ABCG1基因啟動子區rs1378577位點A/C多態性對陳舊性心肌梗死合并心力衰竭患者心臟血流動力學的影響〔1〕

高勝利，高淑紅*，翟曉娟，李莉

(1.山西醫科大學汾陽學院，山西 汾陽 032200；2.山西醫科大學附屬汾陽醫院，山西 汾陽 032200)

陳舊性心肌梗死(OMI)是心力衰竭的常見病因之一，早期識別高危人群有助于早期預防、早期干預，減緩心力衰竭的發生和發展[1]。三磷酸腺苷(ATP)結合盒轉運體Gl(ABCGl)與動脈粥樣硬化、冠心病等關系密切[2]，其基因啟動子區rs1378577位點單核苷酸多態性存在AA、AC和CC三種基因表型。多項研究表明，AC和CC基因型人群冠心病心肌梗死的患病率高，而且病情嚴重[3]。心臟血流動力學改變是心力衰竭重要的病理生理學表現之一[4]，ABCG1基因啟動子區rs1378577位點A/C多態性是否影響陳舊性心肌梗死合并心力衰竭患者的心臟血流動力學，目前相關報道較少，本文對此進行研究，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年1月—2019年10月山西省汾陽醫院心血管內科收治的OMI合并心力衰竭患者178 例，其中男119 例，女59 例，年齡(59.50±2.26) 歲。依據ABCG1基因啟動子區rs1378577位A/C多態性基因型，分為三組：AA基因型組(AA組)57 例，AC基因型組(AC組)69 例和CC基因型組(CC組)52 例。三組一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性(見表1)。

表1 三組患者一般資料比較

1.2 納入和排除標準

納入標準：心電圖及超聲心動圖檢查確診為陳舊性心肌梗死；符合《慢性心力衰竭診斷治療指南》；NYHA心力衰竭分級Ⅱ～Ⅳ級，左心室射血分數<40%。排除標準：由非冠心病引發的慢性心力衰竭者；合并慢性阻塞性肺疾病、感染、休克等嚴重并發癥者；心源性休克者；嚴重精神或意識障礙者。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.3 方法

1.3.1 ABCG1啟動子rs1378577位點A/C多態性檢測

禁食12 h，靜脈采血5 mL，EDTA抗凝，提取全血基因組DNA，采用課題組[5]建立的聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性分析基因型。

1.3.2 血漿血脂水平檢測

禁食12 h，靜脈采血5 mL，Olympus2700生化分析儀測定血脂水平。

1.3.3 ABCG1 mRNA的表達水平檢測

禁食12 h，靜脈采血，提取全血RNA，采用課題組[6]建立的實時熒光定量PCR法檢測，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)為內參，計算其相對表達量，數據采用2-ΔΔCT分析。

1.3.4 血漿一氧化氮含量和內皮一氧化氮合酶活性檢測

禁食12 h，靜脈采血，3 000 r/min，離心15 min，分離血漿，按照說明書酶聯免疫吸附法測定內皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性，硝酸還原酶法檢測一氧化氮(NO)含量。

1.3.5 無創心臟血流動力學檢測

采用CHM T3002無創心臟血流動力學監測儀，依據使用說明書，記錄有關無創血流動力學參數。

1.4 觀察指標

比較三組患者全血ABCG1 mRNA的相對表達水平、血漿NO含量和eNOS活性及無創血流動力學參數。泵功能：每搏輸出量(SV)、心輸出量(CO)、每搏指數(SVI)、心指數(CD)、射血分數(EF)、最大射血速率(AMP C)；收縮功能：包括射血前期(PEP)、左室射血期(LVET)、PEP/LVET收縮時間比(STR)、收縮指數(IC)、收縮功能指數(HI)；作功：左室每搏作功(SW)、左室每分作功(CW)、搏功指數(SWI)等。

1.5 統計學方法

2 結 果

2.1 ABCG1基因啟動子區rs1378577位A/C多態性基因型檢測結果

經PCR-RFLP方法分析，AA純合型57 例(32.02%)，AC雜合型69 例(38.76%)，CC純合型52 例(29.21%)。經擬合優度檢驗群體遺傳性分析，基因型頻率符合Hardy-Weinberg平衡規律(χ2=4.557，P>0.05)。

2.2 三組患者臨床指標比較

與AA組相比，AC組和CC組ABCG1mRNA/GAPDH值下降，總膽固醇(TC)升高，eNOS活性降低，NO含量下降，差異均有統計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 三組患者臨床指標比較

2.3 三組患者無創血流動力學指標比較

與AA組相比，AC和CC組SV，SVI，EF，AMP C下降，差異具有統計學意義(P<0.05)，CO和CD存在下降趨勢，但差異無統計學意義(P>0.05)(見表3)。PEP時間延長，LVET縮短，PEP/LVET增大，IC，HI，SW和SWI下降，差異均有統計學意義，CW降低，但差異無統計學意義(P>0.05)(見表4)。

表3 三組心臟泵功能參數比較

表4 三組收縮功能和做功比較

3 討 論

心力衰竭是全球導致死亡的主要原因之一[6]。ABCGl參與膽固醇的逆向轉運，其rs1378577位點存在AA、AC和CC基因型，AC和CC基因型人群冠心病心肌梗死的患病率高而且病情嚴重[3]，心肌梗死并發心力衰竭會導致血流動力學改變[7-8]。本研究中，與AA組相比，AC和CC組SV，SVI，EF及AMP C均顯著降低，提示AC和CC組心臟泵功能下降。同時，與AA組相比，AC和CC組PEP及LVET時間延長，PEP/LVET比值增大，IC和HI下降，提示AC和CC組心室肌收縮功能下降。本研究還顯示，與AA組相比，AC和CC組SWI顯著降低，提示AC和CC組心臟做功降低。由此可見，對于OMI合并心力衰竭患者，與AA基因型相比，AC和CC基因型患者的心臟泵功能、收縮功能及做功下降。ABCGl基因多態性會影響其表達及功能[9]。本研究中，與AA組相比，AC和CC組ABCG1 mRNA表達下降[10]，同時血漿膽固醇增高，eNOS活性降低，NO含量下降，其原因可能是由于ABCGl表達下降可以導致轉運膽固醇功能降低，引起細胞內膽固醇增高，抑制eNOS活性，導致NO減少[11-12]。eNOS與NO具有增加冠脈血流和心肌細胞能量供給、縮短心肌的收縮期、增強心室舒張效應及心肌細胞收縮能力等作用[13-14]。由此推測，AC和CC基因型患者血流動力學改變與eNOS和NO系統受損有關。因此，eNOS和NO系統作為治療心力衰竭的靶點，具有改善血流動力學的作用，例如他汀類藥物可以降低膽固醇，增強eNOS和NO系統功能，改善超聲心動圖參數，防止左室擴張，延緩心力衰竭進展，有效降低發病率和死亡率[15-16]。然而也有研究表明[17]，降低膽固醇并不能有效改善心力衰竭患者的血流動力學指標，考慮部分原因為單基因表達改變。基于此，我們在臨床應用過程中，給予AC和CC基因型患者適當劑型和劑量的他汀藥物[18]，有效改善了患者的血流動力學指標，然而療效還在進一步研究之中。同時，本研究對象為EF降低的心力衰竭患者，而對于EF正常的心力衰竭患者是否也具有影響作用，有待于進一步研究。