淺談現(xiàn)代分析方法和技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用

摘?要：講解了藥物分析的方法，包括色譜法、光譜法等檢測(cè)方法的應(yīng)用過程，對(duì)于藥物分析進(jìn)行原理和適用范圍的分析。對(duì)這些檢測(cè)方法進(jìn)行了比較和分析，對(duì)近年來進(jìn)行的教學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了總結(jié)分析。

關(guān)鍵詞：現(xiàn)代分析方法;藥物分析;應(yīng)用

一、 引言

為了對(duì)藥品進(jìn)行全面質(zhì)量管理要進(jìn)行藥物分析，藥物分析可以提高藥物質(zhì)量，還可以用于研發(fā)新藥，分析藥品的療效性能。近年來我國(guó)對(duì)藥物的質(zhì)量要求很高，為了響應(yīng)國(guó)家的要求，就要采取色譜分析和光譜分析的方法，對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)。

二、?色譜法的應(yīng)用

色譜法是一個(gè)俄國(guó)科學(xué)家發(fā)明的，這個(gè)方法簡(jiǎn)單說是這樣的，色譜柱里面的固定相是碳酸鈣，用石油醚作為流動(dòng)相進(jìn)行脫洗，植物色素就可以得到分離。這種方法歷經(jīng)了一百年的時(shí)間，現(xiàn)在這個(gè)技術(shù)已經(jīng)日臻成熟起來。而且衍生出很多比較快捷的檢測(cè)方法，比如高效液相色譜等方法。目前這種檢測(cè)技術(shù)正在向自動(dòng)化智能化方向發(fā)展，近年來開發(fā)出很多具有特色的新的藥物分析方法。

（一）高效液相色譜法

這種檢測(cè)方法目前在藥物分析中運(yùn)用的比較廣泛，可以在不同化合物中進(jìn)行分離分析實(shí)驗(yàn)。高效液相色譜法使用液體進(jìn)行流動(dòng)相分析，它的檢測(cè)過程是這樣的：溶劑瓶中的實(shí)驗(yàn)液體在高壓泵的作用下抽到取樣瓶，然后流過色譜柱和檢測(cè)器最后排出。樣品注入以后和流動(dòng)相一起加注到色譜柱，樣品中待檢測(cè)的藥物和色譜柱中的填料會(huì)發(fā)生很多化學(xué)反應(yīng)，然后隨著流動(dòng)相排出色譜柱。流過檢測(cè)器以后檢測(cè)的信息儲(chǔ)存在記錄器中。高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱，對(duì)供試品進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。注入的供試品，由流動(dòng)相帶入色譜柱內(nèi)，各組分在柱內(nèi)被分離，并進(jìn)入檢測(cè)器，由積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和處理色譜信號(hào)。高效液相色譜法衍生出了很多有效的分析方式。

1. 超高效液相色譜

這種超高效的檢測(cè)方法采用跟以往一樣的分離方式，按照速率理論分析得到的結(jié)論是，色譜的分離度不會(huì)隨著填料顆粒變大而提高。如果填料顆粒很小的話，會(huì)產(chǎn)生更大的理論效應(yīng)。UPL可以通過填料顆粒的大小來控制實(shí)驗(yàn)效果，這樣就可以提高流速得到更快的分析速度。

采取UPL方法可以對(duì)丹參注射劑中的很多化學(xué)成分同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，而且效果良好速度快捷精密度和回收率都比較精確。在對(duì)西洋參的人參皂甙分析中也采用了UPL分析方法，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是西洋參的人參皂甙中的幾個(gè)主要成分短時(shí)間內(nèi)就被分解離，很快就完成了含量檢測(cè)。為了提高檢測(cè)效果縮短了分離速度，減少了溶劑消耗。因此這種UPL檢測(cè)方法較之傳統(tǒng)的檢測(cè)方式，有很好的效果，檢測(cè)速度也大為提高。

這種UPL檢測(cè)方法檢測(cè)效果比較理想，但是它的工作環(huán)境比較特殊，必須在超高的壓力下才能工作，因此要求儀器的體積不能超過一定的范圍，還要求儀器必須具備很高的檢測(cè)能力，因此在檢測(cè)中對(duì)于小顆粒色譜柱的檢測(cè)有很大的難度。

2. 反相高校液相色譜法

這種反相和正相色譜的區(qū)別是，流動(dòng)相和固定相的極性有一定的區(qū)別，固定相是非極性的，流動(dòng)相是有極性的。流動(dòng)相利用水溶的有機(jī)溶劑增加保留時(shí)間，為了對(duì)藥物進(jìn)行精確的分析采取了穩(wěn)定的分離方法。

由于材料的發(fā)展HPL的分析應(yīng)用范圍也得到了擴(kuò)大，現(xiàn)在這種檢驗(yàn)方式已經(jīng)在藥品檢驗(yàn)中廣為利用起來。檢測(cè)樣品在檢測(cè)的過程中會(huì)發(fā)生解析現(xiàn)象，因此要采用緩沖液進(jìn)行控制。但是PH值太高會(huì)導(dǎo)致硅膠溶解，太低也不好會(huì)造成烷基脫落。

（二）毛細(xì)管氣相色譜法

這種技術(shù)有半個(gè)世紀(jì)的發(fā)展歷史了，它的應(yīng)用非常廣泛，在操作中技術(shù)也非常成熟。毛細(xì)管柱由于采取的是空心柱，這一點(diǎn)和填充柱有很大的區(qū)別。管柱的內(nèi)壁上固化上固定液相，管柱有很好的滲透效果，只需要很少的固定液，所以具有柱效高吸附小的特點(diǎn)，而且流失少分離溫度低。

此外CG法內(nèi)標(biāo)法還有頂空氣相色譜法，都是近年來比較流行的藥物分析方法，在具體的應(yīng)用中都取得了很好的效果。

氣相色譜法在藥物分析中也存在一些問題，由于樣品不純就不能對(duì)樣品進(jìn)行定性的分析，因此必須和其他的儀器進(jìn)行配合才能正常使用。對(duì)于一些腐蝕性大沸點(diǎn)高很難控制的物質(zhì)，氣相色譜分析法就顯得無(wú)能為力了。

（三）毛細(xì)管電色譜法

這是一種近年來發(fā)展起來的一種比較先進(jìn)的檢測(cè)方法。它采取了目前最先進(jìn)的分離技術(shù)，綜合了其他檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)發(fā)展起來的一種方法。CDC采取了石英毛細(xì)管進(jìn)行柱內(nèi)填充，用高壓直流電取代了高壓泵。溶質(zhì)由于在流動(dòng)相和固定相中的系數(shù)不同產(chǎn)生了分離，進(jìn)行檢測(cè)的物質(zhì)在流動(dòng)中產(chǎn)生了電荷，它的分配方式類似于化合物，自身的差異也會(huì)影響其物質(zhì)分離。

CDC具有高效、高選擇、高分辨率的特點(diǎn)，消耗的樣品少，可以廣泛應(yīng)用于各種藥物檢測(cè)，目前這種檢測(cè)方法得到了普遍應(yīng)用。電色譜分離的重要環(huán)節(jié)是電色譜柱，毛細(xì)管電色譜柱根據(jù)其表現(xiàn)形式，可以分成填充型、開放型和連續(xù)型等很多種類。整體柱的制作比較簡(jiǎn)單，因此很有發(fā)展前途，在具體的應(yīng)用中要提高它的實(shí)用價(jià)值。毛細(xì)管硅膠柱采用了溶膠凝膠等高科技手段，采用了國(guó)產(chǎn)的抗生素對(duì)整體柱進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，由于反相色譜的作用很多結(jié)構(gòu)類型不同的藥物取得了分離效果。對(duì)于CDC來說電壓在物質(zhì)分離中起到了決定性作用，它對(duì)于溶質(zhì)的保留和分離都會(huì)起到重要作用。

在進(jìn)行藥物分析中，CDC可以分離與藥物相關(guān)的雜質(zhì)，把中性藥物和化合物進(jìn)行分離。毛細(xì)管電色譜技術(shù)在應(yīng)用中的到了發(fā)展和完善，因此在很多領(lǐng)域中都發(fā)揮了重要作用。

（四）超臨界流體色譜法

這是一種采取超臨界流體作為流動(dòng)相的分析技術(shù)。它采取了溫度和壓力都高于臨界值的流體，是一種液化的氣體。通過控制壓力來對(duì)流動(dòng)相的密度進(jìn)行控制，這種方法可以完成其他的檢測(cè)方法所不能進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，超臨界流體是一種物質(zhì)狀態(tài)，具有對(duì)于色譜分離及其有利的物理性質(zhì)，通過調(diào)節(jié)溫度、壓力以改變流體的密度優(yōu)化分離效果。對(duì)于高溫度低揮發(fā)的實(shí)驗(yàn)有很好的效果，對(duì)于難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性和相對(duì)分子質(zhì)量大的物質(zhì)，在較低的溫度下能有很好的分離效果。因此對(duì)于分析氨基酸和糖類效果非常理想。

這種方法可以彌補(bǔ)其他的檢測(cè)方法的不足，但是檢測(cè)和分析速度不是很理想，而且它無(wú)法分離一些強(qiáng)極性和吸附性的物質(zhì)。

三、?藥物現(xiàn)代光譜法

光譜法是一種利用電磁輻射和物質(zhì)發(fā)生作用來進(jìn)行檢測(cè)的方法，主要包括原子吸收法、發(fā)射法磁共振和質(zhì)譜法等很多方法。在藥物的研發(fā)過程中，必須對(duì)原材料進(jìn)行紫外光譜、紅外光譜以及核磁共振和X光的數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析。為了保證藥物的質(zhì)量，要進(jìn)行紫外光、紅外光的藥物鑒別檢測(cè)，來確定藥物的劑量。

以原子吸收光譜法為例，這是一種基于氣態(tài)和固態(tài)原子核外層電子對(duì)共振發(fā)射線的吸收進(jìn)行定性分析的方法，這種方法有選擇好靈敏度高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)過研究表明無(wú)機(jī)元素和中成藥的關(guān)系密切，這種方法就可以很準(zhǔn)確的檢測(cè)無(wú)機(jī)元素的含量，對(duì)于中成藥的質(zhì)量檢測(cè)起到了很大的作用。采用原子吸收光譜法對(duì)補(bǔ)血草進(jìn)行了金屬元素的檢測(cè)，對(duì)于研發(fā)補(bǔ)血草的藥用價(jià)值起到了很重要的作用。

四、?色譜和質(zhì)譜的聯(lián)用技術(shù)

色譜和質(zhì)譜的聯(lián)用方式可以利用高效分離的效果，對(duì)測(cè)試對(duì)象進(jìn)行高效分離，從而可以發(fā)揮質(zhì)譜的高靈敏度的作用。

（一）高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用

這種色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，可以發(fā)揮各自的特點(diǎn)所以分離效果好靈敏度高，對(duì)于結(jié)構(gòu)分析可以達(dá)到很理想的效果，因此在藥物的質(zhì)量檢測(cè)中發(fā)揮了很重要的作用。

比如在采用鹽酸洛哌丁胺為內(nèi)標(biāo)，進(jìn)行血漿濃度檢測(cè)中，可以達(dá)到快速靈敏的效果。通過對(duì)犬血漿鈦化合物的檢測(cè)，可以進(jìn)行臨床的藥物效果實(shí)驗(yàn)。

（二）氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用方法

這種聯(lián)用方式是充分發(fā)揮兩種方法的優(yōu)點(diǎn)，可以使待測(cè)樣品進(jìn)行同時(shí)的分離和檢測(cè)，因此具有速度快、靈敏度高的特點(diǎn)。由于定性分析非常準(zhǔn)確，可以應(yīng)用在藥物代謝痕跡的分析領(lǐng)域中。

五、 結(jié)語(yǔ)

通過對(duì)色譜和光譜分析藥品質(zhì)量的研究，可以看到在對(duì)藥品進(jìn)行質(zhì)量控制和數(shù)據(jù)分析中，色譜分析和光譜分析是必不可少的檢測(cè)分析方式，在藥物分析和質(zhì)量控制中發(fā)揮了重要作用。在新藥研發(fā)和質(zhì)量控制中，色譜和光譜聯(lián)合應(yīng)用的前景非常廣泛，因此在教學(xué)實(shí)驗(yàn)中要對(duì)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行優(yōu)化，完善教學(xué)的考核制度。

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作者簡(jiǎn)介：王詩(shī)琴，通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)（上海）有限公司。