化學發光免疫分析法、酶聯免疫吸附試驗在乙型肝炎病毒標志物檢測中的效果評價

陳文強

淄博市周村區人民醫院檢驗科，山東淄博 255300

病毒性乙型肝炎是一種常見的肝臟性疾病， 患者多表現為肝區疼痛，乏力和食欲不振等情況，部分患者會出現黃疸和肝功能受損等損傷，一旦發現不及時，則很容易導致患者出現肝硬化， 甚至導致肝癌問題的發生， 這種病情具有一定的傳染性， 會通過血液進行傳播，患者一旦被感染，如不能及時清除，則會導致患者出現免疫功能降低等情況， 甚至導致患者出現全身感染，誘發各種疾病，對患者的生命安全造成嚴重威脅[1]。進行血清學標志物檢驗， 是臨床中對乙型肝炎病毒患者進行檢驗的主要方法， 在檢測工作的實際開展過程中， 其主要包括化學發光免疫分析法和酶聯免疫吸附實驗法。該研究則以該院2014 年8 月—2015 年8 月期間所接受的200 例乙型肝炎病毒患者展開相關研究分析如下，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

于該院乙型肝炎病毒患者中方便選取試驗對象，共選取200 例乙型肝炎病毒患者， 所有患者入院之后需要采集靜脈血， 采集之后分別采取化學發光免疫分析法和酶聯免疫吸附試驗方法， 每種方法檢測人數為100 例，實驗組患者年齡在22～56 歲；其中男性54 例，女性46 例。 而對照組患者年齡在21～57 歲；其中男性56 例，女性44 例。 兩組人員的一般資料差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。 該研究通過倫理委員會批準，各項工作的開展均在患者簽署知情同意后進行實施。

納入標準： 患者均在經過乙肝病毒生物芯片檢測確診為乙型肝炎病毒患者， 患者肝部組織存在不同程度病變。

排除標準： 患者具有精神病史和其他臟器功能損傷的可能性。

1.2 方法

在清晨采集患者空腹靜脈血，主要采集肘靜脈血，為3～5 mL，給予其離心機離心處理，時間為12～14 min，保證3 000 r/min，并將上清液進行分離，并將其放置在冰箱中，將冰箱的溫度調節到-20℃給予保存，并將發光免疫分析法和酶聯免疫吸附實驗方法進行應用[2]。 對患者進行檢查， 其中發光免疫分析法需要將型號為博陽LICA 化學發光儀的免疫分析儀進行應用， 而酶聯免疫吸附實驗方法則是手工方法，其對應的檢測試劑均為配套試劑。 在對標志物進行實際檢測時，需要根據試劑的說明書進行嚴格操作，并注意對檢測結果進行記錄[3]。

1.3 觀察指標

對兩種檢測方法的檢測準確率和血清標志物陽性率進行觀察和分析。

1.4 統計方法

選用SPSS 20.0 統計學軟件分析數據，計量資料以（）表示，行t 檢驗；計數資料以頻數和百分比(%)表示，行χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 檢測準確率

采用發光免疫分析法進行檢測， 其準確率達到96.00%，采用酶聯免疫吸附實驗方法進行檢測，其準確率為84.00%，其組間數據差異有統計學意義（χ2=8.000，P＜0.05），見表1。

表1 兩種檢測方法檢測準確率分析比較

2.2 血清標志物陽性率

發光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 檢測方面的陽性檢測率為77.00%和35.00%，高于酶聯免疫吸附實驗方法檢出率的60.00%和20.00%, 其數據差異有統計學意義（χ2=6.697、5.643，P＜0.05），但是發光免疫分析發在抗-HBs， 抗-HBe 和抗-HBc 方面的檢出率則為19.00%，24.00%和67.00%， 而酶聯免疫吸附法的檢出為18.00%，28.00%和66.00%， 兩種檢測方法差異無統計學意義（P＞0.05）。 見表2。

3 討論

在人們的生活方式得以發生改變的情況下， 乙型肝炎患者的發病率逐漸增高，患病人數越來越多，對患者的生活質量和生命健康均造成了嚴重的不良影響，在這種情況下，就需要保證早發現早治療，從而保證治療有效性，實現對病情發展的有效控制。 乙型肝炎，為血源性傳播，會經血液和母嬰進行，根據相關文獻研究數據結果顯示， 在乙肝病毒攜帶者的精液和陰道分泌物中，均能夠檢出HBsAg，這便為乙肝病毒的侵入提供了條件。 也就是說， 梅毒患者既是乙肝病毒的高危人群，也是易感人群。 就病毒性乙型肝炎來說，其是一種常見的肝臟性疾病，患者多表現為肝區疼痛，乏力和食欲不振等情況， 部分患者會出現黃疸和肝功能受損等損傷， 一旦發現不及時， 則很容易導致患者出現肝硬化，甚至導致肝癌問題的發生，這種病情具有一定的傳染性，會通過血液進行傳播，患者一旦被感染，如不能及時清除，則會導致患者出現免疫功能降低等情況，甚至導致患者出現全身心感染，誘發各種疾病，對患者的生命安全造成嚴重威脅。 進行血清學標志物檢驗，是臨床中對乙型肝炎病毒患者進行檢驗的主要方法， 在檢測工作的實際開展過程中， 其主要包括化學發光免疫及分析法和酶聯免疫吸附實驗法[5]。 在將傳統診斷方法進行應用時，其結果并不顯著，會對患者的治療造成延誤。 要想將治療率進行提高，保證治療方案合理性，實現對患者病情的有效控制，減輕患者痛苦，就成為了當前臨床發展工作中的重要內容。 在近些年的發展中，發光免疫分析法和酶聯免疫吸附法被廣泛應用在對乙型病毒性肝炎進行診斷工作中，并且其應用效果顯著。

表2 兩種檢測方法的血清標志物陽性率檢測情況對比[n(%)]

酶聯免疫吸附法在進行檢測時， 其應用原理需要從幾方面入手，首先，促進某種酶與抗原或抗體進行連接，促進其中酶標抗體和抗原的形成，這時所產生的形成物主要包含兩種成分， 分別為酶活性和免疫活性[6]。其次，在固相載體表面抗體或是抗原完成結合時，其會促進免疫活性的有效保存。 酶聯免疫吸附法在進行應用時，具有一定的臨床優勢，不僅操作方法較為簡單，而且其成本較低， 但是在實際中其會受到各種因素的影響限制，導致其具有一定的特異性反應，導致結果呈現出不穩定性，就濃度過高的待檢產物來說，其會在鉤狀效應的作用下， 導致假陰性結果的出現，甚至發生漏檢情況。 酶聯免疫吸附法的判斷結果，主要是依據酶顯色的顏色深淺實現判斷， 在酶與抗原和抗體的結合物濃度較低時，會表現出較小的吸光度值，并且容易導致假陰性現象的發生，與此同時，這種檢測方法的應用存在一定的局限性， 很容易導致HBsAg 假陰性漏檢現象的發生[7]。

發光免疫分析法，是一種新型的檢測方法，主要應用電化學發光和免疫測定促進結合，在實際應用中，其會對電化學發生作用，會在電極表面引發化學反應，進而將其進行利用，完成免疫檢測，這是發光免疫分析法的主要應用原理。 發光免疫分析法的應用靈敏度較高，僅需要較短的檢測時間，并且應用范圍相對較廣，對應的檢測準確率較高， 因此， 在臨床發展中得以廣泛認可。HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，和抗-HBc 是臨床對病毒性乙型肝炎進行診斷的主要物質[8]。

采用發光免疫分析法進行檢測， 其準確率達到96.00%，采用酶聯免疫吸附實驗方法進行檢測，其準確率為84.00%， 發光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 檢測方面的檢測值高于酶聯免疫吸附實驗方法， 其數據差異有統計學意義（P＜0.05），但是在抗-HBs，抗-HBe和抗-HBc 方面的檢測值，兩種檢測方法差異無統計學意義（P＞0.05）。這與Ceejay L 等人[9]的研究結果相同，其選取50 例乙型肝炎患者進行研究，探究發光免疫分析法的監測準確性，其檢測準確率達到94.00%。 而叢青洲[7]則進行了不同方法和實驗室間血清HBsAg、HBeAg 及HBV-DNA 檢測結果的比較分析， 共選取60 例乙型肝炎患者，其方法分別為發光免疫法和酶聯免疫吸附法，結果表示，各項化學檢測結果差異無統計學意義（P＞0.05）。而該研究結果則顯示， 發光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 檢測方面的檢測值高于酶聯免疫吸附實驗方法， 導致這種情況發生的原因可能是因為樣本數大小不同，進而對結果造成差異性影響。

開展病毒性乙型肝炎的情況分析， 這是一種較為常見的肝臟類型性疾病， 患者會因此病表現出肝區疼痛現象，并且伴隨著相應的食欲不振，部分病情較為嚴重的患者會出現肝功能受損問題。 此類疾病若發現的不及時，會使得病情惡化導致患者肝硬化，甚至病變成為肝癌嚴重的威脅了患者的生命健康安全， 同時此類疾病的傳染性相對較高，因此患者若是被感染，必須進行其自身的病毒的即使清除， 杜絕患者全身心感染問題的出現，同時也避免了各項誘發性疾病的產生，盡可能的降低疾病對于患者的生命健康的威脅。 在檢測工作開展的實際進程中， 主要應用化學發光免疫以及分析法進行實驗[9]。 當下ELISA 在臨床治療開展進程中的運用， 在初期檢測乙肝病毒血清藥理的主要運行方式之一，這一操作方法相對較為簡單，并且實驗結果的勘察具有較強的明確性和標志性， 但是在檢驗工作的開展進程中， 需要進行因抗體產生而形成的檢測誤差的有效排查， 盡可能的降低抗體產生對于實驗結果的產生的不良影響性。

綜上所述，對乙型肝炎病毒標志物進行檢測，發光免疫分析法和酶聯免疫吸附實驗法的準確率均相對較高，但是發光免疫分析法更為顯著。