膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床中的運用研究

王翔宇

（蘭考縣畜牧局，河南蘭考 475300）

膠體金免疫層析技術(shù)結(jié)合了酶聯(lián)免疫吸附試驗、膠體金技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)以及免疫層析技術(shù)等各種技術(shù)，具備敏感與快速的優(yōu)勢。膠體金免疫層析技術(shù)利用膠體金的顯色特點，結(jié)合免疫層析技術(shù)來獲得檢測結(jié)果，利用膠體金當(dāng)做標記物，結(jié)合待測物獲得配體捕獲實現(xiàn)顯色，從而實現(xiàn)快速的檢測。

1 膠體金免疫層析技術(shù)概述

膠體金免疫層析技術(shù)主要是把膠體金標記技術(shù)、免疫檢測技術(shù)、蛋白層析技術(shù)等多項技術(shù)結(jié)合。利用硝酸纖維素膜當(dāng)做固相載體，樣品溶液利用毛細作用原理處于層析條當(dāng)中泳動。并且，樣品當(dāng)中待測物品和層析材料當(dāng)中針對待測物的抗原形成高特異性、高親和性的免疫反應(yīng)，在層析的過程當(dāng)中免疫復(fù)合物會被富集以及截留于層析材料當(dāng)中的檢測帶，經(jīng)由膠體金顆粒于短時間內(nèi)實現(xiàn)聚集進而獲得直觀的實驗結(jié)果，游離標記物會越過檢測帶，實現(xiàn)與標記物之間自動化的分離。膠體金免疫層析技術(shù)主要利用了膠體金所具備的顯色特點，基于免疫層析技術(shù)進而完成相應(yīng)的檢測操作，層析的過程中利用膠體金標記物，標記物和待測物的絡(luò)合物會被配體實現(xiàn)捕獲進而濃集顯色，利用纖維膜中顯色帶來快速檢測。因無需把結(jié)合標記物和游離標記物之間分離，所以省略了加樣與洗滌等各個步驟。膠體金免疫層析技術(shù)的特點是操作簡便快捷，對操作人員的專業(yè)技術(shù)要求較低，不用特殊的儀器設(shè)備，檢測結(jié)果直觀明了、便于保存，在現(xiàn)場的快速檢測中十分適用。在動物病毒、細菌以及寄生蟲等獸醫(yī)病原學(xué)檢測與臨床診斷當(dāng)中應(yīng)用廣泛。膠體金免疫層析技術(shù)是現(xiàn)階段獸醫(yī)動物疫病臨床診斷中最簡單且快速、特異的一項免疫學(xué)檢測技術(shù)[1]。

2 膠體金免疫層析技術(shù)在動物細菌病診斷中的應(yīng)用

動物細菌性疫病的檢驗中，膠體金免疫層析技術(shù)屬于關(guān)鍵性技術(shù)。近年來，臨床診斷領(lǐng)域逐步研究并且投入使用了細菌性疾病膠體金診斷試紙。臨床診斷當(dāng)中，部分基層地區(qū)的獸醫(yī)也大量使用膠體金免疫層析技術(shù)。如王友華闡述了在獸醫(yī)領(lǐng)域中膠體金免疫層析技術(shù)的應(yīng)用原理，促使膠體金免疫層析技術(shù)應(yīng)用獸醫(yī)領(lǐng)域得到全面發(fā)展[2]。目前，膠體金免疫層析技術(shù)已經(jīng)變成了初篩的一種試驗，針對人工污染樣品進行實驗的時候，適用性非常的強，具備極高的推廣性與應(yīng)用性。

3 在動物病毒病診斷中的應(yīng)用

在動物病毒性疫病的診斷過程中，廣泛應(yīng)用了膠體金免疫層析技術(shù)。目前為止，在犬細小病毒病、狂犬病、傳染性支氣管炎病、口蹄疫以及豬繁殖與呼吸綜合征等各類疫病當(dāng)中，都研制了針對性的膠體金診斷試紙，并且還具備一定的技術(shù)保障，推動了現(xiàn)代化動物疫病預(yù)防與監(jiān)測工作的進一步發(fā)展。例如利用膠體金免疫層析技術(shù)來進行狂犬病毒抗原的特異性反應(yīng)，針對48份有可能患有狂犬病的犬唾液樣品進行檢驗，能夠獲得88%左右的符合率。這就能夠看出，在野外環(huán)境中對于唾液以及動物大腦內(nèi)狂犬病毒抗原進行檢測時，膠體金免疫層析診斷試紙非常適用。

4 動物寄生蟲病診斷中的應(yīng)用

目前已知的人畜共患病中有相當(dāng)一部分是寄生蟲病，因此進行畜禽寄生蟲病的正確診斷，具有突出的公共衛(wèi)生學(xué)意義。目前的旋毛蟲病以及豬囊蟲病等多種疫病的相應(yīng)膠體金檢測試紙廣泛地應(yīng)用于臨床檢測當(dāng)中。例如利用膠體金試紙來進行家畜血腫內(nèi)抗血吸蟲抗體的檢測。利用膠體金快速試紙來進行弓形蟲抗體與動物弓形蟲病血清抗體的檢測。通過研究表明，膠體金試紙具備極高的敏感度。相比于弓形蟲的IHA診斷試劑而言，前者的結(jié)果能夠早兩天獲得。目前，牛新孢子蟲病診斷中利用膠體金免疫層析技術(shù)，具備極為突出的臨床使用價值，非常適用于基層地區(qū)的獸醫(yī)工作[3]。

5 發(fā)展前景

膠體金免疫層析技術(shù)所具備的簡便、快速、敏感以及特異等優(yōu)勢，使其在獸醫(yī)臨床的快速檢測以及現(xiàn)場診斷當(dāng)中得到了廣泛的應(yīng)用，膠體金免疫層析技術(shù)的發(fā)展?jié)摿Ψ浅＞薮?，且具備廣闊的應(yīng)用前景。就現(xiàn)階段的實際情況而言，膠體金免疫層析技術(shù)成為了眾多領(lǐng)域當(dāng)中的研究熱點。針對膠體金免疫層析技術(shù)的相關(guān)研究在不斷地深入，與此同時，膠體金免疫層析技術(shù)的檢測范圍同樣在不斷地擴展，其中涉及了病原體、激素、毒品、藥物以及重金屬等眾多方面。但是，就目前的膠體金免疫層析技術(shù)而言，依舊存在一定的不足之處，例如檢測時靈敏度還需要進一步的提高。隨著膠體金免疫層析技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)中的廣泛應(yīng)用，必須不斷地提升膠體金免疫層析試驗的整體敏感性與特異性，讓其能夠完成多元檢測、定量與半定量檢測等，這也是膠體金免疫層析技術(shù)未來的發(fā)展方向。膠體金免疫層析技術(shù)提供給動物疫病診斷技術(shù)以全新的模式，促進了動物疫病診斷領(lǐng)域的進一步發(fā)展。隨著全新標記物以及制備方法的研制與使用，標記技術(shù)不斷地成熟，還有單克隆抗體技術(shù)以及分子生物學(xué)技術(shù)等被廣泛的應(yīng)用，會進一步的拓寬膠體金免疫層析技術(shù)的應(yīng)用范圍與價值。

6 結(jié)語

綜上所述，膠體金免疫層析技術(shù)在臨床當(dāng)中廣泛應(yīng)用，其特異性與敏感性仍需進一步的提高，進而實現(xiàn)定量、半定量與多元檢測。利用膠體金免疫層析技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)病毒的快速準確的檢測，為動物疫病預(yù)防與治療提供幫助，促進我國基層獸醫(yī)領(lǐng)域的進一步發(fā)展，為我國畜牧養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展奠定了堅實的物質(zhì)條件。