非酒精性脂肪肝病患者血清LAC、FFA與胰島素抵抗的關系研究

鄂建飛，何 訸，賀 勇，羅 薇，李貴星△

(1.德陽市人民醫院檢驗科，四川德陽 618000；2.四川大學華西醫院實驗醫學科，四川成都 610041)

近年來，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)已經成為全球重要的公共衛生問題，并成為我國第一大慢性肝病[1]。來自北京、上海等地區的流行病學調查結果顯示，NAFLD患病率近10年從15.0%增加到31.0%[2]。四川成都地區普通成人NAFLD的患病率為17.1%，代謝綜合征(MS)患者的NAFLD患病率更是達到了58.0%[3]。BALLESTRI等[4]研究顯示，NAFLD患者發生糖尿病的風險較非NAFLD者高，同時，NAFLD患者發生MS的風險也高于非NAFLD患者(P<0.05)。ALLEN等[5]使用多態模型研究NAFLD對病死率的影響，結果顯示NAFLD患者10年病死率為10.2%，明顯高于對照組的7.6%，NAFLD患者預期壽命縮短了4年。因此，探討NAFLD發病機制對于延長患者的生命具有重要意義。本研究探討了NAFLD患者血清乳酸(LAC)和游離脂肪酸(FFA)與胰島素抵抗(IR)的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年10月至2019年10月就診于四川大學華西醫院的NAFLD住院患者102例作為病例組，年齡16～69歲。NAFLD的診斷符合《非酒精性脂肪性肝病防治指南》中的臨床診斷標準[1]。選取同期四川大學華西醫院體檢中心100例體檢健康者作為對照組，年齡20～70歲。排除標準：(1)重癥感染、手術、外傷等引起的繼發性肝功能損傷者；(2)有過量飲酒史，男性攝入的乙醇量每周≥140 g，女性每周≥70 g；(3)有下列任何一項可導致肝臟脂肪沉積的特定疾病，包括病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、藥物性肝病、肝豆狀核變性病等；(4)服用保肝藥、降脂藥或可造成肝臟脂肪沉積的藥物者；(5)不符合納入標準、臨床數據資料不完整影響判斷者。病例組與對照組性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 通過調查問卷收集研究對象基本信息。研究對象于檢測前3 d內避免高脂飲食，檢測前1 d 24:00后禁食。抽取所有研究對象空腹靜脈血，放置30 min后，置于離心機以3 000 r/min離心15 min，上機檢測。采用羅氏Cobas 8000全自動生化分析儀及配套試劑檢測總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、空腹血糖(FBG)、LAC。FBG和LAC檢測使用氟化鈉抗凝采血管采集標本。采用北京利德曼試劑檢測FFA；采用羅氏Cobas E601化學發光分析儀及配套試劑檢測空腹胰島素(FINS)。檢測相關指標所用方法：(1)TC采用氧化酶法；(2)TG采用氧化酶法；(3)HDL-C采用氧化酶法；(4)LDL-C采用氧化酶法；(5)ALT采用酶法；(6)AST采用酶法；(7)FBG采用己糖激酶法；(8)LAC采用氧化酶法；(9)FFA采用氧化酶法；(10)FINS采用化學發光法。依據FBG和FINS計算穩態模型評估胰島素抵抗指數(HOMA-IR)：HOMA-IR=FBG(mmol/L)×FINS(mIU/L)/22.5。

2 結 果

2.1兩組間生化指標比較 病例組FBG、FINS、HOMA-IR、TG、ALT、AST、FFA、LAC水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；病例組HDL-C水平低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；病例組和對照組TC、LDL-C水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 病例組和對照組間生化指標的比較

組別nHDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)FFA(mmol/L)LAC(mmol/L)ALT(U/L)AST(U/L)病例組1021.18±0.332.86±0.851.35±0.552.01±0.8862.0±38.037.0±17.0對照組1001.66±0.352.67±0.560.95±0.481.08±0.5322.0±10.021.0±6.00t-9.8811.8385.4299.1487.6057.748P<0.0010.068<0.001<0.001<0.001<0.001

2.2NAFLD患者血清LAC、FFA水平與各因素相關性分析 Pearson相關分析顯示，血清LAC與HOMA-IR、TG、FFA呈正相關(r=0.714、0.349、0.408，P<0.05)。血清FFA與HOMA-IR、TG、LAC呈正相關(r=0.521、0.260、0.408，P<0.05)，與HDL-C呈負相關(r=-0.349，P<0.05)，見表2。

表2 血清LAC、FFA水平與各因素相關性分析

2.3多元逐步回歸分析 以LAC為因變量，以FBG、FINS、HOMA-IR、TG、HDL-C、ALT、AST、FFA為自變量進行多元逐步回歸分析。結果顯示，LAC與HOMA-IR、FFA呈正相關(P<0.05)，見表3。以FFA為因變量，以FBG、FINS、HOMA-IR、TG、HDL-C、ALT、AST、LAC為自變量進行多元逐步回歸分析。結果顯示，FFA與HOMA-IR、TG、LAC呈正相關(P<0.05)，見表4。

表3 血清LAC與各變量關系的多元逐步回歸分析

表4 血清FFA與各變量關系的多元逐步回歸分析

3 討 論

本研究結果顯示，病例組患者LAC水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，同時，Pearson相關分析顯示，血清LAC與HOMA-IR呈正相關(r=0.714，P<0.05)，表明IR與NAFLD患者血清LAC升高密切相關。QVISTH等[6]發現在注射胰島素后，LAC水平增加，并且在脂肪組織中比骨骼肌組織中增加得更為明顯，表明在高胰島素狀態下，LAC水平是由肌肉以外葡萄糖代謝率決定的。研究表明，IR使線粒體丙酮酸利用減少，糖無氧酵解作用增加，導致LAC生成增多[7]。當機體出現IR，機體能量供應由紅細胞葡萄糖酵解補充，秦永軍等[8]報道，脂肪肝組紅細胞水平較非脂肪肝組顯著增加，紅細胞利用葡萄糖增加，LAC水平升高。另外，研究發現LAC可以通過絲裂素活化蛋白激酶(MAPK)誘導白細胞介素(IL)-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α等炎性因子的表達，引起氧化應激，進而引起脂肪變性的肝細胞反生炎癥、壞死甚至纖維化，加重NAFLD患者的病情[9]。本研究結果顯示，病例組患者FFA水平為(1.35±0.55)mmol/L，對照組FFA 水平為(0.95±0.48)mmol/L，病例組患者血清FFA水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，表明FFA與NAFLD的發生密切相關。Pearson相關分析顯示，血清FFA水平與HOMA-IR呈正相關(r=0.521，P<0.05)，與張旭艷等[10]提出IR與血清FFA升高密切相關結果一致。SANYAL等[11]利用高胰島素正常葡萄糖鉗夾試驗觀察到IR出現時伴有血清FFA升高。另外，LAGATHU等[12]發現，增多的FFA可通過使胰島素的信號轉導抑制因子3高表達而加重IR。FFA代謝異常貫穿于NAFLD的整個發病過程[13]。FFA在NAFLD的發生、發展中起著重要的作用，FFA水平增加是NAFLD的特征表現，也是引起脂質過氧化、肝細胞損傷、炎癥激活、能量代謝障礙、脂肪細胞凋亡等的關鍵因素。

本研究以LAC為因變量進行多元逐步回歸分析，結果顯示，LAC與HOMA-IR、FFA呈正相關(P<0.05)，表明LAC水平升高與IR、FFA密切相關。以FFA為因變量進行多元逐步回歸分析，結果顯示，FFA與HOMA-IR、LAC呈正相關(P<0.05)，表明FFA水平升高與IR和LAC密切相關。其可能的機制為IR導致LAC水平升高，LAC通過乳酸脫氫酶轉化為丙酮酸，丙酮酸通過丙酮酸脫氫酶復合體生成乙酰輔酶A(CoA)，乙酰CoA在乙酰CoA羧化酶催化下轉化成丙二酸單酰CoA，再經過縮合、還原、脫水，再還原基本反應循環合成脂肪酸。催化反應的乙酰CoA羧化酶是脂肪酸合成的關鍵酶，并且胰島素能夠通過蛋白磷酸酶的去磷酸化作用，使磷酸化的乙酰CoA羧化酶脫磷酸激活，高濃度胰島素促進乙酰CoA向丙二酸單酰CoA轉化[14]。MUOZ等[15]通過動物實驗發現，IR后葡萄糖酵解通量增加，導致LAC釋放增加，并指出間接途徑(葡萄糖-乳酸-3-磷酸甘油)是脂肪沉積的重要途徑。

4 結 論

NAFLD患者血清FFA、LAC水平顯著增加，與IR密切相關。臨床工作者在綜合治療的同時關注血清LAC、FFA水平，糾正脂代謝紊亂，可減緩NAFLD患者的病情發展。