維生素D對克隆恩病患者炎癥因子及鐵調節蛋白的影響

張秋琴，劉懿，鐘穎，徐梅琳，左艷

1.上海市寶山區仁和醫院消化科，上海 200431；

2.復旦大學附屬華山醫院消化科，上海 200040

克隆恩病是一種可能由遺傳和環境等多因素共同導致的，腸道細菌和免疫系統介導的反復發作的腸道疾病[1]。有研究發現約50%的克隆恩病患者存在維生素D 和鐵的缺乏[2]，口服維生素D3可以降低克隆恩病的發生率[3]。WANG 等[4]的動物實驗發現，維生素D 缺乏的大鼠結腸炎發病率較高，而及時補充維生素D 可降低大鼠結腸炎發生風險。本研究通過比較克隆恩病患者和健康成年人的25(OH)D3水平，并給予克隆恩病患者口服維生素D 治療，旨在探討研究維生素D 對克隆恩病患者炎癥因子及鐵調節蛋白的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取上海市寶山區仁和醫院消化科和復旦大學附屬華山北院消化科2015 年7 月至2019年10月門診治療的克隆恩病(輕、中度)患者100例(每家醫院各50例)。納入標準：①符合《炎癥性腸病的診斷與治療的共識》中克隆恩病的診斷標準[5]；②初診初治者。排除標準：①過去1年內使用過維生素D、鈣或存在其他腸道疾病者；②存在嚴重的心肝腎等并發癥者。③重度CD患者及對水楊酸過敏者。按照隨機數表法分為治療組和常規組，每組50例。治療組患者中男性28 例，女性 22 例；年齡 33～52 歲，平均(42.61±4.14)歲；疾病分型中回結腸型22 例，結腸型18 例，回腸末端型10例。常規組患者中男性26例，女性24例；年齡32～50歲，平均(42.05±4.19)歲；疾病分型中，回結腸型21例，結腸型19例，回腸末端型10例。選取同期健康成年人100 例作為正常對照，其中男性50 例，女性 50 例；年齡32～52 歲，平均(42.15±4.79)歲。三組受檢者的性別和年齡比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經醫學倫理委員會批準，患者均簽署知情同意書。

1.2 治療方法 常規組給予常規的水楊酸制劑抗炎及對癥治療，治療組在常規治療基礎上給予維生素D 治療，即維生素D(國藥準字：H35021450，規格：400 U，國藥控股星鯊制藥(廈門)有限公司)每天一次，每次400 U，碳酸鈣D3片(國藥準字：H20093675，規格：0.5∶200 U，北京康遠制藥有限公司)每次1片，2次/d。兩組患者均接受門診治療90 d。治療90 d后復查腸鏡評估療效。

1.3 觀察指標與檢測方法 比較兩組患者治療前后的轉鐵蛋白、鐵蛋白、腸黏膜屏障、血清鐵的含量、氧化應激水平及白介素6(IL-6)、白介素1(IL-1)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)及C反應蛋白(CRP)水平。清晨抽取兩組患者治療前(健康對照者為體檢時)空腹12 h 的肘中靜脈血，治療90 d 次日清晨再次抽取兩組患者空腹12 h的肘中靜脈血，采用免疫比濁法測定兩組患者治療前后 IL-6、TNF-α、CRP 及IL-1 等炎癥因子的含量。采用ELISA 的方法檢測兩組患者治療前后的鐵蛋白、血清鐵、轉鐵蛋白等鐵調節蛋白含量。運用全自動免疫生化分析儀測定克隆恩病患者和健康成年人25(OH)D3的含量。記錄兩組患者治療前后血清丙二醛(MAD)、超氧化物歧化酶(SOD)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸水平。

1.4 療效評價標準 采用克羅恩病活動指數(Crohn’s disease activity index，CDAI)進行療效評價[5]。采用 BEST 等[6]的 CDAI 計算法：臨床緩解，CDAI＜150分；顯效，CDAI下降≥100分；無效，CDAI評分無明顯改善。總有效率=(臨床緩解+顯效)/總例數×100%。

1.5 統計學方法 應用SPSS22.0 統計學軟件進行數據分析，計數資料比較采用χ2檢驗；計量資料符合正態分布，以均數±標準差(±s)表示，兩組間比較采用t檢驗，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者的臨床治療效果比較 治療組患者的治療總有效率80.0%，明顯高于常規組的48.0%，差異具有統計學意義(χ2=9.77，P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者的治療效果比較(例)

2.2 兩組患者治療前后的鐵調節蛋白含量比較 治療前，兩組患者的轉鐵蛋白、鐵蛋白、血清鐵比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；治療后，兩組患者的轉鐵蛋白、鐵蛋白明顯低于治療前，血清鐵明顯高于治療前，且治療組患者的轉鐵蛋白、鐵蛋白、血清鐵明顯低于常規組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組患者治療前后的鐵調節蛋白含量比較(±s)

表2 兩組患者治療前后的鐵調節蛋白含量比較(±s)

注：與本組治療前比較，aP＜0.05。

組別常規組治療組t值P值例數50 50治療前2.83±0.65 2.72±0.74 0.79 0.43治療后2.11±0.60a 1.63±0.58a 4.07＜0.05治療前30.28±4.24 29.50±4.37 0.91 0.37治療后35.19±4.08a 37.77±3.26a 3.49＜0.05治療前27.84±5.38 27.16±5.26 0.64 0.52治療后21.67±4.78a 16.75±4.18a 5.48＜0.05轉鐵蛋白(g/L) 血清鐵(μmol/L) 鐵蛋白(μg/L)

2.3 克隆恩病患者和健康成年人血25(OH)D3水平比較 健康成年人血25(OH)D3為(42.52±9.35) ng/mL，明顯高于克隆恩病患者的(16.12±3.38)ng/mL，差異具有統計學意義(t=18.78，P＜0.05)。

2.4 兩組患者治療前后腸黏膜屏障和氧化應激水平比較 治療前，兩組患者的SOD、MAD、DAO 及D-乳酸等水平比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；治療后，兩組患者的SOD 明顯高于治療前，MAD、DAO 及D-乳酸明顯低于治療前，且治療組患者的SOD 明顯高于常規組，MAD、DAO 及 D-乳酸明顯低于常規組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

2.5 兩組患者治療前后的炎癥因子比較 治療前，兩組患者的TNF-α、IL-6、IL-1及CRP等炎癥因子水平比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；治療后，兩組患者的TNF-α、IL-6、IL-1 及CRP 等炎癥因子水平明顯低于治療前，且治療組明顯低于常規組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表4。

表3 兩組患者治療前后的腸黏膜屏障和氧化應激水平比較(±s)

表3 兩組患者治療前后的腸黏膜屏障和氧化應激水平比較(±s)

注：與本組治療前比較，aP＜0.05。

組別常規組治療組t值P值例數50 50治療前6.26±1.39 6.37±1.40 0.39 0.69治療后4.84±0.92a 3.67±0.83a 6.68＜0.05治療前73.22±11.36 71.82±12.48 0.59 0.56治療后87.66±13.45a 98.19±14.25a 3.80＜0.05治療前8.02±1.60 7.94±1.58 0.25 0.80治療后6.14±1.18a 4.78±0.95a 6.35＜0.05 D-乳酸(mmol/mL) SOD(U/mL)DAO(U/mL)治療前3.92±0.88 3.82±0.79 0.60 0.55治療后2.12±0.68a 1.35±0.52a 6.36＜0.05 MAD(nmol/mL)

表4 兩組患者治療前后的炎癥因子比較(±s)

表4 兩組患者治療前后的炎癥因子比較(±s)

注：與本組治療前比較，aP＜0.05。

組別 例數治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后CRP(mg/L) TNF-α(ng/L)IL-1(ng/L)治療前 治療后MAD(nmol/mL)常規組治療組t值P值50 50 7.99±1.03 7.96±1.03 0.15 0.86 7.02±0.95a 5.55±1.11a 7.11＜0.05 36.49±5.35 36.53±5.35 0.04 0.97 31.27±7.41a 23.51±6.88a 5.43＜0.05 22.01±2.01 22.33±2.02 0.79 0.43 19.89±2.41a 15.33±2.27a 9.74＜0.05 16.03±1.16 15.93±1.59 0.36 0.72 14.73±1.12a 9.77±0.94a 23.99＜0.05

3 討論

相關研究表明，炎癥性腸病在我國的發病率逐年上升[7]。腸道慢性炎癥降低患者腸道的吸收功能，影響患者的免疫力，增加患者感染和骨質疏松發生風險，降低患者的生活質量。研究表明，克隆恩病患者缺乏維生素D 的程度與疾病的嚴重程度存在正相關[8-9]。近年研究發現，維生素D既可以調節機體的鈣磷代謝，又可調節鐵調節蛋白和炎癥因子[10-11]。

通常利用25(OH)D3來反映其體內維生素D 的水平。本研究發現，健康成年人體內25(OH)D3水平顯著高于克隆恩病的患者，說明克隆恩病患者體內維生素D含量較低，經過維生素D治療后，治療組的總有效率顯著升高，提示維生素D對于緩解克隆恩病患者臨床癥狀及改善腸黏膜具有積極作用。ANANTHAKRISHNAN等[12]研究發現，高水平的25(OH)D3可有效降低炎癥性腸病的發生風險，印證了本研究結果。克隆恩病患者大多伴有缺鐵性貧血，隨著治療的進展，患者的腸道吸收功能逐漸恢復，缺鐵性貧血得到改善，血中轉鐵蛋白、鐵蛋白下降，血清鐵升高。本研究中，治療前，兩組患者的鐵蛋白、血清鐵及轉鐵蛋白、比較無統計學意義，治療組患者經過系統治療后，轉鐵蛋白、轉鐵蛋白等顯著低于常規組，血清鐵高于常規組，說明維生素D可有效調節體內轉鐵蛋白、血清鐵、轉鐵蛋白的水平。正常情況下，機體可清除體內多余的自由基，保持氧化應激反應處于動態平衡中。SOD是清除自由基的氧化酶，MAD是脂質的過氧化代謝產物，可反應體內氧化應激程度。克隆恩病患者SOD水平較低，而MAD水平較高，導致大量的自由基蓄積，損傷腸黏膜屏障，激活核因子-κB通路，增加腸道炎癥的發生[13]風險。本研究中治療組患者體內高水平的SOD，可清除體內過多的自由基，減輕炎癥反應。D-乳酸和DAO是評價腸道黏膜屏障的間接指標，腸道受損時，腸黏膜的通透性增加，絨毛細胞中的D-乳酸和DAO進入血液，導致其含量增加。本研究中，治療組患者D-乳酸和DAO含量明顯降低，表明維生素D可修復腸道黏膜屏障，減輕腸道炎癥。本研究中治療組患者IL-6、IL-1炎癥因子水平顯著降低，維生素D可通過影響樹突細胞和T細胞降低炎癥因子水平，避免過度免疫應答。這與ZHU等[14]研究結果具有一致性。TNF-α參與克隆恩病的發生發展，巨噬細胞在受到抗原的刺激后，產生絲裂原活化激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPKs)，而 這 是TNF-α等炎癥因子產生的關鍵。本研究中，治療組患者CRP和TNF-α明顯降低，說明維生素D可減輕克隆恩病患者炎癥反應。

綜上所述，克隆恩病的患者較健康成年人缺乏維生素D，及時的補充維生素D 可以降低患者的鐵調節蛋白和炎癥因子的水平，有助于緩解克隆恩病患者臨床癥狀及改善腸黏膜的屏障功能，值得推廣應用。