干擾素在獸醫臨床上的科學應用

萬遂如

（中國畜牧獸醫學會動物傳染病學分會，吉林 長春 130122）

干擾素（IFN）是干擾素誘生劑作用于有關生物細胞所產生的一類具有高度生物學活性、多功能的小分子糖蛋白，由于它們能干擾病毒RNA和DNA的合成而抑制病毒的復制，故稱之為干擾素（抗病毒蛋白）。干擾素是細胞因子中的一個家族，目前已發現有20多種干擾素家族的細胞因子。干擾素無抗原性，不被免疫血清中和，也不被核酸酶滅活，具有抗病毒、抗細胞增殖與分化、抗腫瘤和免疫調節等作用。本文就當前畜牧業生產中禁止濫用抗生素，保障動物性食品安全、公共衛生安全和生態環境安全，促進健康養殖的持續發展，替代抗生素，在獸醫臨床上如何科學應用干擾素問題，談點個人意見，僅供參考。

1 干擾素的分類

1980年國際干擾素命名委員會建議將各種干擾素先根據動物的來源確定分類系統，再按干擾素的抗原特異性和分子結構分成不同的型別。哺乳動物的干擾素分為兩類：Ⅰ型干擾素和Ⅱ型干擾素。Ⅰ型干擾素（耐酸型）主要包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-К、IFN-ξ、IFN-δ等類型。主要是由單核-巨噬細胞、B細胞和成纖維細胞產生的，在耐酸環境中穩定。IFN-α和IFN-β二者結合相同的受體，分布較為廣泛，包括單核-巨噬細胞、多形核白細胞、B細胞、T細胞、血小板、上皮細胞、內皮細胞和腫瘤細胞等。Ⅱ型干擾素即IFN-γ（酸敏感型），主要是由T淋巴細胞受到有絲分裂原或特異抗原刺激所產生，自然殺傷細胞（NK細胞）也可產生，對酸不穩定，結合的受體與Ⅰ型干擾素不同，但IFN-γ的免疫刺激活性在兩類干擾素中最強。

干擾素也可通過大腸埃希菌屬及酵母菌基因工程重組（recombinant）而得到基因工程干擾素。目前獸醫臨床上使用的干擾素就有家禽基因干擾素、豬基因工程干擾素、牛基因工程干擾素、犬基因工程干擾素等。

2 干擾素的理化性質

干擾素為糖蛋白，除有蛋白質外，還含有1.6%碳水化合物和2.4%己糖胺。其蛋白質是由數個不同基因編碼的不同多肽組成的，分子量為15 000～22 000道爾頓，基因結構大約為1 000個核苷酸，結構基因編碼146～166個氨基酸序列，含有17種以上的氨基酸，其中的天冬氨酸、谷氨酸和亮氨酸含量較高，不含核酸，所以不會被DNA酶與RNA酶破壞，但對蛋白酶較敏感。其余的序列為非編碼序列。干擾素對熱穩定，4 ℃可保存很長時間，-20 ℃可長期保存其活性，56 ℃下30分鐘可被滅活。pH 2～10范圍內干擾素不被破壞，α及β干擾素在pH為2穩定，γ干擾素在pH為2不穩定。

3 干擾素的作用

干擾素是一種廣譜抗病毒劑，并不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過細胞表面受體作用，使細胞產生抗病毒蛋白（AVP），抑制病毒的復制。正常細胞表面有干擾素的特異性受體系統，IFN-α及IFN-β的結合在同一受體可以相互競爭，IFN-γ有單獨的受體。干擾素對細胞表面的干擾素受體有高度親和力，它與受體相互作用可激發細胞合成新的mRNA，產生多種效應蛋白，同時又可增強NK細胞、巨噬細胞和T細胞的活力，從而發揮抑制病毒繁殖與復制、抗腫瘤及免疫調節等作用。干擾素不具有特異性，即由一種病毒所誘發產生的干擾素具有抵御多種病毒甚至其他細胞內寄生的病原微生物的能力。干擾素的作用表現在以下幾個方面。

3.1 抗病毒作用

干擾素具有廣譜抗病毒活性，對多種DNA病毒和RNA病毒均有抑制作用。表現在：一是干擾素受體內的“抗病毒蛋白”基因受到干擾素作用后被活化，產生抗病毒蛋白可阻止病毒mRNA翻譯并促進病毒mRNA降解；二是Ⅰ型干擾素作用于病毒感染的細胞膜上的受體，促進細胞表面MHC-Ⅰ類（主要組織相容性抗原復合物Ⅰ）分子的表達水平，有助于受病毒感染的細胞向Tc淋巴細胞亞群呈遞抗原，引起靶細胞的溶解；三是Ⅱ型干擾素可活化NK細胞，增強其對病毒感染細胞的殺傷能力。

3.2 抗腫瘤作用

Ⅰ型干擾素能抑制細胞的DNA合成、減慢細胞的有絲分裂速度。這種抑制作用有明顯的選擇性，對腫瘤細胞的抑制作用比對正常細胞的抑制作用要強500～1 000倍。干擾素主要是影響細胞分裂的G1至G2期的DNA復制并改變腫瘤細胞的表面結構和腫瘤原性，從而對腫瘤細胞有去惡化作用。Ⅱ型干擾素的免疫調節作用，可增強NK細胞對病毒感染的殺傷能力和對腫瘤細胞的免疫監視功能。

3.3 免疫調節作用

Ⅱ型干擾素可使巨噬細胞表面MHC-Ⅱ類分子的表達增加，提高其抗原呈遞能力，同時還可增強巨噬細胞表面Fc受體表達，促進巨噬細胞免疫復合物對抗體包被的病原體和腫瘤細胞的殺傷能力；還可通過誘導NK前體細胞分化為效應型NK細胞及活化NK細胞兩個途徑，增強NK細胞對病毒感染細胞與腫瘤細胞的細胞毒作用。干擾素對淋巴細胞的作用較為復雜。用低劑量干擾素或在抗原致敏之后（免疫反應后期）加入干擾素，可促進B細胞產生抗體，增強T細胞的功能，增強細胞免疫與體液免疫的作用。若干擾素濃度過高或在抗原致敏之前（免疫反應早期）使用干擾素，則會表現出對細胞免疫和體液免疫的抑制作用。其原因可能為高濃度的干擾素在免疫應答反應的早期抑制淋巴細胞的分化發育之故。

3.4 干擾素的毒副作用

長期大劑量使用干擾素，可出現疲乏、無力、胃腸道不適、中等程度發熱及肝功能異常等。偶爾出現白細胞與血小板減少，可能與干擾素抑制造血細胞的分裂有關。

4 干擾素在獸醫臨床上的科學應用

崔尚金研究員（2011）報道，用重組豬干擾素防治溫和型豬瘟、藍耳病、豬偽狂犬病、圓環病毒2型感染、豬流感、水皰病、流行性腹瀉、傳染性胃腸炎、輪狀病毒病、口蹄疫及病毒與細菌共感染或繼發感染，早期應用防治效果良好。郭定宗、祝海寶（2006）應用大連三儀集團研發的重組豬干擾素治療豬瘟的治愈率達65.3%、豬流感治愈率達98.9%、豬病毒性腹瀉治愈率達100%、羔羊腹瀉治愈率達95.3%、小鵝瘟治愈率達75.4%。用三儀集團研發的重組家禽干擾素用于防治雞傳染性支氣管炎、雞傳染性喉氣管炎、傳染性法氏囊病、馬立克氏病、傳染性貧血、雞白血病、新城疫、呼腸孤病毒病及雞球蟲病等已取得良好的臨床效果，受到廣大養雞場的一致好評。同時，用干擾素防治奶牛病毒性腹瀉與乳房炎、犬細小病毒病、偽狂犬病、弓形蟲病、血吸蟲病、瘧疾原蟲病及利什曼原蟲病、雞球蟲病等也取得了良好的臨床效果。汪恭富等（2006）應用重組干擾素對犬冠狀病毒病、犬細小病毒病、犬瘟熱及犬傳染性肝炎等疫病進行治療，通過跟蹤調查，證實了干擾素治療犬的病毒性疾病具有良好的臨床效果。目前獸醫臨床上常用具有代表性的預防與治療方案簡介如下，供參考選用。

4.1 保健預防方案

方案1：銀翹散（金銀花、連翹、甘草、荊芥、桔梗、淡竹葉等）1 000克、干擾素800克、轉移因子400克、溶菌酶400克，拌料1噸，連續飼喂7～12天。

方案2：小柴胡散（柴胡、黃芩、黨參、半夏、甘草等）600克、干擾素800克、免疫核糖核酸600克、細菌素400克，拌料1噸，連續飼喂7～12天。

方案3：仙方活命三連散（板蘭根、大青葉、白芷、紫花地丁、蒲公英等）1 000克、干擾素800克、免疫球蛋白600克、細菌素400克，拌料1噸，連續飼喂7～12天。

方案4：香菇多糖粉1 200克、干擾素800克、白細胞介素-4（400克）、抗菌肽400克，拌料1噸，連續飼喂7～12天。

方案5：荊防敗毒散（荊芥、防風、羌活、獨活、柴胡、前胡、枳殼、茯苓、桔梗、川芎、薄荷、甘草等）300克、干擾素600克、白細胞介素-2（400克）、抗菌肽400克，對水1噸，連續飲用7～12天。

根據當地動物疫病流行規律、場內動物的健康狀況與不同的生產階段，結合實際選用上述相應功能的方案實施保健預防，可有效預防病毒性、細菌性、寄生蟲及多種病原體共感染或繼發感染的疫病，一年四季均可使用，預防效果尚佳。

4.2 治療方案

方案1：清開靈注射液（金銀花、板蘭根、牛黃、水牛角、黃芪、珍珠母、梔子等），小動物每次每頭10毫升、中等動物15毫升、大動物20毫升，干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），白細胞介素-4（每千克體重0.2毫升），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時肌注抗菌肽（每60千克體重1毫升，重癥可加量），每日1次，連用4次。

方案2：大敗毒注射液（連翹、紫花地丁、板蘭根、白芷、蒲公英等）每千克體重0.1毫升，干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），轉移因子（每40千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時肌注長效多西環素注射液，每千克體重0.2毫升，每2日1次，連用2次。

方案3：雙黃連注射液（每千克體重0.2毫升）、干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量）、白細胞介素-2（每千克體重0.2毫升），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時肌注30%氟苯尼考注射液，每千克體重0.1毫升，每日1次，連用4次。

方案4：復方板蘭根注射液（每千克體重1毫升）或者復方柴胡注射液（每千克體重0.2毫升）、干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），高免球蛋白（每50千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時肌注頭孢噻呋鈉（每千克體重5毫克），每日1次，連用4次。

方案5：穿心蓮注射液（每千克體重0.2毫升）或者大青葉注射液（每千克體重0.2毫升），干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），免疫核糖核酸（每70千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時肌注頭孢拉定（每千克體重5毫克），每日1次，連用4次。

方案6：黃芪多糖注射液（每千克體重0.2毫升）或者靈芝多糖注射液（每千克體重0.1毫升），干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），轉移因子（每40千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時肌注泰拉菌素（瑞可欣）每40千克體重1毫升，每2日1次，連用2次。

方案7：復方魚腥草注射液（每次5～20毫升）或者銀黃注射液（金銀花、黃芩等），每千克體重0.1毫升，干擾素（每40千克體重1毫升），免疫核糖核酸（每70千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時肌注抗菌肽（每60千克體重1毫升，重癥可加量），每日1次，連用4次。

方案8：支持療法。10%葡萄糖鹽水300～500毫升，10%樟腦磺酸鈉10毫升，25%維生素C 5～8毫升，混合靜脈注射，每日1次，連用2～3次。同時飲用電解質多維800克、黃芪多糖粉800克、溶菌酶400克，對水1噸，連續飲用7天。

以上治療方案可用于動物急性呼吸道疾病、消化系統疾病、免疫抑制性疾病、繁殖障礙性疾病以及常見多發的急性傳染性疾病的治療。要結合養殖場動物發病狀況與臨床特征、流行特點綜合診斷，選用適宜功能的方案實施對癥治療，均可取得良好的臨床治療效果。

5 使用干擾素制劑的注意事項

5.1 稀釋干擾素制劑要用滅菌注射用水或生理鹽水，不要使用酸堿性溶液或葡萄糖鹽水作稀釋劑，否則影響其生物活性而失效。

5.2 制劑啟用后按規定的時間內一次用完，以免失效。融化后不要再進行冰凍，可放于4 ℃冰箱中保存，3天之內用完。

5.3 干擾素制劑一般肌肉注射；飲水口服給藥，水溫不要超過30 ℃。

5.4 干擾素制劑在臨床上可與轉移因子、白細胞介素、免疫核糖核酸、高免球蛋白等細胞因子制劑與抗菌肽、溶菌酶、細菌素等生物獸藥以及中獸藥制劑，比如清開靈、黃芪多糖、大青葉、板蘭根、柴胡、魚腥草、連翹、金銀花、穿心蓮、雙黃連等制劑聯合使用，混合注射或飲水，不影響防治效果，而且具有協同作用與促進作用，增強其藥效，可提高防治效果。也可配合某些抗生素使用，但不能混合注射，要分別肌注。

5.5 由于干擾素能抑制病毒復制與繁殖，因此動物使用干擾素制劑后，96小時內不要給動物接種弱毒活疫苗，以免影響疫苗的免疫效果。滅活疫苗（死疫苗）可與干擾素制劑同時使用，但不要混合注射，分別肌注不會影響疫苗的免疫效果。

5.6 干擾素雖然具有廣譜的抗病毒作用，但又具有相對的種屬特異性，一般在同種細胞中生物活性最高；同時不同的病毒、同一種病毒的不同血清型對干擾素的敏感性也不盡相同。因此，臨床上要根據引發的動物疾病病原體的生物學特性及發病的臨床特征和疾病流行特點，有針對性地選擇使用干擾素制劑，配合優質的中獸藥制劑、生物獸藥及高效安全的抗生素聯合使用，防治效果會更好。

5.7 病原感染動物的早期與潛伏期使用干擾素制劑，防治效果更佳。