一株乳源蠟樣芽孢桿菌腸毒素基因克隆與序列分析

陳玉娟，趙瑤，馬鮮平，高麗旭，姚婷，劉倩如，謝遠(yuǎn)兵，易華山

（1.西南大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，重慶 402460；2.重慶市永川區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶 402160）

奶牛乳房炎（Cow mastitis）的病原菌主要是一些條件性和傳染性的致病菌。在伊朗，據(jù)Batavani[1]報(bào)道，引起乳房炎的前三大病原菌包括蠟樣芽孢桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌。蠟樣芽孢桿菌（B.cereus）是一種革蘭氏陽性菌，需氧，產(chǎn)孢子，是廣泛分布于土壤、水、空氣、飼料、食品和環(huán)境中的一種條件致病菌，存在于奶牛養(yǎng)殖環(huán)境之中，B.cereus甚至?xí)云渌≡鸀橐劳校涌焖俚囟ㄖ埠宛じ皆谌榉可掀ぜ?xì)胞之中，從而加快整個(gè)病程，且易導(dǎo)致奶牛死亡[2]。近年來，在我國新疆、寧夏等地B.cereus的檢出率較以前明顯增加[3]，而且它產(chǎn)生的腸毒素有致吐和致瀉作用，易導(dǎo)致人食物中毒；感染奶牛泌乳量下降，甚至失去泌乳能力，給全球畜牧業(yè)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來了嚴(yán)重的損失[4,5]。B.cereus腸毒素可分為嘔吐型和腹瀉型兩類[6]，主要毒力因子分別為：與嘔吐毒素相關(guān)的非核糖體多肽合成酶系（NRPS）基因[7]；與腹瀉毒素相關(guān)的溶血性BL基因（hb1A、hb1B、hb1C和hb1D）、非溶血性腸毒素Nhe基因（nheA、nheB和nheC）、腸毒素FM基因（entFM）、腸毒素T基因（bceT）和細(xì)胞毒素K基因（cytK）[8,9]。不同菌株中毒力基因的攜帶數(shù)目不相同，各毒力基因的攜帶率亦有差異。有研究測(cè)得菌株各毒力基因的攜帶率分別為非溶血性Nhe基因（89.19%）、entFM基因（79.88%）、bceT基因（49.85%）、溶血性BL基因（48.35%）、ctyK基因（47.75%）和嘔吐毒素相關(guān)基因ces（1.50%）。嘔吐型腸毒素又稱為耐熱的腸毒素，其對(duì)奶牛乳房炎有明顯的致病作用[10]，但是該毒素的致病機(jī)理及致病的具體作用尚不清楚；……