生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)研究進(jìn)展

劉勇鵬 張濤 王秋嶺 姚小丹 宋丹陽(yáng) 王改革 賈延釗 姚秋菊 孫治強(qiáng)

摘 ? ?要：當(dāng)前對(duì)綠色農(nóng)產(chǎn)品的消費(fèi)需求，客觀上限制了高毒化學(xué)農(nóng)藥在防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)上的使用。生物菌劑具有安全高效、不污染環(huán)境的優(yōu)點(diǎn)，使其防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)的優(yōu)勢(shì)更明顯，受到蔬菜種植者和消費(fèi)者的重視和青睞。筆者概述了根結(jié)線蟲(chóng)、設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病發(fā)生條件、致病原理與危害，分析了當(dāng)前生物菌劑的研究應(yīng)用現(xiàn)狀，以期為生物菌劑的發(fā)展提供重要的參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：設(shè)施蔬菜;根結(jié)線蟲(chóng);生物菌劑;安全高效

中圖分類號(hào)：S641+S642 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-2871（2020）10-009-06

Abstract： At present， the consumption demand for green agricultural products restricts the use of highly toxic chemical pesticides in the control of vegetable root knot nematodes. Biological fungicide has the advantages of safety， high efficiency and no pollution to the environment， which makes it more and more obvious in the prevention and control of root knot nematode disease of vegetables in greenhouse， and it is valued and favored by vegetable growers and consumers. Based on the overview of root knot nematode， the occurrence conditions， pathogenic mechanism and damage of root knot nematode to protected vegetables， and the current research and application of biological agents， hoping to provide an important reference basis for the development of biological agents.

Key words： Protected vegetables; Biocontrol agents; Root knot nematode; Safety and efficiency

設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病是典型的土傳病害，主要危害蔬菜的根系，通過(guò)寄生在蔬菜作物的幼根上并形成根結(jié)，誘導(dǎo)植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化為特異性的取食位點(diǎn)，從中攝取營(yíng)養(yǎng)維持根節(jié)線蟲(chóng)的發(fā)育和繁殖，進(jìn)而破壞蔬菜根部細(xì)胞的組織結(jié)構(gòu)與活力，阻礙礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)及水分的運(yùn)輸，導(dǎo)致植株葉片發(fā)黃變小、營(yíng)養(yǎng)失調(diào)、植株矮小、不結(jié)實(shí)或結(jié)實(shí)不良[1-2]。據(jù)報(bào)道，全世界發(fā)現(xiàn)的根結(jié)線蟲(chóng)有80多種，寄主植物2 000多種[3]。設(shè)施蔬菜，尤其是在日光溫室中的蔬菜，由于連作次數(shù)多，環(huán)境溫度高，因此根結(jié)線蟲(chóng)危害最嚴(yán)重。據(jù)報(bào)道，在設(shè)施蔬菜中由根結(jié)線蟲(chóng)引起的病害可直接導(dǎo)致減產(chǎn)50%～80%，已經(jīng)成為設(shè)施蔬菜發(fā)展的主要障礙[4]。生物菌劑防治是主要利用自然界中根結(jié)線蟲(chóng)的細(xì)菌、真菌等微生物天敵進(jìn)行防治，其中關(guān)于食線蟲(chóng)真菌、穿刺芽孢桿菌、根際細(xì)菌的研究較多，在作用機(jī)制方面也取得了重大進(jìn)展，是當(dāng)前設(shè)施蔬菜防治根結(jié)線蟲(chóng)病的熱點(diǎn)及主要研究方向[5-6]。本文概述根結(jié)線蟲(chóng)、設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病條件、致病原理及危害、國(guó)內(nèi)外生物菌劑研究的現(xiàn)狀，為進(jìn)一步對(duì)擴(kuò)大生物菌劑在防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病方面的應(yīng)用提供理論參考依據(jù)。

1 根結(jié)線蟲(chóng)概述

根結(jié)線蟲(chóng)（Meloidogyne spp.）屬于土壤定居性內(nèi)寄生線蟲(chóng)，屬于線蟲(chóng)門側(cè)尾腺綱（Secernentea）墊刃目（Tylenchida）異皮總科（Heteroderidea）根結(jié)線蟲(chóng)科（Meloidogyne）根結(jié)線蟲(chóng)屬（Meloidogyne Goeldi），已經(jīng)成為危害農(nóng)作物的重要病原生物之一[7]，在1879年被首次發(fā)現(xiàn)，隨后又有新種不斷被發(fā)現(xiàn)，根結(jié)線蟲(chóng)危害的報(bào)道也不斷增多。目前我國(guó)設(shè)施蔬菜生產(chǎn)上最嚴(yán)重的病原線蟲(chóng)是南方根結(jié)線蟲(chóng)，其繁殖速度快、抗性強(qiáng)、易傳播，也是當(dāng)前防治的主要對(duì)象[8]。

1.1 雌雄根結(jié)線蟲(chóng)主要特征

雄蟲(chóng)蟲(chóng)體外觀呈蠕蟲(chóng)狀，雌蟲(chóng)蟲(chóng)體外觀呈圓形至梨形。雌蟲(chóng)不存在孢囊期，有略彎曲的頸，最大長(zhǎng)度3 000 μm，最大寬度750 μm。雄蟲(chóng)具體環(huán)，最大長(zhǎng)度2 500 μm，最小長(zhǎng)度600 μm。根結(jié)線蟲(chóng)卵外觀呈腎臟形到長(zhǎng)橢圓形，顏色多為淡褐色，大小在408～3 784 μm2之間。此外，2齡侵染幼蟲(chóng)呈蠕蟲(chóng)狀，無(wú)色透明，外觀不規(guī)則，尾部呈圓錐狀，尾尖有透明區(qū)又叫透明尾，最大長(zhǎng)度500 μm，最大寬度16 μm。口針纖細(xì)，在15 μm左右。3齡及4齡根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)時(shí)期蟲(chóng)體膨大成囊狀，固定寄生于作物根結(jié)內(nèi)，且有明顯突尾等[9]。

1.2 根結(jié)線蟲(chóng)習(xí)性及繁衍

根結(jié)線蟲(chóng)從卵開(kāi)始孵化到幼蟲(chóng)，再到成蟲(chóng)，最后到兩性成蟲(chóng)交配產(chǎn)卵的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育循環(huán)過(guò)程為根結(jié)線蟲(chóng)的生活史。通常分為卵、幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)3個(gè)時(shí)期。根結(jié)線蟲(chóng)以卵、2齡幼蟲(chóng)及雌成蟲(chóng)3種形態(tài)隨植株病根在土壤中繼續(xù)存活，并在次年再次對(duì)植株進(jìn)行侵染傷害[10]。研究發(fā)現(xiàn)，根結(jié)線蟲(chóng)2齡期是防治的關(guān)鍵時(shí)期。有數(shù)據(jù)顯示，在正常的溫濕度條件下，南方根結(jié)線蟲(chóng)平均40 d 左右發(fā)生1代，河南一年發(fā)生3～4代，且世代重疊發(fā)生，再侵染發(fā)生次數(shù)較多。有研究表明，根結(jié)線蟲(chóng)生活周期與當(dāng)?shù)販貪穸取⒆魑锷L(zhǎng)季節(jié)、降雨量等有很大關(guān)系[11-12]。

2 設(shè)施蔬菜內(nèi)根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病條件、致病原理及主要危害

2.1 設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病條件

根結(jié)線蟲(chóng)最適土壤溫度平均在25 ℃左右。設(shè)施保護(hù)地比露地土壤環(huán)境升溫早、根結(jié)線蟲(chóng)初侵染時(shí)間早、繁殖世代數(shù)多，因而保護(hù)地蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)危害比露地栽培嚴(yán)重[13];土壤濕度及結(jié)構(gòu)影響根結(jié)線蟲(chóng)孵化及生存[14]。設(shè)施內(nèi)濕度大，土壤結(jié)構(gòu)單一，是設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病害發(fā)生的重要原因之一;連作更是根結(jié)線蟲(chóng)病害發(fā)生的重要原因之一。由于設(shè)施結(jié)構(gòu)的不可移動(dòng)性，設(shè)施蔬菜栽培中主要的栽培模式是連作，其根結(jié)線蟲(chóng)危害更加嚴(yán)重，尤其在冬季日光溫室內(nèi)，室內(nèi)環(huán)境溫度較高，適宜栽培的蔬菜種類較少，連作年限較長(zhǎng)，根結(jié)線蟲(chóng)可繼續(xù)繁殖危害，發(fā)病也更加嚴(yán)重[15];近年來(lái)在設(shè)施蔬菜的生產(chǎn)中，化肥的大量施用以及栽培技術(shù)的不規(guī)范，導(dǎo)致土壤結(jié)構(gòu)及營(yíng)養(yǎng)失調(diào)，也使設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)生更為嚴(yán)重;設(shè)施蔬菜種植主要集中在高附加值類蔬菜，大多是瓜類及茄果類蔬菜，這類蔬菜差不多都是根結(jié)線蟲(chóng)的易感寄主，進(jìn)一步加劇了設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)生;在品種抗性選育方面，只有番茄、辣椒等少數(shù)蔬菜培育出抗性品種，但其品種價(jià)格較高，退化快，也使設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)生率逐年增加，危害程度日益加重[16-17]。

2.2 設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)致病原理及危害

近年來(lái)，設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病害主要以黃瓜、番茄、絲瓜、苦瓜、芹菜等最為嚴(yán)重，病害一旦發(fā)生能直接導(dǎo)致減產(chǎn)一半左右，嚴(yán)重時(shí)甚至絕收。茄子、豆類、咖啡等8種非易感根結(jié)線蟲(chóng)的蔬菜作物損失率也在25%左右。全世界因根結(jié)線蟲(chóng)造成的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)損失最高可達(dá)25%[18]。根結(jié)線蟲(chóng)主要侵染設(shè)施內(nèi)蔬菜的側(cè)根和須根，設(shè)施蔬菜被線蟲(chóng)侵染后根部表面會(huì)形成大小不同的根結(jié)（根瘤），早期根結(jié)為白色，后期變?yōu)楹稚砻娉霈F(xiàn)皸裂皺縮，侵染嚴(yán)重的根系則全部糜爛。內(nèi)部表現(xiàn)主要為根結(jié)線蟲(chóng)的2齡幼蟲(chóng)侵入蔬菜根系頂部的分生組織，由食道分泌并形成一種生物酶和植物刺激素，刺激寄主細(xì)胞發(fā)生有絲分裂，并形成巨型細(xì)胞，進(jìn)而在根部形成根結(jié)，阻礙根系營(yíng)養(yǎng)對(duì)地上部的供應(yīng)，導(dǎo)致植株地上部營(yíng)養(yǎng)失調(diào)，影響植物的株高、莖粗等生物形態(tài)指標(biāo)及作物抗氧化系統(tǒng)，以及內(nèi)源激素、光合作用及營(yíng)養(yǎng)元素的吸收分配，最終導(dǎo)致設(shè)施蔬菜產(chǎn)量和品質(zhì)的嚴(yán)重下降[19]。此外，2齡幼蟲(chóng)侵入植株根系后會(huì)產(chǎn)生傷口，此時(shí)土壤中的有害病原菌也會(huì)趁機(jī)從傷口侵入到植物體內(nèi)，造成青枯病、枯萎病、立枯病、根腐病等其他土傳病害的發(fā)生與危害，對(duì)設(shè)施內(nèi)蔬菜造成二次傷害[20]。

3 設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)生物菌劑防治現(xiàn)狀

用生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)主要是依靠根結(jié)線蟲(chóng)的天敵，主要包括真菌、細(xì)菌、病毒、立克氏體、放線菌、捕食性線蟲(chóng)、渦蟲(chóng)和原生動(dòng)物等[21]。目前，生物菌劑具有安全、環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病的熱點(diǎn)研究課題[22]。在當(dāng)前研究中針對(duì)食線蟲(chóng)真菌、穿刺芽孢桿菌、根際細(xì)菌及放線菌的報(bào)道較多，而關(guān)于其他生物方法防治的較少。筆者主要從真菌、細(xì)菌及放線菌3個(gè)方面進(jìn)行綜述分析。

3.1 真菌性生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)研究現(xiàn)狀

真菌的生防機(jī)制是寄生、拮抗、捕食或毒殺[23]，目前報(bào)道的根結(jié)線蟲(chóng)寄生真菌有30多種。主要報(bào)道的真菌有淡紫擬青霉（Paecilomyces lilacinus）、粉紅粘帚霉菌（Gliocladium roseum）、厚垣輪枝菌（Verticillium chlamydosporium）、哈次木霉（Trichoderma harzianum）及綠色木霉（Trichoderma viride）、枯草芽孢桿菌、疣孢漆斑菌等。如黃闊等[24]通過(guò)田間試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，土壤中添加微生物菌劑淡紫擬青霉、枯草芽孢桿菌、熒光假單胞桿菌均能夠控制煙草根結(jié)線蟲(chóng)病，防效可達(dá)80%，且能增強(qiáng)土壤微生物群落多樣性。在主要寄生真菌類型方面，肖順[25]研究發(fā)現(xiàn)，根結(jié)線蟲(chóng)的寄生真菌主要是卵囊寄生真菌。對(duì)主要食線真菌淡紫擬青霉、厚垣輪枝菌，楊凡等[26]研究表明，pt361淡紫紫孢菌株對(duì)線蟲(chóng)卵寄生率達(dá)75%，且其菌株混合發(fā)酵液對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)致死率超過(guò)90%。許艷麗等[27]研究發(fā)現(xiàn)，鐮孢菌屬（Fusarium spp.）、厚垣輪枝菌（Verticillium chlamydosporium）和淡紫擬青霉菌（Paecilomyces lilacinus）廣泛存在于連作大豆田中，試驗(yàn)室條件下混合寄生真菌發(fā)酵液均對(duì)大豆胞囊線蟲(chóng)胞囊和卵孵化具有強(qiáng)烈的抑制作用，胞囊孵化抑制率在59.1%～87.8%，卵孵化抑制率在72.1%～84.7%，大豆胞囊線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的致死率在48 h時(shí)超過(guò)94%，在72 h時(shí)達(dá)到了100%。劉勇鵬等[28]試驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)，不同用量的淡紫擬青霉菌劑與厚垣輪枝菌制劑對(duì)番茄根結(jié)線蟲(chóng)病防治也有明顯的效果，且對(duì)寄主番茄的生長(zhǎng)發(fā)育也有很好的調(diào)控作用。劉暢[29]等研究發(fā)現(xiàn)，在25 ℃條件下，厚垣輪枝菌寄生卵防治效應(yīng)產(chǎn)生較快，使用一定劑量90 d后，對(duì)溫室盆栽番茄根結(jié)線蟲(chóng)病的防效可以達(dá)到65%。宋益民等[30]介紹了淡紫擬青霉微生物農(nóng)藥的特點(diǎn)和使用方法，為當(dāng)前生產(chǎn)上防治蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病提供了一定的參考依據(jù)。整體研究表明淡紫擬靑霉、厚垣輪枝菌不僅對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病具有很好的防治效果，而且對(duì)植株的生長(zhǎng)發(fā)育也有一定的促進(jìn)作用。對(duì)哈茨木霉菌、枯草芽孢桿菌，如馬金慧等[31]研究發(fā)現(xiàn)，木霉菌TRI2發(fā)酵液在一定時(shí)間內(nèi)可以全部殺死根結(jié)線蟲(chóng)，在盆栽試驗(yàn)中黃瓜根結(jié)減退率在60%以上，在田間對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)的防治效果也在70%以上。翟明娟等[32]研究發(fā)現(xiàn)，從土壤中分離到木霉菌株Tvir-6發(fā)酵液在24 h 內(nèi)對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的校正死亡率高達(dá)98%，在田間試驗(yàn)中防效達(dá)到64.9%，并可使黃瓜產(chǎn)量提高34.1%。段玉璽等[33]也進(jìn)行了哈次木霉Snef85發(fā)酵液對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的毒力測(cè)試效果及精確防效的研究等。此外，丁國(guó)春等[34]研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌AR11菌株對(duì)番茄根部根結(jié)和卵塊的形成有明顯的抑制作用，低濃度的菌懸液和上清液對(duì)卵的孵化具有抑制作用，對(duì)番茄的生長(zhǎng)也有促進(jìn)作用。在其他微生物真菌方面，最早錢振官等[35]在1993年報(bào)道，寡孢節(jié)叢孢菌（Arthiobotrys oligospora）屬于捕食性線蟲(chóng)真菌，褶生輪枝菌（Verticillium lamelicola）是寄生性線蟲(chóng)真菌，對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)均有很好的防治效果。賴寶春等[36]發(fā)現(xiàn)了一株具有殺線蟲(chóng)活性的鐮刀菌，對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)寄生和繁殖也有很好的抑制效果。廖夢(mèng)婕等[37]也初步明確了蠟質(zhì)芽胞桿菌AR156防治南方根結(jié)線蟲(chóng)的生防相關(guān)功能基因M60家族肽酶。路鵬鵬等[38]發(fā)現(xiàn)，枝頂孢霉制劑對(duì)土壤微生態(tài)環(huán)境的影響主要在幼苗期，能夠促進(jìn)黃瓜幼苗生長(zhǎng)且對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)也有很好的防治作用。整體而言，在真菌性生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)方面，研究廣泛，應(yīng)用較多，理論體系也最為成熟。

3.2 細(xì)菌性生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)研究現(xiàn)狀

目前，應(yīng)用細(xì)菌防治根結(jié)線蟲(chóng)方面在國(guó)內(nèi)外研究上也已經(jīng)取得了一些進(jìn)展。國(guó)內(nèi)報(bào)道，劉志明等[39]從1995年起就開(kāi)展了致病細(xì)菌防治根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)的試驗(yàn)研究，并對(duì)致病細(xì)菌開(kāi)展篩選及分離工作。黃金鈴等[40]進(jìn)行了根際細(xì)菌菌株防治番茄根結(jié)線蟲(chóng)的盆栽試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)巨大芽孢桿菌處理60 d對(duì)番茄根結(jié)線蟲(chóng)病的防效達(dá)60%。許園園等[41]研究發(fā)現(xiàn)，在蘇云金桿菌無(wú)晶體突變株BMB171中異源表達(dá)cry21-99基因，其表達(dá)產(chǎn)物形成菱形晶體，對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)有毒殺活性，同時(shí)，還在分子水平上預(yù)測(cè)了Cry毒素以外的殺線蟲(chóng)毒力因子和次生代謝產(chǎn)物，為細(xì)菌生物制劑在分子研究水平上提供了重要的理論依據(jù)。彭雙等[42]為了獲得防治植物寄生線蟲(chóng)的微生物菌種資源和防效穩(wěn)定的生物菌劑，發(fā)現(xiàn)植物內(nèi)生細(xì)菌BCM2和CCM7單菌株的固體菌劑對(duì)番茄根結(jié)線蟲(chóng)病的防效最高，均達(dá)到了85%。為高殺線蟲(chóng)活性的細(xì)菌性生物菌劑制備提供了重要的理論支撐。唐佳頻等[43]從1 432株細(xì)菌離體篩選得到了9株具有抗南方根結(jié)線蟲(chóng)的細(xì)菌，其中南極土壤來(lái)源的菌株惡臭假單胞菌（Pseudomonas putida）1A00316，其生防效果達(dá)到71.67%，該菌不僅有直接抗蟲(chóng)作用，還存在間接抗蟲(chóng)機(jī)制。王貽蓮等[44]研究越南伯克氏B418及其與蠟樣芽胞桿菌BCJB01、木霉菌LTR-2和T11-W組合菌劑的配套應(yīng)用技術(shù)，整地時(shí)添加營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，可顯著提高B418菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)的田間防治效果。此外，國(guó)外研究報(bào)道，穿刺巴氏桿菌對(duì)花生根結(jié)線蟲(chóng)病有很好的防治效果[45]。國(guó)內(nèi)研究也發(fā)現(xiàn)了穿刺巴氏桿菌對(duì)感染根結(jié)線蟲(chóng)的植物有很好的保護(hù)作用，可降低根結(jié)線蟲(chóng)蟲(chóng)口密度。其次，研究發(fā)現(xiàn)利用巴氏芽菌侵入南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)后，幼蟲(chóng)生命活性降低并很快死亡，且大田試驗(yàn)也證明了巴斯德氏芽菌對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病的防治具有突出效果[46]。此外，代先強(qiáng)等[47]也發(fā)現(xiàn)巴氏桿菌對(duì)煙草根結(jié)線蟲(chóng)病起到很好的防治效果。綜上可知，隨著對(duì)芽孢桿菌、穿刺巴氏桿菌及根際細(xì)菌等生防細(xì)菌因子研究的不斷加深，細(xì)菌性生物菌劑在防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)方面將扮演著越來(lái)越重要的角色。

3.3 放線菌及其他因子生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)研究現(xiàn)狀

在放線菌的菌素種類上，羅紅麗等[48]研究報(bào)道從感染植物根部的根結(jié)線蟲(chóng)卵和雌蟲(chóng)中分離得到放線菌20株。分離菌株分屬于鏈霉菌屬（Streptomyces）、諾卡氏菌屬（Nocardia）和假諾卡氏菌屬（Pseudonocardia），其中鏈霉菌占80%左右，對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)卵的平均寄生率為54%。此外，眾所周知，抗生素的產(chǎn)生主要依賴放線菌。而當(dāng)前針對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)防治最多的抗生素是阿維菌素，針對(duì)其研究的報(bào)道也較多，有報(bào)道表明其與化學(xué)制劑噻唑膦配合使用對(duì)蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病的防效在90%以上，但其產(chǎn)生的抗藥性問(wèn)題也引起了人們的高度關(guān)注[49]。當(dāng)前放線菌等其他因子防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)，雖然對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)有很高的寄生性及拮抗作用，但抗生素類的抗藥性也成了其發(fā)展的主要障礙。王波等[50]最新研究發(fā)現(xiàn)，淡紫擬青霉與放線菌的復(fù)配菌劑對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的防治效果比單菌株的顯著，對(duì)番茄的根結(jié)形成和根結(jié)線蟲(chóng)卵塊形成的抑制率分別為68.7%和58.4%。因此，在該類生物菌劑上復(fù)配其他微生物制劑將是未來(lái)研究的熱點(diǎn)。

4 討論與展望

隨著人們生活水平的提高，生活品質(zhì)不斷改善，對(duì)蔬菜需求量也越來(lái)越大，設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病作為當(dāng)前設(shè)施蔬菜生產(chǎn)的主要病害，安全高效的防治技術(shù)也越來(lái)越受到人們的廣泛關(guān)注[51]。雖然一些高毒化學(xué)殺線蟲(chóng)劑正在逐漸淘汰，但是低毒的化學(xué)殺線蟲(chóng)劑仍然會(huì)在一定程度上污染土壤微生態(tài)環(huán)境及危害人類的健康。相反，生物菌劑具有促進(jìn)作物生長(zhǎng)發(fā)育、改善土壤生態(tài)環(huán)境、提高作物品質(zhì)產(chǎn)量以及不污染環(huán)境的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前防治根結(jié)線蟲(chóng)研究的熱點(diǎn)[52]。

當(dāng)前針對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)的生物菌劑防治主要集中在真菌上，相關(guān)的研究報(bào)道最多，主要是食線真菌淡紫擬青霉、厚垣輪枝菌、木霉菌、枯草芽孢桿菌等。研究表明，多種食線真菌不僅對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)具有很好的防治效果，且對(duì)植株的生長(zhǎng)發(fā)育也有一定的促進(jìn)作用。其次，在細(xì)菌制劑方面，相關(guān)研究報(bào)道也比較多，主要是孢桿菌、穿刺巴氏桿菌及根際細(xì)菌。尤其在根際細(xì)菌方面，理論基礎(chǔ)相對(duì)完備，是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。而放線菌制劑主要是利用其產(chǎn)生物抗生素，相關(guān)報(bào)道大多是阿維菌素，其他的研究報(bào)道相對(duì)較少，因抗生素抗性問(wèn)題的產(chǎn)生，未來(lái)研究的主要方向集中到與其他微生物制劑的復(fù)配上。同時(shí)，隨著生物菌劑在設(shè)施蔬菜生產(chǎn)中的應(yīng)用，也出現(xiàn)了防治效果差、種類多、價(jià)格高、使用繁瑣及（放線菌抗生素類的）抗性等問(wèn)題。

因此，針對(duì)生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)方面，一是應(yīng)加大科研力度，系統(tǒng)研究微生物菌劑的使用濃度、時(shí)間、方法等，建立符合生產(chǎn)實(shí)際的應(yīng)用技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)及體系。二是應(yīng)用技術(shù)與理論研究結(jié)合，在生理、生化、分子技術(shù)方面揭示其作用機(jī)制，篩選高活性殺線蟲(chóng)菌劑。如董海龍等[53]從疣孢漆斑菌等高等真菌中篩選毒殺線蟲(chóng)的活性化合物，獲得了新型、安全的高效殺線蟲(chóng)劑。三是應(yīng)開(kāi)展多種不同機(jī)制組合防治及藥肥協(xié)同應(yīng)用技術(shù)研究。如聶海珍等[54]在棉隆熏蒸處理后再施用淡紫擬青霉菌劑，不僅能提高大棚番茄產(chǎn)量，而且對(duì)番茄根結(jié)線蟲(chóng)病有很好的防治效果。王廣印等[55]研究發(fā)現(xiàn)，“棉隆+生物菌劑”配施處理土壤可使設(shè)施大棚內(nèi)番茄產(chǎn)量明顯高于對(duì)照和棉隆處理，且降低莖基腐病發(fā)病率80%左右，降低根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病率15%以上，防治根結(jié)線蟲(chóng)病效果在31%左右。張全力等[56]研究發(fā)現(xiàn)，生產(chǎn)添加補(bǔ)充番茄生長(zhǎng)所必需的中微量元素的多功能生物菌肥，也能使番茄增產(chǎn)20%～30%。相信未來(lái)通過(guò)對(duì)生物菌劑的不斷研究創(chuàng)新，生物菌劑在設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)防治上會(huì)取得進(jìn)一步的突破性進(jìn)展及形成更加成熟的理論體系。

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