湖北荊門地區2698例女性HPV感染情況及基因分型調查研究

周 成，柴艷梅，陳 蓉，黃文峰

湖北省荊門市第二人民醫院(荊門 448000)

宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤，發病率較高，在全球女性惡性腫瘤病死率中排第2位，每年新增病例超過50萬例，其中發展中國家占比超過80%[1]。研究表明人乳頭狀瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)的持續性感染與宮頸病變密切相關[2]。HPV是一類特異感染人類上皮、黏膜的微小共價雙鏈環狀DNA病毒[3]，至今發現有200多種，其中約40種與生殖道感染相關，根據其致病性的強弱，可分為高危型HPV和低危型HPV兩種[4]。其中高危型HPV持續感染是宮頸癌發生的必要條件[5]，因此高危型HPV的檢測，是宮頸癌初期篩查的重要手段。本研究通過對荊門市第二人民醫院就診患者HPV感染情況、型別分布以及感染情況與年齡的相關性進行分析，為荊門地區宮頸癌篩查及預防工作提供參考。

對象與方法

1 研究對象 收集2017年1月至2019年6月在荊門市第二人民醫院婦科門診、住院和體檢的2698例女性的宮頸脫落細胞標本進行回顧性分析。病例納入標準：①年齡17歲以上；②已婚或有性生活史1年以上。排除標準:①妊娠期及哺乳期婦女；②有宮頸錐切及子宮切除史；③有免疫性疾病及口服免疫抑制劑史；④檢查前3 d有陰道用藥或陰道沖洗，24 h內有性生活等；⑤心功能不全及肝、腎功能障礙者；⑥高血壓、糖尿病等慢性疾病者；⑦惡性腫瘤者等。患者年齡17～85歲，平均(40.9±10.2)歲。本研究獲得荊門市第二人民醫院倫理委員會批準。

2 研究方法 對所有的宮頸脫落細胞標本采用醫用核酸分子雜交系統HHM-2及配套的HPV21分型檢測試劑盒(PCR+膜雜交法)(潮州凱普生物化學有限公司)進行HPV分型檢測，具體操作嚴格按照說明書進行，包括擴增試劑準備、樣本DNA提取、PCR擴增、導流雜交和酶標顯色。宮頸液基細胞學檢查方法(TCT)診斷標準采用2001年TBS(The 2001 Bethesda System)分級系統進行細胞學診斷[6]。

3 觀察指標及評價標準 以各個型別HPV陽性例數占檢測總例數的百分比為各型別HPV的感染率。HPV型別及高低危劃分參考2015年CFDA發布的《人乳頭瘤病毒(HPV)核酸檢測及基因分型試劑技術審查指導原則》。本研究包含15種高危型HPV：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68；6種低危型HPV：6、11、42、43、44、CP8304(81)。以劃分的每個年齡段內HPV陽性總例數占檢測總例數的百分比統計不同年齡段HPV感染的陽性率。陽性結果成立條件：雜交膜條上的Biotin對照顯色、同時HPV雜交點也顯色，檢測結果陽性點為清晰可見的藍紫色圓點。任何一種HPV亞型陽性為HPV感染，兩種或以上HPV亞型陽性為多重感染，多重感染重復計算。

4 統計學方法 運用PEMS 3.0統計學軟件進行統計分析，計數資料采用百分率(%)表示，比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 HPV感染率及基因型分布情況 2698例標本HPV總陽性率為27.58%(744/2698)，高危型HPV感染率為23.98%(647/2698)，低危型HPV感染率為3.60%(97/2698)。高危型HPV陽性人群以52型、16型、58型、39型、53型、51型最多，占總例數百分比依次為4.74%(128/2698)、4.04%(109/2698)、3.48%(94/2698)、2.22%(60/2698)、1.96%(53/2698)、1.67%(45/2698)，6種型別占總例數的百分比為18.12%(489/2698)。見表1。

2 不同年齡段HPV感染情況 將2698例標本按年齡分為≤25歲、26～35歲、36～45歲、46～55歲、>55歲5個組。各年齡段HPV陽性率依次為28.35%(36/127)、18.96%(142/749)、18.42%(165/896)、22.40%(164/732)、31.44%(61/194)。≤25歲組HPV陽性率高于26～35歲、36～45歲組，且差異有統計學意義(χ2=5.991，P<0.05；χ2=6.949，P<0.01)，但與46～55歲、>55歲組陽性率之間比較無統計學差異(χ2=2.139，P>0.05；χ2=0.349，P>0.05)。 26～35歲組HPV陽性率與36～45歲、46～55歲比較無統計學差異(χ2=0.079，P>0.05；χ2=2.681，P>0.05)，但顯著低于>55歲組HPV陽性率(χ2=14.221，P<0.01)。36～45歲、46～55歲、>55歲HPV陽性率隨年齡增長呈遞增趨勢，且兩兩之間比較均具有統計學差異(均P<0.05)。見表2。

表1 宮頸感染HPV基因型分布

表2 不同年齡段HPV感染率[例(%)]

3 不同程度宮頸病變HPV亞型感染情況 在744例HPV陽性患者中，正常/炎癥組、ASCUS/LSIL組、HSIL/宮頸癌組分別為519例、194例、31例。ASCUS/LSIL組高危HPV感染率為87.32%，HSIL/宮頸癌組的高危HPV感染率為93.55%，兩組比較，差異有統計學意義(χ2=4.328，P<0.05)。正常/炎癥組前3位HPV基因型依次為HPV-52、58、16；ASCUS/LSIL組前3位HPV基因型依次為HPV-16、52、58：HSIL/宮頸癌組前3位HPV基因型依次為HPV-16、18、52、58。HSIL/宮頸癌組的HPV-16感染率高于ASCUS/LSIL組，差異有統計學意義(χ2=4.146，P<0.01)。見表3。

表3 不同程度宮頸病變HPV亞型感染情況[例(%)]

討 論

宮頸癌是嚴重危害婦女健康的第二大常見癌癥，我國宮頸癌的發病率以每年2%～3%的速度遞增[7]。目前已有至少15種HPV基因型被確認為宮頸癌的高危型別[8]，HPV分型作為宮頸癌前病變早期篩查的檢測技術是有效降低宮頸癌發病率的措施。HPV的感染率和型別呈現較為明顯的地域性差異[9]。2015年以來，湖北省各地區HPV感染率和型別的相關研究結果顯示，武漢地區陽性率為17.47%(1732/9915)，主要型別為52型、16型、58型[10]；襄陽地區陽性率為28.80%(714/2479)，主要型別為45型、58型[11]；十堰地區陽性率為9.17%(783/8543)，主要型別52型、16型、58型[12]；黃石地區陽性率為43.92%(1163/2648)，主要型別為52型、16型、58型[13]；秭歸地區陽性率為12.60%(373/2960)，主要型別為16型、52型、6型[14]。本次研究結果顯示荊門地區HPV陽性率為27.58%，排在前3位的為52型、16型、58型與武漢、十堰、黃石地區的型別一致，與襄陽的45型、58型以及秭歸地區的16型、52型、6型存在差異[11-14]。HPV的感染可能受地域、文化、經濟等多個因素的影響。僅針對高危型16型及18型的二價疫苗和針對高危型16型、18型及低危型6型、11型的四價疫苗能否有效預防荊門地區大部分人群的感染，仍有待考察，對于52型和58型的高感染率不能忽視，這在荊門地區HPV疫苗的引進選擇上具有重要的參考意義。

HPV感染在不同年齡段人群中存在差異[15]。荊門地區HPV感染率和年齡曲線呈“U”型，以>55歲年齡組感染率最高，為31.44%，≤25歲次之為28.35%。這與李霓等[16]2008年關于中國婦女HPV感染的年齡分布特點，中國地區HPV感染各年齡組感染率均保持較高水平，尤其中年組(36～55歲)的研究結論有出入。這一結果與近期十堰地區[12]、黔北地區[17]、滇東北地區[18]HPV感染率的年齡分布特點相同。造成HPV感染率和年齡曲線發生變化的原因值得進一步研究，但荊門地區HPV感染率和年齡曲線呈“U”型特點的原因可能為：≤25歲的年輕女性可能因為更頻繁的性接觸，不良生活習慣如大量飲酒、長期熬夜、口服避孕藥等，使免疫系統減弱而使體內HPV復制增加[19]，26～35歲與36～45歲之間的女性HPV感染率最低，主要是由于該群體機體免疫好，自我保健意識較強有關，而46～55歲和>55歲大齡女性可能隨著年齡增長，尤其絕經后免疫能力降低[20]，缺乏雌激素保護，抑制和清除病毒的能力持續減弱[21]，導致HPV持續感染。因此結果提示，荊門地區應該加強≤25歲人群的HPV檢測和>55歲人群的宮頸癌篩查。

綜上所述，荊門地區女性HPV感染的常見亞型依次為52型、16型、58型、39型、53型、51型，≤25歲和>55歲年齡段女性較易感。建議在荊門地區年輕女性中積極開展HPV檢測，倡導女性定期做好宮頸癌篩查。