ERK5抑制劑促進肺成纖維細胞自噬及其在小鼠肺纖維化中的作用研究

華曉敏 王昌明

桂林醫學院附屬桂林市人民醫院呼吸內科541002

通信作者:王昌明,Email:13607731185@163.com

肺纖維化是一種以持續上皮細胞損傷和過量細胞外基質 (extracellular matrix,ECM)沉積為主要病理特征的慢性纖維增生性疾病[1]。肺纖維化主要是肺組織受損后修復調節失控、重建異常所引起的病變,在這一過程中,一系列細胞因子和生長因子的表達異常、炎癥反應、血管增生和重建、纖維蛋白溶解障礙及外界環境等因素導致的氧化應激都參與肺纖維化的發病過程,由此造成上皮細胞缺損、成纖維細胞增生和ECM 沉積等主要病變,最終結果是成纖維細胞替代了行使正常功能的肺泡上皮細胞,導致了纖維化的發生[2]。成纖維細胞轉化為肌成纖維細胞分泌膠原、促進ECM 的沉積,在肺纖維化形成過程中起著重要作用[3]。轉化生長因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是重要的促纖維化因子,TGF-β1可以促使上皮間質轉化和成纖維細胞向肌成纖維細胞的分化,進而導致ECM 的沉積[4]。細胞外信號調節蛋白激酶5(extracellular signal-regulated protein kinase-5,ERK5)是一種促分裂原活化蛋白激酶,與細胞存活、抗凋亡信號傳導、細胞增殖與分化有關[5]。本研究通過建造肺纖維化細胞模型和動物模型,探討ERK5在肺纖維化中的作用及其可能的致病機制。

1 材料與方法

1.1 實驗細胞 人肺成纖維細胞 (human lung fibroblasts,HLFs)購自中國科學院昆明細胞庫(編號:KCB200695)。細胞培養在含10%胎牛血清及青鏈霉素的DMEM 高糖培養基中,培養箱條件為5%CO2、37 ℃。

1.2 細胞實驗主要試劑 重組人TGF-β1(2μg粉劑)購于美國Pepro Tech 公司。ERK5 抑制劑BIX02189 (5 mg粉劑)購于美國Selleck 生物科技有限公司。DMEM 高糖培養基、胎牛血清(Gibco FBS-10099-141)、1%雙抗 (青霉素及鏈霉素)、0.25%含EDTA 胰酶 (Trypsin)購于美國Gibco 公 司?！?br>