血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平對嬰幼兒呼吸道合胞病毒毛細支氣管炎的診斷價值

謝祥紅，段 峰

毛細支氣管炎是嬰幼兒較為常見的下呼吸道感染性疾病之一，患兒臨床癥狀與肺炎類似，但主要表現為憋喘，甚至反復的喘息發作，可發展為哮喘[1]。引起毛細支氣管炎的主要病原體種類較多，病毒、細菌、支原體均可導致毛細支氣管炎，但超過80%的致病病原體為呼吸道合胞病毒(RSV)。

維生素D、IgE及IL-10與人體內免疫系統功能調節的相互作用近年來越來越受到關注，它們在嬰幼兒毛細支氣管炎的發生、發展過程中也發揮著重要的作用[2]。本研究通過分析血清25(OH)D3、IgE及IL-10的水平與嬰幼兒呼吸道合胞病毒毛細支氣管炎的相關性，旨在探討血清25(OH)D3、IgE及IL-10對呼吸道合胞病毒毛細支氣管炎的早期診斷價值，為臨床治療效果評估提供參考。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2018-06至2020-06我院收治的呼吸道合胞病毒毛細支氣管炎患兒220例作為病例組研究對象，年齡38 d～3歲，平均年齡(5.78±2.84)個月，平均年齡差異無統計學意義(t=1.456，P>0.05)。病例組女86例(39.09%)，男134例(60.91%)，性別構成差異無統計學意義(χ2=0.040，P>0.05)。病例的診斷標準參照《諸福棠實用兒科學》(第7版)[3]，臨床表現為喘息、咳嗽以及發熱、氣促,可聞及哮鳴音及濕性啰音，且鼻咽拭子直接免疫熒光法(DFA)法檢測RSV抗原陽性。同時選取同一時期至我院兒?？菩谐Ｒ庴w檢的健康嬰幼兒250例作為對照組。對照組嬰幼兒年齡30 d～3歲，平均年齡(6.11±2.05)個月，對照組女100例(40.00%)，男150例(60.00%)。病例組納入標準：(1)年齡范圍0～36月；(2)X線胸部正位片顯示支氣管周圍斑片狀陰影、存在炎癥征象；(3)雙肺聞及喘鳴音、可伴濕羅音。排除標準：(1)伴發其他感染性疾??；(2)合并原發性免疫缺陷或先天性肺部、心臟疾??；(3)最近一次呼吸道感染與本次感染間隔<30 d。根據《毛細支氣管炎診斷、治療與預防專家共識(2014年版)》[4]將病例組患兒分為輕度、中度及重度病變組。所有入組嬰幼兒均獲取了監護人知情同意，研究項目經本院倫理委員會審查通過。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集及檢測 采集病例組及對照組嬰幼兒入院當日空腹靜脈血6 ml，2 h內對樣本以3000 r/min離心15 min，將分離的血清置于-20 ℃冰箱保存待測。25(OH)D3、IgE及IL-10的檢測試劑盒均購自美國伯樂公司(Bio-rad)，按照試劑盒說明書進行實驗準備及操作，采用ELISA法檢測25(OH)D3、IgE， IL-10的檢測按照Bio-plex assays 試劑盒要求采用懸液芯片法。

1.2.2 分析方法 對病例組及對照組進行血清25(OH)D3、IgE及IL-10的水平差異比較，同時比較不同病情嚴重程度患兒三項指標的差異及相關性。

2 結 果

2.1 病例組與對照組血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平 病例組與對照組相比較，病例組血清25(OH)D3水平低于對照組，而IgE及IL-10表達水平高于對照組(P<0.001，表1)。

表1 兩組嬰幼兒呼吸道病毒毛細支氣管炎患者血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平

2.2 不同病情患兒血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平的差異 25(OH)D3水平重度組低于中度組及輕度組，而IgE及IL-10重度組高于中度組及輕度組(P<0.001)。見表2。

表2 不同病情嬰幼兒呼吸道病毒毛細支氣管炎患者血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平的差異

2.3 不同病情患兒血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平的相關性 患兒血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平與病情程度均存在相關性，25(OH)D3與病情嚴重程度呈負相關，IgE及IL-10與病情嚴重程度呈正相關(P<0.05，表3)。

表3 不同病情嬰幼兒呼吸道病毒毛細支氣管炎患者血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平的相關性

3 討 論

RSV是導致嬰幼兒發生急性下呼吸道感染最為常見的病原體[5]，好發于2.5歲以下的嬰幼兒，患者多為1歲以內的嬰兒，尤其以6個月以內嬰兒更為常見。患兒臨床癥狀與肺炎類似，但主要表現為憋喘，甚至反復的喘息發作，可發展為哮喘[6]，嚴重者可發展為呼吸衰竭或心力衰竭，甚至有部分毛細支氣管炎患兒會進展為哮喘凹，嚴重威脅著嬰幼兒的生命健康。引起毛細支氣管炎的主要病原體種類較多，病毒、細菌、支原體均可導致毛細支氣管炎，但超過80%的致病病原體為呼吸道合胞病毒(RSV)。RSV的流行無明顯季節性，全年均可發生流行，并且目前全球針對RSV的感染尚無有效的疫苗及特效藥。因此RSV感染后發生的毛細支氣管炎，尋找適合的血清學指標，能夠對疾病早期診斷、治療效果的評估起到重要的作用。

近年來，隨著對維生素D的研究不斷深入，其參與免疫調節級炎性反應及修復的病理生理過程也逐漸得到了認識[7]。25 (OH)2D3是人體內維生素D的主要活性形式，能夠穩定地存在于血液循環當中，能夠間接、真實地反映人體內維生素D的水平[8]，是衡量人體維生素D水平的重要指標[9]。既往已有研究顯示，維生素D水平與肺結核、支氣管哮喘等多種呼吸道感染性疾病有關，并與感染嚴重程度相關[10]。而補充維生素D，則可以降低病毒感染風險，提高病毒感染的免疫應答效果，控制炎癥反應[11，12]。在對嬰幼兒毛細支氣管炎的臨床研究中也發現，輔助維生素D進行治療后，患兒病程明顯縮短[13]。IgE屬于分泌型的免疫球蛋白，由人體呼吸道固有層的漿細胞產生，能夠介導Ⅰ型變態反應[14]。人體在感染RSV后，可通過多種途徑刺激B淋巴細胞產生特異性抗體，從而導致IgE水平升高。既往已有研究表明，RSV感染所致的毛細支氣管炎與下呼吸道過度的免疫反應有關，其主要機制與Th1/Th2型細胞因子、促炎/抗炎細胞因子之間的平衡變化有關[15]。IL-10屬于抑制性的細胞因子，能夠發揮抑制急性炎性反應、調節免疫反應平衡的作用[16，17]。

本研究結果顯示病例組及對照組之間血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平存在明顯差異，毛細支氣管炎患兒血清25(OH)D3低于對照，而IgE及IL-10高于對照。同時對不同病情嚴重程度患兒比較后發現，病情嚴重程度與血清25(OH)D3負相關，與IgE及IL-10表達水平正相關。提示血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平能夠反映毛細支氣管炎的患病及病情嚴重程度，結論與國內外同類研究較為一致，且IL-10表達水平的相關系數高于同類研究報道結果[18-19]。其機制可能與患兒本身體內較低的維生素D水平導致免疫力下降，更容易發生感染有關。有研究發現，缺乏維生素D可降低Toll 樣受體介導的防御素、抗菌肽LL-37的表達，導致呼吸道抵抗力降低[20]。同時，維生素D的缺乏可通過影響呼吸道黏膜上皮細胞的分化以及影響呼吸道纖連蛋白等因素，從而影響呼吸道的屏障作用，降低呼吸道分泌及清除的能力，同時可導致氣道高反應[21]。此外，維生素D還能夠通過影響B細胞的增殖及分化，從而影響體液免疫功能，影響抗體的生成[22]?；純焊腥綬SV后，通過各種途徑刺激B細胞的增殖、分化及成熟，從而產生IgE，促進IgE的分泌。通常嬰幼兒重癥的感染與Th2反應增強有關[23]，患兒IL-10表達水平升高，其機制可能與IL-10影響Th1/Th2的免疫平衡，降低免疫損傷的保護機制有關。

總之，血清25(OH)D3、IgE及IL-10表達水平與嬰幼兒RSV所致的毛細支氣管炎有關，能夠反映感染的發生及發展情況，對于協助早期診斷、評估病情發展及治療效果具有實際意義。