基于FOXM1啟動子示蹤體系對MDA-MB-231細胞亞群的分選與鑒定

汪運超， 李子青， 向 勤， 譚擁軍

(湖南大學 生物學院 湖南省抗癌靶向蛋白藥物工程研究中心，長沙410082)

叉頭框轉錄因子M1 (Forkhead box M1,FOXM1) 屬于Forkhead轉錄因子超家族，是一種促癌轉錄因子[1]。FOXM1主要通過調節細胞增殖相關基因的轉錄，在胚胎發育、組織再生的過程中發揮著關鍵性的功能[2-3]。近年越來越多的研究表明，FOXM1與腫瘤的發生、發展密切相關，其在腫瘤發生發展中有著重要的功能，包括促進細胞增殖、增強DNA損傷修復、促進腫瘤上皮間質轉化(EMT)增加腫瘤轉移的可能性、促進腫瘤誘導的血管生長、通過擴增腫瘤相關的干細胞或起始細胞促使腫瘤發生等[4]。目前多項研究發現FOXM1在乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、胃癌、結直腸癌和肺癌等多種人類癌細胞中過表達，而在正常細胞中表達較低甚至不表達。其中FOXM1高表達的乳腺癌往往呈低分化、高度惡性、遠處轉移等特點，且與多種致瘤信號途徑相關，臨床預后不佳[5]。但是FOXM1如何調控乳腺癌發生發展的分子機制還有待進一步深入研究。因此，能夠為研究FOXM1在乳腺癌發展中的分子機制提供方便有效的細胞模型工具，對了解乳腺癌的復發和轉移、確定治療腫瘤靶點均具有重大意義。

慢病毒載體是近年來才發展的一種基因治療載體，可在體內較長期的表達[6]。目前來說，綠色熒光蛋白 (Green fluorecent protein, GFP) 是最佳標記分子，具有檢測簡單、熒光特異性強等優勢[7]，已大范圍應用于體外及活體研究。文中所用的啟動子示蹤體系具有在細胞內能利用慢病毒能夠將自身DNA與宿主染色體整合的優點[8]，將某基因的啟動子序列與慢病毒自身攜帶的啟動序列相互替換，結合報告基因標記。……