長柄側耳發酵液對小鼠肝臟組織抗氧化能力的試驗分析*

蔣 鳴

（江蘇醫藥職業學院藥學院，江蘇 鹽城 224500）

長柄側耳（Pleurotus spodoleucas） 屬于傘菌目（Agaricales） 側耳科（Pleurotaceae） 側耳屬（Pleurotus），包含人體所需的基本營養元素和氨基酸等成分，人們在食用后其抗氧化作用可以顯著提升機體對其他營養物質的吸收，在抵抗腫瘤方面同樣具有顯著的效果[1]。

側耳屬的大多數食用菌質地較好，味道可口，營養價值出眾，具有良好的開發潛力。為了進一步探究長柄側耳在免疫力增強和肝臟組織保護方面的功能，本次研究以食用菌發酵后獲取的液體作為研究基礎，以長柄側耳菌種發酵作為研究切入點，探究其對于高膽固醇、高含量甘油三酯的預防作用，以便為今后的科學應用提供基礎資料。

1 試驗方法

1.1 試驗材料

本次研究所選擇的試劑材料包括長柄側耳菌株、尿素氮、試劑盒、乙醇等。另外本次研究中的30只雄性小鼠全部購于四川大學醫學院，平均體重約30 g。液體培養基由2.00%葡萄糖、1.00%蛋白胨、1.00%酵母浸粉和0.05%硫酸鎂組成。研究所用設備包括離心機、超微粉碎機、電熱水浴鍋、小鼠飼養籠、小鼠游泳池、旋轉蒸發儀等。

1.2 試驗步驟

1） 試驗內容

在錐形瓶中裝入液體培養基，高溫滅菌并接種長柄側耳菌株后，在30℃培養箱中得到液體菌種。將液體菌種于200 r·min-1的培養箱中培養5 d，過濾后獲取長柄側耳菌株發酵液。

選擇30只健康雄性小白鼠，將其中20只按照服用劑量的差異劃分為高劑量組和低劑量組，另外10只作為對照組，只喂食蒸餾水。高劑量組每日灌胃長柄側耳發酵液30 mg·kg-1，低劑量組每日灌胃發酵液 10 mg·kg-1，對照組每日灌胃蒸餾水 10 mg·kg-1，持續時間均為30 d。

在小鼠30 d最后一次灌胃結束后，將其尾部掛上5%體重重量的金屬塊，并將其放入游泳試驗箱中游泳。水溫30℃，水面高度0.5 m，觀察小鼠的游泳情況。若小鼠水下游泳時間超過5 s，則做好記錄。

小鼠最后一次灌胃結束后，還需要進行爬桿力量試驗。若小白鼠因肌肉疲勞導致爬桿時出現掉落情況，記錄開始爬桿和掉落的持續時間。

耐缺氧試驗需在廣口瓶中放入石灰，后將小鼠依次放入瓶中，密閉瓶口，不斷晃動廣口瓶，記錄小鼠從放置入瓶到死亡的最終時間。

2） 測定內容

運動試驗結束后分離小鼠血清，測試其中的肝糖原儲存量；眼球取血測試血乳酸含量，同時測試尿素氮的含量。之后取新鮮的肝組織測定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA） 與谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px） 活力。

1.3 統計學分析

研究中的所有數據全部采用SPSS 22.0統計學軟件進行分析，其中計量資料以（±s） 表示，組間結果比較選擇t進行檢驗，以P＜0.05時判定數據差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 抗氧化能力研究

抗氧化能力試驗指標見表1。

表1 3組小鼠試驗后各項指標數據統計Tab.1 Statistics of various indicators after the three groups of mice

由表1結果顯示，3組小鼠在肝糖原、尿素氮、血乳酸、SOD、MDA和GSH-Px幾項指標方面具有顯著的差異（P＜0.05），充分說明了高劑量組小鼠的抗氧化能力強于低劑量組和一般對照組，即長柄側耳發酵液含量越高，小鼠的抗氧化能力越強。

2.2 抗運動疲勞能力研究

3組小鼠抗運動疲勞能力試驗結果見表2。

表2 運動時間數據結果Tab.2 Results of exercise time data

由表2所示，在抗運動疲勞能力方面，高劑量組小鼠在游泳時間、耐缺氧時間和爬桿時間3項指標顯著優于低劑量組小鼠和對照組小鼠（P＜0.05），說明高劑量組小鼠的整體運動時間變得更長，無論是在游泳還是爬桿的過程中都具有良好的運動耐力，進而使得其耐缺氧能力時間加長。

3 討論

現代人群對于健康的重視程度越來越高，與食用菌相關的研究工作也在不斷深入。特別是信息時代，人們獲取健康資源的途徑增加，可以深入了解食用菌相關知識，更促進了食用菌的開發和利用。食用菌不僅具有明確的營養價值，還具一定的藥理活性，在疾病預防方面效果顯著，符合現代人群的健康發展理念，也具有較大的市場潛力。

當前野生食用菌在市場上出現了供不應求的現象。而為了保持生態平衡，如何有效地開發新類型資源和利用現階段食用菌的生物學特性，從中篩選出質量較好的菌種類型，從其發酵產物中得到活性成分等研究，也成為了今后工作的重點內容。

在長柄側耳的相關研究中，已經證實了其發酵產物能增強小鼠的機體免疫力，在抗腫瘤方面也起到了較好效果，可以在一定程度上抑制腫瘤的生長。如在鄧西貝[1]的研究中提到腫瘤的產生和發展過程，常伴隨著機體免疫系統被破壞后免疫力降低的情況，而胸腺指數的增加即表明機體免疫力的提高；小鼠在食用長柄側耳發酵液和菌絲后，其胸腺指數顯著增加，小鼠免疫力有所增強，而小鼠T細胞與B細胞增殖能力也得到提升，再次證明了長柄側耳發酵液和菌絲在免疫力提高方面起到的作用對小鼠機體免疫細胞的良性影響。

研究結果也證實，長柄側耳發酵產物可以被用于相關的保健品開發工作中。或以此為基礎制造輔助腫瘤治療的藥物，結合現有動物試驗，進一步明確其抗腫瘤活性。

另外還有研究提出長柄側耳對于高脂血癥、高血糖等也具有良好的控制效果。謝兆莉[2]等的研究中，連續灌胃45 d長柄側耳發酵液后，灌胃給藥的小鼠血清當中的膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇含量優于一般小鼠。從這個角度看，可以在相關人群的治療過程中開發研究應用其發酵產物的價值。

如現代人群中，喜甜食和喜油脂飲食人群占大多數，而其對于長柄側耳等菌類食品可降低血脂功效認識不足。因此，應該在相關的藥物研發工作中，加強對食用菌產品的開發工作，加大食用菌營養價值和保健價值的宣傳，促進其產業的發展和健康產業的開發。相比于香菇等常見食用菌，長柄側耳菌絲培養難度較低，且不容易出現染菌現象，可以通過工業化手段大規模生產，提供環保健康的綠色食材。

在李燦[3]等的研究中，通過長柄側耳胞外多糖分離純化方法證實了其對糖尿病小鼠的降血糖作用，在合理的劑量下有調節糖代謝、降低血糖并改善糖尿病癥狀的作用。據此試驗結果，可證實長柄側耳胞外多糖的藥理活性作用，進一步促進其保健價值的開發。

從現有研究中已了解到長柄側耳在疾病治療保健方面的應用價值，但長柄側耳在肝臟組織抗氧化方面的作用也不容小覷。對于人體而言，要想避免身體機能快速老化失去運動能力，最重要的就是讓肝臟始終保持活力。

肝臟可以產生身體活動所需要的能量，提高機體抵抗力。但肝臟極易消耗氧氣，且容易產生大量自由基，當肝臟清除自由基的能力不足時，就會導致肝功能下降[4-5]。現代科學有關抗衰老和抗氧化的理論中，越來越多的研究也證實人體衰老與多種疾病的產生與自由基形成之間具有密切聯系。且自由基的危害作用還涉及肌肉的生理活性和疲勞的產生，因此可以抑制自由基產生而起到抗氧化作用。

試驗結果中，3組小鼠在肝糖原、尿素氮、血乳酸、SOD、MDA和GSH-Px幾項指標中均具顯著的差異。說明高劑量組小鼠的抗氧化能力強于低劑量組和一般對照組，即食用菌酵液含量越高，小鼠的抗氧化能力越強。在抗運動疲勞能力方面，高劑量組小鼠在游泳時間、耐缺氧時間和爬桿時間3項指標上顯著優于低劑量組小鼠和對照組小鼠。說明高劑量組小鼠的整體運動時間變得更長，無論是在游泳還是爬桿的過程中都具有良好的運動耐力，進而使得其耐缺氧能力時間加長。

盡管本次研究的結果只提供了一定的參考指導，但是對于今后的食用菌保健應用領域來說，也為其提供了更為豐富的理論基礎。今后的研究設計也應考慮如何最大限度地發揮食用菌發酵液的抗疲勞、抗氧化與其他保健作用優勢。綜上所述，長柄側耳發酵液可以提升小鼠的肝臟組織抗氧化能力，在抗運動疲勞方面也能起到穩定的效果，據此可進行深層研究，以開發其潛在的藥理活性。