抗磷脂抗體綜合征與不明原因習慣性流產的相關性分析

李智全

(濮陽市人民醫院 血研所，河南 濮陽 457000)

流產為妊娠期常見并發癥之一，特別是不明原因習慣性流產，每次流產往往發生于同一妊娠月份，且流產過程與一般流產過程相同。資料顯示，不明原因習慣性流產患者體內多分離出自身抗體，以抗磷脂抗體(antiphospholipid antibody，APA)居多[1]。APA常見抗體類型為抗心磷脂抗體(anticardiolipin antidody，ACA)，其表達與多種疾病有關，如深靜脈血栓、視網膜血栓、肺栓塞、胎盤栓塞，同時可導致產婦出現一系列病理妊娠現象，如死胎、早產、習慣性流產[2]。另有研究表明，APA是導致抗磷脂抗體綜合征患者病理妊娠、血栓形成的危險因素[3]。本研究通過檢測不明原因習慣性流產孕婦和健康孕婦ACA抗體的表達情況，旨在分析ACA表達與流產的相關性，為臨床確定合理治療方案提供指導信息。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016年11月至2018年12月濮陽市人民醫院收治的71例不明原因習慣性流產孕婦作為習慣性流產組：年齡19～35歲，平均(27.02±2.67)歲；孕周6～11周，平均(8.56±0.82)周；流產次數為2次25例，3次29例，4次17例；體質量指數(body mass index，BMI)19～26 kg·m-2，平均(22.71±1.33)kg·m-2。納入65例同期健康孕婦作為對照組：年齡20～35歲，平均(27.51±2.13)歲；經產婦20例，初產婦45例；孕周6～12周，平均(8.60±0.75)周；BMI 20～26 kg·m-2，平均(23.02±1.11)kg·m-2。對照組和習慣性流產組年齡、流產時孕周、BMI一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。 本研究經濮陽市人民醫院醫學倫理委員會審核通過。

1.2 選取標準

1.2.1納入標準 (1)習慣性流產組符合《婦產科學》不明原因習慣性流產診斷標準[4]：夫婦雙方染色體核型正常，自身免疫抗體(抗核抗體、APA)陰性，男方精液常規檢查正常，封閉抗體陰性。(2)對照組：B超顯示宮內妊娠，胎心搏動，無死流產、死胎史。

1.2.2排除標準 (1)遺傳、解剖、感染及內分泌等因素所致流產；(2)重要器官器質性病變；(3)嚴重妊娠合并癥；(4)近期參與類似試驗；(5)依從性差，無法配合研究。

1.3 檢測方法于清晨采集患者空腹肘靜脈血5 mL，進行ACA-IgM、ACA-IgG、ACA-IgA檢測，按加樣方案向相應微孔分別加100 μL校準品、陽性對照、陰性對照，室溫(18～25 ℃)溫育30 min；倒掉微孔板內液體，用稀釋后的清洗緩沖液3次，每次300 μL，用稀釋后清洗緩沖液清洗3次，每次450 μL，將TECAN洗衣板設置為“Overflow Modus”，清洗時注意緩沖液在微孔中至少保留40 s，之后倒掉，清洗后將微孔板倒置在吸水紙上拍打，去除殘存清洗液，注意清洗后遺留在微孔中殘液可干擾底物反應，從而降低吸光度值，而清洗不充分可能會導致吸光度值偏高，滴加100 μL酶結合物至每一微孔，室溫溫育30 min，倒掉微孔板內液體；滴加100 μL色原/底物液至每一微孔，室溫避光溫育15 min，以與加色原/底物液相同速度、順序滴加100 μL終止液至每一微孔，在450 nm下比色，參考波長620～650 nm，加完終止液后30 min內比色，凡樣品孔OD值>陰性對照孔均數2倍即為陽性。上海酶聯生物科技有限公司提供所用試劑和試劑盒，完全參照試劑盒說明書操作。

1.4 妊娠結局妊娠結局分為保胎成功和保胎失敗。保胎成功：先兆流產癥狀(腰酸、陰道流血、腹墜、腰痛)基本消失，妊娠繼續；孕10周及以上行彩超檢查胎兒大小與孕周基本符合，胎心搏動正常。保胎失敗：血清β-人絨毛膜促性腺激素水平持續降低，臨床無繼續保胎意義；彩超顯示胚胎或妊娠囊畸形，或孕7周后未見胎心搏動，1周后復查仍未見者，或先兆流產發展成不全流產、難免流產。

1.5 觀察指標(1)對照組和習慣性流產組ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG陽性表達率。(2)隨訪所有患者至妊娠12周，統計不同妊娠結局患者ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表達陽性率。(3)ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表達陽性率與不明原因習慣性流產關系。(4)ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表達陽性率與不明原因習慣性流產患者妊娠結局關系。

1.6 統計學方法通過SPSS 22.0統計軟件處理數據。采用χ2檢驗比較組間ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表達陽性率；采用Spearman相關性分析、logistic回歸分析ACA表達與不明原因習慣性流產及其妊娠結局的關系。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對照組和習慣性流產組ACA表達情況習慣性流產組ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表達陽性率高于對照組(P<0.001)。見表1。

表1 對照組和習慣性流產組ACA表達情況比較[n(%)]

2.2 習慣性流產組不同妊娠結局患者ACA表達情況習慣性流產組保胎成功患者ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM表達陽性率低于保胎失敗患者(P<0.05)。見表2。

表2 習慣性流產組不同妊娠結局患者ACA表達 情況[n(%)]

2.3 ACA表達與不明原因習慣性流產的關系logistic回歸分析顯示，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM是不明原因習慣性流產的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 ACA表達與不明原因習慣性流產的關系

2.4 ACA表達與妊娠結局的關系Spearman相關性分析顯示，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM與妊娠結局呈負相關(P<0.001)。見表4。

表4 ACA表達與妊娠結局的關系

3 討論

不明原因習慣性流產病因包含遺傳、內分泌、解剖、免疫等因素，其中免疫因素占40%～60%[5]。可能與母胎之間存在免疫失衡，發生免疫排斥，使得胎兒同種異位移植失敗有關。在尋找不明原因習慣性流產患者的免疫因素時，ACA逐漸引起了關注。

相關研究指出，ACA是導致不明原因習慣性流產的主要免疫因素[6]。關于ACA引起流產原因尚無明確、統一機制，部分研究認為與前列腺素抑制說有關，當機體受到損傷時，ACA可結合血管內皮細胞產生抗原-抗體反應，抑制血管內皮細胞合成前列腺素，促進血栓形成，同時ACA損傷血管內皮細胞后，可減少致活物質，降低纖溶活性，增加血栓傾向，且可誘發凝血物質黏附、部分凝血因子活化，增加血栓傾向[7-8]。在此背景下，本研究選取ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG等相關指標，經對比分析發現，習慣性流產組ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表達陽性率高于對照組，與夏書琴等[9]研究結果一致。logistic回歸分析顯示，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM與不明原因習慣性流產有關。由此可見，ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表達升高可引起較強抗原抗體反應，增加流產風險。

此外，本研究結果還顯示，習慣性流產組保胎成功患者ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM表達陽性率低于保胎失敗患者，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM與妊娠結局呈負相關，該結果提示ACA表達與不明原因習慣性流產患者妊娠結局密切相關。考慮原因可能與以下幾方面有關：(1)ACA可與胎盤血管的磷脂受體發生作用，減少胎盤部分血液，導致胎盤缺血，從而誘發胎兒死亡并流產；(2)ACA可吸附滋養層磷脂，致使抗原無法得到足夠吸附分化，抑制胚胎順利著床，導致保胎失敗；(3)ACA可直接結合滋養細胞，影響滋養細胞功能，導致胚胎無法順利著床，從而引發流產；(4)ACA可誘發胎盤血管炎癥反應，造成胎盤無法及時、足量提供氧氣及營養物質，無法供胎兒生長發育，出現胎死宮內[10]。

綜上，不明原因習慣性流產患者ACA呈高表達，與妊娠結局密切相關，可為臨床明確病因、制定干預方案提供參考，值得臨床推廣及應用。