姜仁組合物聯(lián)合抗嘔吐作用研究

龍騰騰，吳李娜，郭春麗，徐翠梅，王鳴慧，岳 旺

(青島黃海學院護理與健康學院，山東 青島 266427)

嘔吐是常見于妊娠、胃腸道疾病、手術后、暈動癥、腦部疾病等的臨床癥狀，可導致脫水、營養(yǎng)不良、電解質(zhì)紊亂和代謝性酸中毒等不良反應，嚴重影響病人生存質(zhì)量[1]。目前臨床常用化學止嘔藥物毒副作用較大，如多巴胺拮抗劑、抗組胺藥、吩噻嗪類、抗膽堿能藥、抑制5-羥色胺(5-HT)類藥、NK1受體拮抗藥和激素類藥物[2-4]。中藥治療嘔吐歷史悠久，因其有著多組分、多靶點、綜合協(xié)同治療的特點和療效好、副作用小的優(yōu)勢，深受眾多醫(yī)藥研究者的關注。因此，開發(fā)新型、高效、低毒、多靶點的中藥止嘔藥物成為目前研究的熱點。

姜(ZingiberofficinaleRosc.)為“嘔家圣藥”，其中的活性成分姜辣素(Gingerols)已被證實為多靶點、天然低毒止吐藥[5]。砂仁(AmomumvillosumLour.)是我國重要的傳統(tǒng)中藥,《中華本草》中將砂仁列為上品，其味辛、性溫，入脾、胃、腎經(jīng)，主治脾胃虛寒、嘔吐泄瀉、妊娠惡阻、胎動不安、濕濁中阻[6]。另《玉揪藥解》中記載：砂仁和中調(diào)氣，嘔吐與泄瀉皆良。本試驗將兩味傳統(tǒng)止嘔藥物制成生姜與砂仁組合物(以下簡稱姜仁組合)，研究其聯(lián)合抗嘔吐的作用效果，以期為生姜與砂仁的高效利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物 健康成年雄性水貂，體重1.3～1.6 kg，購自青島特種養(yǎng)殖動物飼養(yǎng)中心。每只水貂單獨置于鐵籠中(75 cm×50 cm×50 cm)，24 h自然光照射，試驗前自由攝食和飲水。昆明系小鼠，體重(20±2)g，購自青島市藥檢所實驗動物中心。24 h自然光照射，試驗前自由攝食和飲水。

1.2 試劑 順鉑，購自山東齊魯制藥廠；硫酸銅，購自上海亨達化學制品公司；阿撲嗎啡，購自美國Sigma公司；鹽酸昂丹司瓊注射液，購自奧賽康制藥公司；生姜，購自山東平度；砂仁，購自青島眾生大藥房；均由山東省立醫(yī)院丁波醫(yī)師鑒定。

1.3 方法

1.3.1 姜仁組合和姜辣素樣品的制備 生姜砂仁水煎濃縮提取物的制備：取生姜、砂仁按照配伍比例為1∶1，浸泡于10倍量蒸餾水中1 h，于加石棉網(wǎng)的電爐上加熱煎煮1 h，絹布過濾，保存濾液，藥渣再加6倍蒸塯水，同法浸泡、煎煮、過濾，將2次濾液混合，加熱濃縮至小體積，超濾膜過濾，采用真空干燥箱70 ℃減壓干燥36 h得粉末，即為生姜砂仁水煎濃縮提取物。

姜辣素的制備[7]：生姜切成薄片，自然干燥后置于高速萬能粉碎機打成粉末，過30目篩，再將過篩細粉放入5 000 mL大磨口瓶中，以6倍量丙酮常溫下浸泡72 h；在40 ℃，40 kHz的超聲波頻率下超聲提取15 min；離心得到上清液，殘渣棄去；將上清液再減壓抽濾得濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮得姜油狀混合物，再將該混合物進行多次濃縮干燥純化得到姜辣素。

1.3.2 姜仁組合抗順鉑致嘔作用的研究 將水貂隨機分為4組(n=6)，分別為順鉑模型對照組、昂丹司瓊陽性藥物組、姜辣素組和姜仁組合組。分別給予生理鹽水、昂丹司瓊7.5 mg/(kg·bw)、姜辣素10 g/(kg·bw)(相當于含生藥量1 g)和姜仁組合10 g/(kg·bw)(相當于含生藥量1 g)作預處理。各組水貂均在預處理30 min后給予順鉑7.5 mg/(kg·bw),腹腔注射，觀察其在給藥后6 h內(nèi)的嘔吐反應，記錄其嘔吐潛伏期、干嘔次數(shù)及嘔吐次數(shù)。

1.3.3 姜仁組合抗硫酸銅致嘔作用的研究 將水貂隨機分為4組(n=6)：分別為硫酸銅模型對照組、昂丹司瓊陽性藥物組、姜辣素組和姜仁組合組。分別給予生理鹽水、昂丹司瓊7.5 mg/(kg·bw)、姜辣素10 g/(kg·bw)(相當于含生藥量1 g)和姜仁組合10 g/(kg·bw)(相當于含生藥量1 g)作預處理。30 min后各組水貂均按40 mg/(kg·bw)灌胃硫酸銅，觀察其在給藥后6 h內(nèi)的嘔吐反應，記錄其嘔吐潛伏期、干嘔次數(shù)及嘔吐次數(shù)。

1.3.4 姜仁組合抗阿撲嗎啡致嘔作用的研究 將水貂隨機分為4組(n=6)：分別為阿撲嗎啡模型對照組、昂丹司瓊陽性藥物組、姜辣素組和姜仁組合組。分別給予生理鹽水、昂丹司瓊7.5 mg/(kg·bw)、姜辣素10 g/(kg·bw)(相當于含生藥量1 g)和姜仁組合10 g/(kg·bw)(相當于含生藥量1 g)作預處理。30 min后各組水貂均給予阿撲嗎啡0.25 mg/(kg·bw)，腹腔注射，觀察其在給藥后6 h 內(nèi)的嘔吐反應，記錄其嘔吐潛伏期、干嘔次數(shù)及嘔吐次數(shù)。

1.3.5 急性毒性試驗 按國家藥品監(jiān)督管理局1999年11月12日頒布修訂的“中藥新藥研究技術要求”，對姜仁組合進行急性毒性試驗。因受藥物濃度及體積限制，無法測定LD50，故采用最大耐受量試驗。取雌雄各15只昆明系小鼠，給予姜仁組合1 g/mL，每只0.8 mL(小鼠的最大灌胃體積)，用藥后觀察小鼠飲食、糞便、活動狀態(tài)、呼吸、體重及死亡情況，連續(xù)觀察14 d，記錄相關數(shù)據(jù)[1]。

2 結(jié)果

2.1 姜仁組合抗順鉑致嘔作用的影響 如表1所示，與對照組相比，各治療組均能顯著延長順鉑所致嘔吐的潛伏期，降低致嘔率并減少干嘔及嘔吐次數(shù)(P<0.01)，其中姜仁組合抗順鉑致嘔作用效果在減少嘔吐次數(shù)方面優(yōu)于姜辣素組(P<0.05)，說明姜仁組合具有協(xié)同抗嘔作用。

表1 姜仁組合抗順鉑致嘔作用的影響

2.2 姜仁組合抗硫酸銅致嘔作用的影響 如表2所示，與對照組相比，各治療組均能顯著延長硫酸銅所致嘔吐的潛伏期，降低致嘔率并減少干嘔及嘔吐次數(shù)(P<0.01)，其中姜仁組合抗硫酸銅致嘔作用的潛伏期比姜辣素組明顯延長(P<0.01)，說明姜仁組合具有協(xié)同抗嘔作用趨勢。

表2 姜仁組合抗硫酸銅致嘔作用的影響

2.3 姜仁組合抗阿撲嗎啡致嘔作用的影響 如表3所示，與對照組相比，各治療組均能顯著延長阿撲嗎啡所致嘔吐的潛伏期，降低致嘔率并減少干嘔及嘔吐次數(shù)(P<0.01)，其中姜仁組合抗阿撲嗎啡致嘔作用的潛伏期比姜辣素組明顯延長(P<0.01)，說明姜仁組合具有協(xié)同抗嘔作用。

表3 姜仁組合抗阿撲嗎啡致嘔作用的影響

2.4 姜仁組合急性毒性試驗 各組小鼠給藥后均行為正常，生長良好，體重增加，未見死亡及明顯反應。連續(xù)觀察14 d后將小鼠處死，臟器及病理學觀察均未發(fā)現(xiàn)異常。試驗結(jié)果表明，口服最大劑量姜仁組合對動物無明顯損害，未發(fā)現(xiàn)機體產(chǎn)生毒副反應，是安全可靠的藥物。

3 討論

嘔吐反應是機體自身防御性反應，其進程分為3個階段：惡心、干嘔和嘔吐。嘔吐反應與機體前庭器官、外周和中樞神經(jīng)系統(tǒng)多種機制聯(lián)系密切。神經(jīng)遞質(zhì)及其受體在其中起著重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，組胺、多巴胺、阿片制劑、乙酰膽堿、5-HT、P物質(zhì)等神經(jīng)遞質(zhì)通過與相應受體結(jié)合均可引發(fā)嘔吐反應，目前臨床止嘔藥多為上述神經(jīng)遞質(zhì)受體拮抗劑，因其效果差、毒副作用大、價格昂貴等因素造成臨床應用受限，因此迫切需要開發(fā)價格低廉、毒副作用小、天然高效的抗嘔藥物。

順鉑是抗癌藥，常用可引起95%患者劇烈嘔吐，因順鉑是5-HT激動劑，一方面通過作用于胃腸道的感覺神經(jīng)和嗜鉻細胞釋放5-HT，作用于受體后傳入嘔吐中樞引起嘔吐；另一方面，可直接作用于延腦催吐化學感受區(qū)(CTZ)興奮嘔吐中樞引起嘔吐[8-9]。硫酸銅是外周性催吐劑,可刺激胃黏膜等感受器，反射性引起嘔吐。阿樸嗎啡是中樞性催吐劑，主要通過激動多巴胺受體刺激CTZ引起嘔吐[10]。本文使用3種經(jīng)典催吐工具藥成功造成水貂嘔吐模型，以期初步探討姜仁組合抗嘔的作用機理。

生姜止嘔作用機制前人已報道[11]，其止嘔活性主要成分為姜辣素，可通過抑制腸道嗜鉻細胞釋放致吐因子5-HT和P物質(zhì)，影響中樞和外周的5-HT和NK1等受體的功能，對抗硫酸銅和順鉑等所致嘔吐[12-15]。砂仁的化學成分主要有乙酸龍腦酯、樟腦、樟烯、檸檬烯、苦橙油醇、桉油精、芳樟醇等，具有化濕止嘔、溫脾止瀉、理氣安胎之功效。在其藥理學功效研究方面有抗?jié)儭⒖垢篂a、促進胃排空和胃腸推進運動、利膽、鎮(zhèn)痛、抗炎等報告[16]，在止嘔方面的研究鮮見報道。

中藥對嘔吐治療具有千年應用史，具有獨特的防治理論和治療優(yōu)勢，生姜和砂仁均為中藥常用藥物，毒性低，使用安全。本試驗通過不同作用機理的經(jīng)典催吐劑-順鉑、硫酸銅和阿樸嗎啡構(gòu)建3種嘔吐模型，證明姜仁組合可抑制中樞和外周嘔吐反應，為創(chuàng)制新型、天然、低毒、多靶點抗嘔吐中藥方劑打下試驗基礎，由于砂仁具有理氣安胎之特效，為妊娠嘔吐新藥的研制提供了理論依據(jù)。