂異黃酮；補骨脂乙素

近年來，補骨脂及其復方的肝毒性作用受到廣泛關注[1-2]。國家藥品不良反應監測數據分析結果顯示，服用含補骨脂的仙靈骨葆口服制劑具有肝損傷風險，患者臨床表現為乏力、食欲不振、惡心、上腹脹痛、尿黃、目黃、皮膚黃染等，并伴有谷丙酸氨基轉移酶、天門冬氨酸氨基轉移酶、膽紅素等升高，嚴重者可出現肝衰竭。補骨脂可能會導致膽汁瘀積性肝損傷，Wang等[3]研究表明補骨脂可能通過抑制7α-羥化酶（cholesterol 7α-hydroxylase，CYP7A1）、膽鹽輸出泵（bile saltexport pump，BSEP）、細胞色素P450（cytochrome P450，CYP450）等膽汁運輸相關蛋白的表達，從而誘導大鼠膽汁瘀積性肝損傷。補骨脂化學成分復雜，目前已從中分離并鑒定出117個化合物，包括香豆素類、黃酮類、單萜酚類、苯并呋喃類等[4-5]?，F有研究僅報道了補骨脂少數成分（如補骨脂素、異補骨脂素、補骨脂甲素、補骨脂酚等）具有明顯的肝腎毒性[6-9]，而其他成分的安全性尚不明確。因此，如何從復雜體系中快速辨識毒性相關成分是重點和難點問題。

傳統方法常用化學分離結合毒性評價追蹤毒性成分?；瘜W分離純化成分耗時長、成本高、工作強度大，且獲得的化合物量少，常不能滿足評價?，F有的毒性評價模型如哺乳動物模型不能進行規?；Y選，具耗時長、工作強度大、樣品用量大等缺點；體外細胞模型作用環節相對單一，不能體現在體實驗的綜合效果[10-11]。因此，不需進行化學成分分離，且能夠在體高效快速鎖定毒性目標成分群尤為重要。斑馬魚是一種小型熱帶脊椎動物，其基因組與人類基因組的同源性約為87%。斑馬魚發育快、個體小、繁殖多、胚胎透明、實驗周期短，可在微板中實時、動態觀察藥物的毒性作用[12-15]，是近年來高效篩選藥物毒性的理想模式動物模型[12,16]。本研究以補骨脂為對象，采用斑馬魚模型評價7個產地18批補骨脂的毒性，并采用HPLC法測定補骨脂中香豆素類、黃酮類、補骨脂酚含量，進一步分析其毒性與成分的相關性，從而鎖定補骨脂毒性相關成分群，通過對代表成分的毒性評價進行驗證。

1 材料與儀器

1.1 動物

野生型（Tuebigen系后代）斑馬魚，6月齡，購于南京堯順禹生物科技有限公司。成魚在（28.0±0.5）℃的水中自由交配繁殖魚卵，養殖與繁殖方法參照文獻方法[17]。

1.2 藥材

補骨脂購自不同藥店或飲片公司（表1），經江蘇省中醫藥研究院韋英杰研究員鑒定為豆科植物補骨脂L. 的干燥成熟果實。

表1 補骨脂樣品信息

1.3 藥品與試劑

補骨脂素（psoralen，批號110739-201617）、異補骨脂素（isopsoralen，IPS，批號110738-201614）對照品購自中國食品藥品檢定研究院，質量分數均為99.7%；補骨脂苷（psoralenoside，批號180526）、異補骨脂苷（isopsoralenoside，IPSS，批號180524）對照品購自上海源葉生物科技有限公司，質量分數均大于98%；新補骨脂異黃酮（neobavaisoflavone，NBIF，批號DST170522-055）、4′--甲基補骨脂查耳酮（4′--methylbrousso chalcone，BCC，批號DST170522-052）、corylifol A（CA，批號DST170522-073）對照品購自成都德思特生物技術有限公司，質量分數均大于98%；補骨脂甲素（bavachin，BC，又名補骨脂二氫黃酮，批號JZ17031802）、補骨脂乙素（isobavachalcone，IBCC，又名異補骨脂查耳酮，批號JZ1703180）、補骨脂二氫黃酮甲醚（bavachinin A，BCin，批號JZ16071904）、補骨脂定（psoralidin，批號JZ16110406）、補骨脂寧（corylin，又名補骨脂異黃酮，批號JZ16091204）、補骨脂酚（bakuchiol，批號JZ16092103）對照品購自南京景竹生物科技有限公司，質量分數均大于98%；甲醇（批號19085170，色譜純）、乙腈（批號19015157，色譜純）購自美國TEDIA公司；甲酸（批號G1826012，色譜純）購自阿拉丁試劑有限公司；其他試劑均為分析純。

1.4 儀器

ECLIPSE E100顯微鏡（日本Nikon公司）；Stylus TG-4相機（日本Olympus公司）；生化培養箱SPX-80（寧波海曙賽褔實驗儀器廠）；1260型系列高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；KQ3200B超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；AB135-S分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）。

2 方法

2.1 不同產地補骨脂中香豆素類、黃酮類成分、補骨脂酚的HPLC分析

2.1.1 色譜條件 Agilent Zorbax C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相A為0.1%甲酸，B為乙腈，梯度洗脫：0 min，90% A；0～30 min，90%～50% A；30～45 min，50%～40% A；45～55 min，40%～20% A；柱溫25 ℃；體積流量1.0 mL/min；檢測波長246 nm；運行時間55 min；進樣量10 μL。分析不同產地18個批次補骨脂的4個代表香豆素成分補骨脂苷、IPSS、補骨脂素、IPS；4個代表黃酮成分NBIF、BC、BCin、CA和單萜酚補骨脂酚的含量。

2.1.2 對照品溶液配制與線性關系考察 取補骨脂苷、IPSS、補骨脂素、IPS、NBIF、BC、BCin、CA、補骨脂酚適量，精密稱定，加80%甲醇或甲醇分別配制成質量濃度為406.26、200.00、95.00、216.00、192.60、243.20、214.52、291.52、600.00 μg/mL的溶液，采用2倍稀釋法分別進行稀釋，進樣分析，以峰面積積分值為縱坐標（），質量濃度為橫坐標（），進行線性回歸，結果見表2，各成分在質量濃度范圍內線性關系良好。

表2 9種成分的回歸方程

2.1.3 供試品溶液配制與測定 稱取不同產地的補骨脂10 g，分別加10倍量水煎煮2次，每次0.5 h，合并煎液，濾過，濾液加純水至200 mL，調整至藥材質量濃度為50 mg/mL。取400 μL溶液，干燥得到補骨脂水煎液干粉（相當于20 mg生藥）。取補骨脂水煎液干粉適量，置2 mL量瓶中，加80%甲醇溶解并定容，0.45 μm微孔濾膜濾過，取續濾液，進樣分析，記錄各成分峰面積，外標法計算含量。

2.2 基于斑馬魚模型評價補骨脂的安全性

2.2.1 藥物配制 取補骨脂水煎液干粉，用培養基配制成不同質量濃度（50、100、300、500、750、1000 μg/mL）的溶液。

2.2.2 分組與給藥 培養基由5 mmol/L NaCl、0.17 mmol/L KCl、0.33 mmol/L CaCl2、0.33 mmol/L MgSO4組成。斑馬魚胚胎由斑馬魚成魚自然交配產生，將胚胎放置培養基中，于28 ℃培養箱中培養24 h。取受精后（days post fertilization，dpf）1 d的斑馬魚健康胚胎置24孔板中，8個/孔，16個/組，設置對照組和補骨脂（50、100、300、500、750、1000 μg/mL）組。對照組加入2 mL培養基，給藥組加入2 mL不同質量濃度的補骨脂溶液。每天計數斑馬魚死亡數量，死亡的斑馬魚及時撈出并記錄，于顯微鏡下觀察斑馬魚的形態，于3～6 dpf拍照。

2.2.3 毒性與成分含量關聯的相關分析 采用SPSS 16.0軟件計算6 dpf斑馬魚半數死亡濃度（lethal concentration 50，LC50）。將不同產地補骨脂的LC50值與其香豆素類、黃酮類、補骨脂酚含量進行相關分析，計算相關系數。

2.2.4 相關分析辨識毒性成分群的安全性驗證采用斑馬魚模型評價4個香豆素類、7個黃酮類成分、PD、補骨脂酚的安全性，并與相關分析結果進行比對、驗證。

3 結果

3.1 不同產地補骨脂水煎液中代表性成分的含量分析

采用HPLC法分析補骨脂水煎液中補骨脂苷、IPSS、補骨脂素、IPS、NBIF、BC、BCin、CA、補骨脂酚，如圖1所示。用外標法計算不同產地共18批補骨脂水煎液中各成分的含量及平均值，以各成分含量均值占總和的百分比作為各成分的平均含量，結果見表3，補骨脂水煎液以香豆素類成分為主，4個成分平均質量分數之和為91.32%，其中補骨脂苷、IPSS、補骨脂素、IPS的質量分數分別為7.36～25.58、4.76～21.25、0.65～3.51、0.41～2.32 mg/g，不同產地批次質量分數差異較大，最大值是最小值的3.47～5.60倍；補骨脂酚質量分數次之（0.68～4.40 mg/g），平均質量分數為6.36%，不同產地批次最大值是最小值的6.47倍；黃酮類成分最少，NBIF、BC、BCin、CA的平均質量分數之和為2.33%，其質量分數分別為0.16～0.84、0～0.47、0～0.36、0 mg/g。

1-補骨脂苷 2-IPSS 3-補骨脂素 4-IPS 5-NBIF 6-BC 7-BCin 8-CA 9-補骨脂酚

表3 不同產地補骨脂水煎液代表成分質量分數

3.2 不同產地補骨脂水煎液對斑馬魚胚胎/幼魚毒性的影響

3.2.1 斑馬魚形態檢視結果 斑馬魚受精3 dpf后孵化成幼魚，各臟器發育基本完全，魚體透明，在載玻片上易側臥，顯微鏡下檢視臟器形態清楚、直觀。將3 dpf斑馬魚胚胎或幼魚進行顯微鏡檢視并拍照，結果見圖2，與對照組相比，18批補骨脂給藥組呈現不同程度的臟器中毒現象。其中，輕度中毒的斑馬魚表現出心胞及卵黃囊微腫大的現象；中度中毒的斑馬魚出現心胞腫大伴隨充血、卵黃囊腫大伴隨發黑、且身體出現微彎曲等畸形特征；重度中毒的斑馬魚畸形程度更加明顯，一般會出現脊柱、尾部彎曲，色素沉淀減小，心率不穩，眼睛變小，身體變短；少數高劑量組還表現出幼魚出膜晚或不出膜等現象。

藍色箭頭：心胞；紅色箭頭：卵黃囊；標尺：1 mm

由表4可知，補骨脂水煎液致斑馬魚幼魚的中毒質量濃度為50～1000 μg/mL。不同產地、批次的補骨脂致斑馬魚中毒的質量濃度不同，毒性差異較大（HB組致斑馬魚中毒的質量濃度約為JK、YN5、JS1組的20倍）。JK、YN5、JS1、YN4組致斑馬魚中毒的質量濃度為50～100 μg/mL，毒性較大；JS2、AH2、YN6、YN10、YN3、YN1、YN8、AH1組致斑馬魚中毒的質量濃度為300～500 μg/mL，毒性次之；HN、SC、YN7、YN2、YN9、HB致斑馬魚中毒的質量濃度為750～1000 μg/mL，毒性較小。

表4 不同產地補骨脂水煎液對斑馬魚幼魚(3 dpf) 的畸形特征和中毒質量濃度的影響

A：卵黃囊腫脹及發黑 B：心胞腫大 C：心胞充血 D：脊柱、尾部彎曲 E：眼睛及身體變淺 F：眼睛變小 G：出現未孵化現象 H：身體變短

A: Swelling and darkening of the yolk sac B: Enlarged heart C: Congestive pericardium D: Spine and tail bending E: Reduced pigmentation F: Eyes become smaller G: Embryos appear unhatched H: Zebrafish body shortened

3.2.2 不同產地補骨脂水煎液對斑馬魚死亡率的影響 如圖3所示，斑馬魚的死亡率與補骨脂質量濃度和作用時間密切相關。死亡率小于20%的藥物濃度為安全濃度[18]，根據死亡率曲線，計算出斑馬魚死亡率達20%時各批次的補骨脂質量濃度（LC20），如圖4所示，補骨脂LC20（μg/mL）由小到大依次為136.9（YN5）、158.3（YN10）、241.5（AH2）、246.5（YN1）、279.0（YN6）、315.6（YN3）、318.9（YN7）、328.0（AH1）、336.9（JS2）、367.2（JK）、383.8（JS1）、479.0（HN）、481.6（YN8）、504.1（YN4）、541.5（HB）、638.3（SC）、694.2（YN9）、774.7（YN2）。表明不同產地或同一產地不同批次的補骨脂對斑馬魚安全用藥的質量濃度差異較大，最大值（YN2）是最小值（YN5）的5.7倍。

圖3 不同產地補骨脂水煎液對斑馬魚(2～6 dpf) 死亡率的影響

圖4 不同產地補骨脂水煎液對斑馬魚(6 dpf)的LC20

3.2.3 不同產地補骨脂對斑馬魚的LC50補骨脂水煎液對斑馬魚（6 dpf）的LC50越小，其致魚中毒的藥物質量濃度越低、毒性越大。如圖5所示，不同產地、批次補骨脂水煎液對斑馬魚（6 dpf）LC50差異較大（173.2～1 242.0 μg/mL），最大值（YN2）是最小值（YN5）的7.2倍，且同為云南產地。表明不同產地和同為云南產地不同批次的補骨脂致魚毒性差異較大。5個批次（YN5、YN10、AH2、YN1、YN6）的LC50值均小于400 μg/mL，毒性較大；7個批次（JS1、AH1、JS2、YN7、YN3、HN、JK）的LC50值為400～600 μg/mL，毒性次之；6個批次（HB、YN8、YN4、YN9、SC、YN2）的LC50值為600～1000 μg/mL，毒性較小，與上述LC20結果一致。

圖5 不同產地補骨脂水煎液對斑馬魚(6 dpf)的LC50

3.2.4 補骨脂水煎液毒性與其成分含量的相關分析辨識毒性成分群的結果 分別將18個批次補骨脂水煎液中香豆素類成分含量（4個香豆素代表成分含量之和）、黃酮類成分含量（3個黃酮代表成分含量之和）、補骨脂酚含量與斑馬魚（6 dpf）的LC50值進行相關分析，結果如圖6所示，黃酮類成分、補骨脂酚與斑馬魚毒性相關性較好（R分別為0.623 4、0.587 8）；香豆素類成分的相關性相對較差（2＝0.187 7），提示補骨脂水煎液中的毒性可能主要由黃酮類成分和補骨脂酚引起。

圖6 不同產地、批次補骨脂水煎液中各類成分含量與斑馬魚毒性的相關性分析

3.2.5 補骨脂藥材中香豆素類代表成分、黃酮類代表成分和補骨脂酚對斑馬魚的毒性結果 基于斑馬魚模型評價補骨脂藥材中4個主要香豆素成分、7個黃酮成分、內酯類補骨脂定和單萜酚補骨脂酚的安全性，采用統計學軟件SPSS 16.0計算斑馬魚（6 dpf）LC50值，參考斑馬魚毒性評價量表[18]，結果如圖7所示，LC50值最小即毒性最大的補骨脂酚為高毒成分，其LC50值為0.74 μg/mL，在0.1～1.0 μg/mL；3個黃酮成分BC、NBIF、IBCC的LC50值在1～10 μg/mL，是中等毒性物質；其他黃酮類成分如BCin、BCC，香豆素類成分如IPS、補骨脂素，毒性次之，LC50值為補骨脂酚的22～39倍，在10～100 μg/mL，是輕微毒性物質；補骨脂香豆素糖苷（補骨脂苷、IPSS）、補骨脂定、補骨脂寧、CA安全性最好，LC50值大于100 μg/mL，為補骨脂酚的130～185倍，為實際無毒物質。表明補骨脂酚和3個主要黃酮（BC、NBIF、IBCC）是補骨脂致毒的關鍵成分，香豆素及其糖苷類成分安全性相對較好，與上述相關分析結論一致。

圖7 補骨脂藥材中13個成分對斑馬魚(6 dpf)的LC50

4 討論

本研究針對中藥復雜體系毒性物質發現的難點問題，通過斑馬魚高效評價毒性與成分含量進行相關分析，以高效辨識毒性成分群，從而克服傳統化學分離先導的毒性追蹤低效、高成本的缺陷。斑馬幼魚毒性評價在24孔板中進行，實驗周期為6 d，溶液暴露的給藥方式簡單易行，可批量進行，魚體透明，臟器形態變化可在顯微鏡下實時動態觀察。補骨脂致斑馬魚（3 dpf）出現卵黃囊吸收延遲、腫大或變黑，提示與肝毒性相關，與文獻中補骨脂對人和小鼠造成肝損傷的結論一致[19-22]；補骨脂致魚心胞腫大、充血，提示具一定心臟毒性，目前尚未見相關報道，有待進一步研究。補骨脂可致魚發育明顯遲緩，出現頭部較小、體長較短或出現脊柱與尾部彎曲等畸形特征。魚死亡率和LC50值可客觀反映毒性大小，結果表明不同產地或同一產地不同批次補骨脂的毒性差異較大。補骨脂毒性由大到小即LC50值（173.2～1 242.0 μg/mL）由小到大分別為YN5＞YN10＞AH2＞YN1＞YN6＞JS1＞AH1＞JS2＞YN7＞YN3＞HN＞JK＞HB＞YN8＞YN4＞YN9＞SC＞YN2。

不同產地或同一產地不同批次補骨脂的香豆素類成分、黃酮類成分、補骨脂酚的含量差異均較大，各類代表成分含量之和的最大值是最小值的3.47～6.47倍。毒性量化指標LC50值與成分含量的相關分析結果表明，斑馬魚毒性與黃酮類成分和補骨脂酚呈強相關（分別為0.789 6、0.766 7），與香豆素類成分呈弱相關（為0.433 2）。各類代表成分的毒性評價結果與相關分析一致：補骨脂酚為高毒成分，3個黃酮成分（BC、NBIF、IBCC）為中等毒性成分，提示這4個成分是補骨脂致毒的關鍵成分。本研究中的3個關鍵毒性成分（BC、NBIF、補骨脂酚）含量與毒性密切相關，毒性較大的6個批次（YN5、YN10、AH2、YN1、YN6、JS1）補骨脂水煎液中BC、NBIF、補骨脂酚及三者含量之和分別為0.17～0.47、0.48～0.84、3.01～4.40、3.87～5.64 mg/g；毒性次之的6個批次（AH1、JS2、YN7、YN3、HN、JK）補骨脂BC、NBIF、補骨脂酚及三者含量之和降低，分別為0.10～0.29、0.33～0.47、1.05～1.72、1.50～2.39 mg/g；安全性較好的6個批次（HB、YN8、YN4、YN9、SC、YN2）補骨脂BC、NBIF、補骨脂酚及三者含量之和含量進一步降低，分別為0～0.34、0.16～0.47、0.68～2.18、0.84～2.99 mg/g。提示監測關鍵致毒成分含量可初步推測補骨脂毒性大小，對臨床安全、合理用藥具有指導意義。

綜上，斑馬魚模型可高效評價補骨脂毒性，并可進行量化分級，通過毒性差異與成分差異的相關分析，實現快速辨識補骨脂毒性相關成分群，突破化學分離先導的低效、高成本毒性評價的制約，為早期快速發現中藥復雜體系的毒性相關物質提供簡單、高效、低成本方法。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Effective identification of toxic related components ofbased on zebrafish model

LI Jia-yan1, 2, LIU Xin-xin1, 2, NING Qing1, 2, LI Yan-dong2, SHI Zi-qi1, 2, WEI Ying-jie1, 2

1. The Third Clinical School of Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China 2. Key Laboratory of New Drug Delivery System, National Administration of Traditional Chinese Medicine, Jiangsu Academy of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China

To efficiently identify the toxic component groups of(PF) based on zebrafish model combined with correlation analysis.Contents of four coumarins, four flavonoids and bakuchiol in 18 batches of PF from seven producing areas were determined by HPLC. Zebrafish model was used to evaluate the toxicity of 18 batches of PFdecoction, with mortality, organ poisoning form, and LC50value of zebrafish (6 dpf) as indicators. Correlation analysis between contents of various components and LC50value of zebrafish (6 dpf) were carried out to identify toxicity related components, and the zebrafish toxicity evaluation results of the representative components were verified.Contents of coumarins, flavonoids and bakuchiol in 18 batches of PF decoction from different producing areas were quite different. The maximum content of four coumarins, flavonoid (neobavaisoflavone) and bakuchiol were respectively 3.47—5.60, 5.30 and 6.47 times of the minimum. The zebrafish toxicity evaluation results showed that the toxicity of 18 batches of PF decoction was quite different, and LC50(6 dpf) of the maximum was 7.2 times of the minimum. The results of correlation analysis between toxicity and component content showed that zebrafish toxicity had a good correlation with flavonoids and bakuchiol (2were respectively 0.623 4 and 0.587 8), while the correlation with coumarins was relatively low (2was 0.187 7). Toxicity evaluation results of various representative components showed that bakuchiol and three flavonoids (bavachin, neobavaisoflavone, isobavachalcone) were the key toxic components of PF, while coumarins was relatively safe.Zebrafish model could efficiently and sensitively reflect toxicity differences of different batches of PF, of which toxicity relevant component groups could be efficiently identified through correlation analysis between toxicity and content of components, providing a reference for quickly discovering toxicity and related substances from the complex system of traditional Chinese medicine.

; toxic components; zebrafish; correlation analysis; bavachin; neobavaisoflavone; isobavachalcone

R285.5，R285.53

A

0253 - 2670(2021)01 - 0129 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.01.016

2020-08-07

“重大新藥創制”科技重大專項資助項目（2017ZX09301-056）；國家自然科學基金資助項目（81573833）；江蘇省醫學創新團隊項目（CXTDB2017003）

李佳妍，女，碩士研究生，研究方向為中藥學。Tel: 18851180283 E-mail: ljy945094845@163.com

韋英杰，女，研究員，碩士生導師，研究方向為中藥物質基礎與質量控制。Tel: (025)52362109 E-mail: wyj970@163.com

[責任編輯 李亞楠]