湛江市生豬肺臟病變的研究情況探析

李曉波 范紅霞

摘 ?要：對于生豬肺臟病變的相關研究，目前在國內外發展研究中逐漸增多，但是對于屠宰生豬肺臟病變的研究還在進行延伸，為了對屠宰生豬肺臟檢疫進行相關性檢疫工作，在實驗中對湛江地區大量屠宰生豬肺臟病變進行觀察研究，對病變部位通過切片染色觀察。對屠宰生豬肺臟的病變數量和類型進行對比，對分析生豬肺臟病變起到輔助性作用，更為生豬屠宰檢疫工作提供了保障。

關鍵詞：生豬;肺臟;病變

1豬肺臟的解剖結構

健康生豬的肺粉紅色，質輕而軟，富有彈性，分為左右兩肺。通常右肺比較大。肺門是支氣管、肺動脈、肺靜脈和神經等出入肺臟的地方。這些通道組織被結締組織包圍在一起稱為肺根。左右肺都有三個面：肋面接觸胸腔側壁，有肋骨壓跡。縱隔面接觸縱隔，有心臟、食管，血管壓跡。膈面和橫膈膜接觸。肺臟的分葉：豬的肺臟左三右四共分七葉。左肺三葉：尖葉、心葉、隔葉;右肺四葉：尖葉、心葉、膈葉和內側的副葉。肺臟表面的漿膜是肺胸膜，肺胸膜的結締組織將肺臟分成若干錐體形小葉，底部朝向表面，頂部朝向肺門。

2.屠宰生豬肺臟病變的觀察

生豬的養殖階段，呼吸系統是比較容易發生疾病的系統，特別是肺臟和胸膜，在近幾年來，因呼吸道問題導致的疾病讓養殖戶越發的頭疼，從而給農戶帶來很大的損失。而在生豬屠宰過程中也發現許多肺臟的病變，由于傳染性疾病很多都會通過肺部的病變表現出來，所以作為檢疫人員能否快速的通過觀察肺臟的病理特征，做出相應的檢疫處理至關重要。

2.1材料與方法

2.1.1儀器和試劑

輪轉式切片機：德國萊卡公司;顯微鏡：Nikon公司。

采樣工具：采樣袋、手術剪刀、鑷子、解剖刀、酒精燈、酒精棉、一次性無菌橡膠手套等。無水乙醇;氯化鈉;甲醛;二甲苯;生物切片石蠟;蘇木精;伊紅;中性樹膠。

2.1.2樣品采集記錄

在2013-5至2014-5期間，對某地區兩所生豬屠宰場屠宰的30個生豬畜群共計6000頭生豬進行采樣，其中4000頭生豬來自1號屠宰場的20個畜群，2000頭生豬來自2號屠宰場的10個畜群的。所有生豬均完成標準免疫程序，且體重大于120kg，年齡約7—8月齡。共采集有效的肺臟樣品5850份。在屠宰場檢疫崗位上，采集1×1cm的不同病變肺臟組織塊。快速將組織用紗布包好固定于10%中性甲醛液（5—10倍于組織體積），用于組織切片以及病理學觀察。

2.2病理剖檢

2.2.1懸掛觀察檢驗

從氣管環之間掛起肺臟器官，觀察肺的表面色澤、形態、大小有無異常，觸摸兩肺實質，檢查有無結節或硬變。

2.2.2剖檢左右支氣管淋巴結

用檢驗鉤鉤住靠近主動脈弓的左支氣管部分，稍向左拉，右手用刀切開動脈弓和氣管間的脂肪組織直到左支氣管分叉處，剖檢左支氣管淋巴結;在用檢驗鉤鉤住右肺尖葉，向左側拉，使其翻轉，在肺的尖葉和氣管之間緊靠氣管切開并檢查。有時還要剖檢縱隔淋巴結。

2.2.3對生豬進行平案檢查

先將肺放在檢驗臺上，肺臟的隔面向上，左肺在檢驗人員左側。用左手拇指和食指提起主動脈靠近支氣管部分，其余三指托住左肺隔面，然后稍向外翻，就可以按懸掛檢驗方法剖檢左支氣管淋巴結。然后再用左手拇指和食指抓住右肺尖葉的基部，其余手指和手掌托住肺心葉隔面，提起肺臟并向內翻轉，就可以使得尖葉，右肺隔葉基部和支氣管分叉處露出。

（1）組織塊的修整和沖洗：將固定好的肺臟組織用外科手術刀片將組織塊分別切成厚約5mm左右的薄塊，把修整好的肺臟組織塊放到大燒杯中并用紗布包緊瓶口，在紗布中央切開一小口放入橡皮管，橡皮管的另一端與水龍頭連接來沖洗，時間約12h左右，之后放到各級濃度酒精中進行組織的脫水。

（2）載玻片的處理：1.清洗，將載玻片放于含有洗衣粉的自來水中浸泡2h，用擦鏡紙清洗表面，晾干后在酸缸中浸泡24h。自來水沖洗數次后，用蒸餾水洗三次，再置于無水乙醇中浸泡24h，最后再用蒸餾水清洗三次，用干凈的紗布擦干即可，2.粘片劑包被，用彎嘴鑷子將擦干凈的載玻片小心垂直放入盛有50倍丙酮稀釋的APES溶液中，停留20s，取出，放入盛有蒸餾水的燒杯中，上下提拉，直至提出玻片時蒸餾水從玻片兩邊聚集到中間成一條線流下，然后將載玻片取出放入37℃溫箱晾干即可。

（3）組織塊的脫水和透明：組織塊每前移一次，都先將組織上的殘留液體用干凈的吸水濾紙吸干，以免影響酒精和二甲苯的濃度。根據肺臟組織的特性，二甲苯透明時間約在7min左右。透明時間太短二甲苯無法完全滲透組織，時間太長容易使組織變脆，切片的時候，容易把組織切碎，無法切出完整的組織形態結構。

（4）肺臟組織塊的浸蠟與包埋：將已透明好的肺臟組織塊移入熔化的石蠟內，置于58℃的電熱恒溫干燥箱內，并使其溫度保持恒溫，然后將透明好的的肺臟組織塊放入蠟杯。將包埋盒放在已經加熱的溫臺上，從溫箱中取出盛放純凈石蠟的蠟杯，倒入包埋盒中，迅速輕輕地將組織平放于紙盒底部，用鑷子把組織排列整齊。等石蠟完全凝固后即可取出蠟塊進行切片。

（5）石蠟切片的制作：切片前先修整蠟塊，切去組織周圍過多的石蠟，留下約3mm寬度。將修整好的蠟塊固定在木塊上，調整石蠟塊與刀口之間的角度與位置，刀片與石蠟切片約成巧度左右。切片厚度為5 m。調整好后勻速轉動把手，進行切片。切出完整的蠟片后用毛筆將其放入溫水浴展片機內展開，取一片蒸餾水清洗過的載玻片，一端放入水中慢慢靠近展好的蠟片使其貼在載玻片上。然后把載玻片放在平盤上編好記號，置于65℃烤片機溫箱中烘干，每個組織塊撈片2——3張，1一1.5h干燥后取出存放于切片盒待染。

（6）將染完色的組織切片從（二甲苯II）中取出，用吸水濾紙或紗布擦去材料周圍多余的二甲苯。在材料中央滴一小滴中性加拿大樹膠，然后，用鑷子加蓋蓋玻片從樹膠的一側傾斜放入蓋玻片，以便避免樹膠中產生氣泡，影響組織鏡檢觀察。切片封好后，放在切片托盤上自然干燥24h后，用普通光學顯微鏡觀察。

3.結果

3.1肺臟病變統計

對8850頭生豬肺臟樣品進行觀察，記錄，統計，病變肺臟數量是3215頭，占到總數的36.3%;類型主要有氣腫，淤血，出血，混合感染（肉變），水腫和不同類型的肺炎等。其中肺炎占病變肺臟的最大比例，比例為42.5%，肺出血次之，比例為35.7%。

3.2剖檢病變

圖A為正常肺臟，顏色正常，邊緣清晰，無壞死，出血。圖B：兩側肺臟尖葉、心葉、隔葉散在分布著多個斑塊狀、大小不一紅的病灶，病灶與周圍正常組織界限分明，外觀呈紅褐色，質地變實。圖C：兩側肺隔葉可見大面積病灶，呈橘紅色，有的呈暗紅色，病灶呈實變狀。圖D：肺臟紫紅色，體積增大，質地變韌，重量增加，肺臟的表面有散在的出血點。圖E：肺腫大，間質增寬，質地實在，有明顯的肝變區，肺胸膜附有纖維素薄膜，呈淡黃色。

4.討論

4.1不同肺臟病變的鑒別

在D圖中，從眼觀上看肺臟呈紫紅色，體積變大，質地變韌，重量增加，胸膜由于緊張而變得閃光，切面的氣管和組織內混有泡沫血液的樣品。說明該病變可能是肺出血或是肺淤血的病變。若是肺淤血，則有可能發生于左心功能不全，導致肺靜脈血回流左心房時受到阻礙而滯留在肺臟，使得肺臟體積變大呈紫紅色。若是肺出血，則有可能是由寄生蟲、電麻、豬瘟等傳染病這三個原因引起。寄生蟲移行到肺部引起的出血，如：蛔蟲，細頸囊尾蝴，肺絲蟲等。電麻引起的肺出血導致肺臟的尖葉，心葉，隔葉的背側緣被摸下出血新鮮的出血點，并且支氣管淋巴結也會出血。豬瘟等傳染性疾病引起的肺出血表現為肺臟漿膜面出血斑或噴血狀的出血，而且在尖葉，心葉，隔葉有發生肺炎。

在E圖中，從肉眼看肺臟腫大，間質增寬，質地實在，有明顯的肝變區，肺胸膜附有纖維素薄膜，呈淡黃色。從形態上可以分為四個時期：充血期、紅色肝變期、灰色肝變區、消散期。而該圖中的病變應該是處于紅色肝變區。若是充血期，肺臟顏色是暗紅色，腫大，硬度適中，在顯微鏡下觀察只有少量紅細胞，肺泡壁也沖血，肺泡內有粉紅色液體。若是灰色肝變區，肺臟顏色已轉為灰紅或灰色，呈顆粒狀外表，切面干燥，在顯微鏡下，肺泡壁的充血程度就較輕微，肺抱內有團狀纖維素，而中性粒細胞和紅細胞已經消失，由于充血的減輕和出血消失才導致灰色肝變。若是消散期，此時的肺臟灰黃色，質軟，呈半透明，顯微鏡下，肺泡壁血管己經恢復通血，上皮再生，肺泡腔內的纖維素開始溶解，白細胞和巨噬細胞溶解，氣體進入肺泡。

4.2造成病變假象的可能人為因素

4.2.1加工引起出血性變化與病理性出血變化

肺臟嗆血是指在刺殺放血過程中，血液被豬吸進肺臟，發生在一側或兩側肺的背側緣有時限于肺的尖葉，嗆血區大小不一，暗紅色，有彈性，切面鮮紅或暗紅，支氣管內有凝血塊。嗆血部位水中不下沉。支氣管淋巴結一般不腫大。電麻出血是由于電麻的電壓過高或者電麻時間過長，引起的全身多個器官出血，其中肺臟比較明顯。在肺臟的胸膜下以及實質中，散在大小不一的鮮紅色出血點。如果同時吸入燙毛池的污水，出血點色澤變暗。而病理性出血則是散在肺的表面，出血點數量一般不多，但豬瘟出血點大或出血性浸潤，支氣管淋巴結出血，其他臟器也會出血病變。

4.2.2加工引起水腫變化與肺水腫、肺炎性水腫

豬在刺殺放血以后處于瀕死期被投入燙毛池熱水中，湯池中的臟水被吸入或者壓入肺臟稱為嗆水。嗆水多墮積于尖葉或其他肺葉下垂部分，呈淺灰色或黃褐色，透明，濕潤。切開流出多量溫熱渾濁液體，可能混有湯池雜物，支氣管無異常變化。而肺水腫在各個肺葉都能發生，肺臟膨大，蒼白，同時存在淤血呈暗紅色，被摸光亮濕潤，間質增寬，膠樣浸潤，切面流出泡沫狀液體。支氣管淋巴結充血，水腫。而肺炎常對稱性發生在尖葉心葉、中間葉和隔葉前緣，主要見于急性氣喘病。肉眼觀察病區紫色，質地較硬，外觀半透明，膠樣浸潤狀，支氣管淋巴結顯著腫大，切面多汁質地較硬，可有出血。

參考文獻

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