食源性致病菌監測常見檢測技術分析

和麗毅

摘 要：近年來伴隨著生活水平的不斷提高，人們越來越關注食品安全問題，而食源性致病菌是威脅食品安全的最大因素之一，因此積極采取有效的技術手段檢測食源性致病菌，然后針對性采取防治措施是保證食品安全的重要手段。本文總結了常見的幾種檢測食源性致病菌的技術。

關鍵詞：食源性致病菌;檢測手段;應用分析

當前，食品安全已經成為全球共同關注的一個公共衛生問題，食源性疾病主要是感染食源性致病菌所致，因此該病菌是威脅食品安全的重要因素，因此，采用準確且高效的檢測技術控制食源性疾病流行至關重要。

1 細菌培養技術

細菌培養技術作為檢測食源性致病菌的一項傳統技術，該技術主要的檢測原理為對食品樣品內的微生物實施培養，再采用劃線分離，進行選擇性培養，對菌落的特征進行觀察，從而檢測并鑒別致病菌的種類。伴隨著生物技術的飛速發展，顯色培養基因特異性強以及靈敏度高等優點被應用在食源性致病菌的檢測中，極大地提高了篩選的效率。在今后的生化鑒定中，借助全自動微生物鑒定分析系統便可以達到進一步簡化實驗步驟、縮短實驗周期的目的，同時還能保證結果的準確性。但是傳統的細菌培養技術最大的缺陷在于操作流程多，所需時間長，因此不適合一些應急情況下的檢測[1]。

2 免疫學技術

2.1 酶聯免疫吸附試驗

該檢測技術的主要原理為抗原、抗體之間的特異性反應，是通過酶標抗體或者抗原催化底物顯色來定性或者定量分析待檢食物。大量試驗結果表示：酶聯免疫吸附實驗可以在24 h內將食物中的多種食源性致病菌檢測出來。mini-Vidas作為全自動免疫分析儀便是采用酶聯免疫吸附原理制造出來的，該儀器可以在1～2 d內迅速地檢測出單核細胞增生李斯特菌、大腸埃希氏菌、空腸彎曲菌與沙門氏菌等多種食源性致病菌。

2.2 免疫熒光標記檢測法

免疫熒光標記檢測作為一類檢測食源性致病菌的新型手段，該技術的原理是利用特異性抗體敏化的免疫色譜卡片進行檢測。在檢測時，先將增殖培養后的樣品滴加至免疫色譜卡上，無需儀器只需肉眼便可以對結果進行觀察。免疫熒光標記檢測法具有操作簡單、無需其他設備的優點，并且適應性較強，根據實驗結果顯示，增殖后的操作時間只需10 min左右。

2.3 免疫磁珠技術檢測法

免疫磁珠技術也叫免疫磁珠分離技術，該檢測技術主要結合了免疫反應和磁性分離兩項技術，其操作步驟如下：首先將抗體包裹在磁珠表層上，將其和特定的抗原發生反應后，再識別分離檢測物，因此該檢測技術具有靈敏度高、反應時間短等特征。該檢測技術能夠把致病菌的檢測時間由過去的幾天逐漸縮短至幾個小時，檢測效率極大的提高，當前已經被廣泛地應用在微生物檢測領域[2]。

3 生物學檢測技術

3.1 電阻抗技術

電阻抗技術作為一類新型生物學檢測技術，當前已經被廣泛應用在食品微生物領域，該檢測技術的原理為在細菌繁殖過程中，其產生的代謝產物會引起培養基的阻抗改變，通過該變化判斷樣品中的微生物。電阻抗技術已經被應用于檢測食品內的大腸桿菌、細菌總數、沙門氏菌等食源性致病細菌。

3.2 ATP生物發光法

三磷酸腺苷（ATP）作為細胞內產生的一類重要的代謝產物，其在熒光蟲素酶與熒光蟲素的作用下可以釋放出能量，形成磷光。當環境保持不變時，細菌細胞中含有的ATP是相對固定的。所以通過檢測磷光的強度便可以準確判斷出細菌菌落的總數。ATP生物發光法主要可檢測食品中菌落的總數，從而對食品遭受微生物污染的嚴重程度進行判斷，具有用時短、操作簡單等優點。另外ATP生物發光法還可以現場快速檢測大量食品樣本的細菌污染情況。值得注意的是：如果樣品中存在大量非細胞ATP，那么將會對檢測的結果造成一定影響。

3.3 PCR檢測技術

由于每一類生物其擁有的核酸片段具有特異性，因此便可以借助含有探針的補體核酸片段檢測致病菌，一般情況探針上帶有擁有放射性的同位素。當前，PCR檢測技術主要被應用在沙門氏菌的檢測中，其具有操作簡便、用時短等特征，檢測結果具有較強的特異性和敏感性。當前隨著PCR檢測技術的不斷發展，除了被應用在食源性致病菌的檢測中，也逐漸被應用在其他領域，并且延伸出了熒光定量PCR檢測技術、逆轉錄PCR檢測技術以及電化學發光PCR檢測技術技術等等，逐漸成為檢測某些食源性致病菌的標準技術[3]。

4 結語

綜上所述，當前用于檢測食源性致病菌的技術較多，每一類技術均擁有自身的優點與缺點，應將各類檢測技術的優點充分發揮出來，聯合應用多種檢測技術有助于提高食源性致病菌檢測結果的準確性，從而保證消費者的食品安全。

參考文獻

[1]史春悅.食源性致病菌檢測技術的應用與研究進展[J].現代食品，2020（4）：49-52.

[2]尹琬婷，嚴志明.食源性致病菌快速檢測技術研究進展[J].食品安全導刊，2018（24）：114.

[3]陳秀琴，黃梅清，鄭敏，等.食源性致病菌快速檢測技術及其應用研究進展[J].福建農業學報，2018，33（4）：438-446.