水椰八角鐵甲不同日齡和性別成蟲表皮碳?xì)浠衔锏姆N類及動(dòng)態(tài)

蒲宇辰，向海軍，黃 斌，侯有明*

(1. 福建農(nóng)林大學(xué)閩臺(tái)作物有害生物生態(tài)防控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福州 350002；2. 福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院福建省昆蟲生態(tài)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福州 350002；3. 閩南師范大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，福建漳州 363000；4. 菲鵬生物股份有限公司，廣東東莞 523808)

水椰八角鐵甲Octodontanipae(Maulik)隸屬于鞘翅目Coleoptera、葉甲科Chrysomelidae、潛甲亞科Anisoderinae、隱爪族Cryptonichini，最早起源于馬來(lái)西亞(Maulik, 1921)，我國(guó)于2001年在海南省東方市江南苗圃內(nèi)的華盛頓棕櫚Washingtoniafilifera上首次發(fā)現(xiàn)該蟲的蹤跡(孫江華等, 2003)，并已于2013年將其列入全國(guó)林業(yè)危險(xiǎn)性有害生物名錄(國(guó)家林業(yè)局, 2013)。目前，該蟲已入侵?jǐn)U散至我國(guó)福建、海南、廣東、廣西、云南等南方的多個(gè)省份，并成功定殖(孫江華等, 2003; Hou and Weng, 2010)。其幼蟲和成蟲主要取食為害加拿利海棗Phoenixcanariensis、銀海棗P.sylvestris、刺葵P.hancea、椰子Cocosnucifera、蒲葵Livistonachinensis、檳榔Arecacatechu、假檳榔Archontophoenixalexandrae等多種棕櫚科植物未完全展開(kāi)的心葉，使葉片呈現(xiàn)褐色的條斑、皺縮或卷曲，嚴(yán)重影響了入侵地的棕櫚產(chǎn)業(yè)和園林景觀，造成顯著經(jīng)濟(jì)和觀賞價(jià)值損失(Hou and Weng, 2010; 張秩勇, 2010; 張翔, 2015)。

昆蟲表皮碳?xì)浠衔?cuticular hydrocarbons, CHCs)是穩(wěn)定存在于昆蟲上表皮蠟質(zhì)層中的含碳數(shù)一般為20～50不等的長(zhǎng)鏈烴類混合物，包括直鏈飽和烴、直鏈不飽和烴、支鏈飽和烴和支鏈不飽和烴(Blomquist and Dillwith, 1985; Lockey, 1988)。現(xiàn)有研究表明，昆蟲表皮碳?xì)浠衔锏慕M分和含量具有物種特異性，因此它們已被廣泛應(yīng)用于蜜蜂、螞蟻、白蟻、棉鈴蟲Helicoverpaarmigera、煙青蟲Heliothisassulla等多種昆蟲的分類研究中(高明媛等, 1999; 張紅兵等, 2005; 梁小松等, 2009)。然而表皮碳?xì)浠衔镌诮壏N、乃至同一物種不同個(gè)體之間也可能存在差異(Blomquistetal., 1979)。據(jù)楊錦錦等(2015)報(bào)道，黑翅土白蟻Odontotermesformosanus的表皮碳?xì)浠衔锞哂衅芳?jí)特征，工蟻、兵蟻、幼蟻和生殖蟻的表皮碳?xì)浠衔锏姆N類相同，但含量存在差異。Xue等(2016)還發(fā)現(xiàn)，葉甲科跳甲屬Altica個(gè)體表皮碳?xì)浠衔锏姆N類和含量依性別、蟲齡、交配與否、性成熟與否等自身因素而異。此外，昆蟲表皮碳?xì)浠衔锏慕M分和含量也會(huì)受外界環(huán)境因子的影響，例如已有報(bào)道表明食物因素可以引起桔小實(shí)蠅Bactroceradorsalis的種內(nèi)表皮碳?xì)浠衔锝M分的改變(雷妍圓等, 2017)。

在許多昆蟲中，表皮碳?xì)浠衔镞€是一類重要的信息化合物，可以充當(dāng)化學(xué)信號(hào)線索，參與生物個(gè)體之間的親系識(shí)別和配偶選擇(Martin and Drijfhout, 2009; Steigeretal., 2015; Laneetal., 2016)。Kirchner和Minkley(2003)研究表明，草白蟻Hodotermesmossambicus可以通過(guò)交哺表皮碳?xì)浠衔飦?lái)區(qū)分同巢幼蟻和異巢幼蟻。這進(jìn)一步說(shuō)明表皮碳?xì)浠衔锸浅查g識(shí)別中可以相互傳遞的一類重要信息物質(zhì)。而在蟋蟀雄雄競(jìng)爭(zhēng)和雌性配偶選擇中的研究表明，昆蟲在配偶選擇過(guò)程中，相同環(huán)境下不同個(gè)體之間表皮碳?xì)浠衔锿ǔ＞哂胁煌谋碛^遺傳，配偶之間可以利用這種差異評(píng)估遺傳相似性(Kortet and Hedrick, 2005; Thomas and Simmons, 2008; Steigeretal., 2015)。因此，雌性可以依賴于自身表皮碳?xì)浠衔镒鳛榛瘜W(xué)模板去感知潛在配偶的化學(xué)模板，然后評(píng)估配偶質(zhì)量來(lái)決定是否交配，一旦交配則會(huì)引起配偶雙方表皮碳?xì)浠衔锏淖兓@樣就可以避免近親交配或多次交配(Capodeanu-N?gleretal., 2014)。在蟋蟀Teleogryllusoceanics中，雌性個(gè)體更傾向于與那些擁有相異表皮碳?xì)浠衔镒V的個(gè)體進(jìn)行交配，而且配偶之間的表皮碳?xì)浠衔镒V相似性與遺傳相似性呈正相關(guān)(Thomas and Simmons, 2011)，這說(shuō)明個(gè)體的表皮碳?xì)浠衔镒V能夠反映它們的遺傳質(zhì)量，從而作為配偶選擇的信號(hào)來(lái)影響交配雙方的吸引力(Steiger and Stokl, 2014)。

水椰八角鐵甲作為一種入侵害蟲，具有聚集為害和世代重疊等生物學(xué)特性(Hou and Weng, 2010)，而昆蟲表皮碳?xì)浠衔锬軌蛱峁┡c日齡、性別和物種分化相關(guān)的重要信息(張紅兵等, 2005; Xueetal., 2016)。然而國(guó)內(nèi)外對(duì)該蟲表皮碳?xì)浠衔锏难芯可形匆?jiàn)報(bào)道。為此，本研究基于化學(xué)生態(tài)學(xué)，應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)技術(shù)，利用整體化學(xué)浸提(萃取)法和液體進(jìn)樣法，對(duì)不同日齡和不同性別的水椰八角鐵甲成蟲個(gè)體的表皮碳?xì)浠衔镞M(jìn)行檢測(cè)，在確定表皮碳?xì)浠衔锝M分的基礎(chǔ)上，分析不同日齡和不同性別間個(gè)體表皮碳?xì)浠衔锏牟町悾荚诿鞔_個(gè)體因素對(duì)該蟲表皮碳?xì)浠衔锝M分與含量的影響，以期為近緣種的種類識(shí)別及該蟲的日齡、性別和性成熟與否的快速鑒定及其檢驗(yàn)檢疫監(jiān)測(cè)提供新的技術(shù)手段和詳實(shí)可靠的數(shù)據(jù)支持。同時(shí)，本文也為進(jìn)一步研究昆蟲的配偶選擇機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)，從而可為開(kāi)發(fā)以昆蟲表皮碳?xì)浠衔餅榘袠?biāo)的新型害蟲抑制劑或行為干擾劑提供新的思路和途徑。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx的采集及飼養(yǎng)

供試水椰八角鐵甲蟲源采自福建省漳州市漳浦縣臺(tái)灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園(24.18°N，117.40°E)，寄主為加拿利海棗。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，將采集到的野外種群飼養(yǎng)于瓶底墊有濾紙的組織培養(yǎng)瓶(直徑6 cm，高9 cm)中。從福建省福州市城市綠化帶采集加拿利海棗葉片用于飼養(yǎng)水椰八角鐵甲，每3 d更換一次新鮮的葉片。幼蟲化蛹后，挑取單頭蛹置于單個(gè)指形管(直徑1.5 cm，高7 cm)內(nèi)，直至羽化為成蟲，并用于后續(xù)試驗(yàn)。該蟲的飼養(yǎng)條件為溫度25±1℃，RH 50%±10%，光暗周期L ∶D=12 ∶12。所有試驗(yàn)均在可精確控溫控濕的人工氣候箱中進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)試劑和儀器

主要儀器和耗材：7890A-5975B氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Agilent公司)；N2低溫吹填蒸發(fā)濃縮裝置(長(zhǎng)沙自動(dòng)化儀表廠)；石英毛細(xì)管色譜柱HP-5MS(0.25 mm×30 m×0.25 μm)(美國(guó)Agilent公司)；2 mL棕色色譜進(jìn)樣瓶(美國(guó)Agilent公司)；5 mL一次性塑料醫(yī)用注射器(康友牌)；0.22 μL微孔濾膜(PALL)等。

主要試劑：99.8%色譜純正已烷(Aladdin)；C7-C40正構(gòu)烷烴混合標(biāo)樣(Sigma-Aldrich)；C18正構(gòu)烷烴標(biāo)樣(Dr. Ehrenstorfer)等。

1.3 水椰八角鐵甲成蟲表皮浸提物樣品的制備

分別選取5頭羽化1 d、5 d、10 d和15 d的水椰八角鐵甲雌成蟲或雄成蟲，先用液氮迅速冷凍2 min致死，然后用超純水清洗3遍，再用濾紙吸干水分。其中，15日齡為該蟲的性成熟階段(張翔, 2015)。將處理過(guò)的5頭試蟲作為一個(gè)樣品放入2 mL色譜進(jìn)樣瓶?jī)?nèi)，加入1 mL色譜純正己烷浸泡10 min。將提取液轉(zhuǎn)移至另一個(gè)2 mL進(jìn)樣瓶中，再用套上0.22 μL微孔濾膜的5 mL一次性塑料醫(yī)用注射器過(guò)濾至第3個(gè)2 mL進(jìn)樣瓶中。最后將含有表皮浸提物的2 mL進(jìn)樣瓶置于通風(fēng)櫥內(nèi)，用純N2低溫蒸發(fā)2 min，待正己烷蒸發(fā)完全后再加入200 μL含有正十八烷(100 ppm)內(nèi)參的正己烷，定量后清洗瓶壁，置于-20℃中保存?zhèn)溆谩６筮M(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)，以定性鑒定和定量分析水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏慕M成成分及其含量。每種處理進(jìn)行5次生物學(xué)重復(fù)。

1.4 儀器分析條件

GC-MS升溫條件如下：起始溫度50℃，保持2 min，然后以23℃/min的速率升至280℃，再以2 ℃/min的速率升至310℃，保持10 min，整個(gè)程序共37 min。以高純氦氣作為載氣，流速為1 mL/min，柱壓為7.652 psi。電子轟擊離子源(EI)的電子能量70 eV，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度為150℃。進(jìn)樣口溫度290℃，采取不分流模式。質(zhì)譜掃描范圍為m/z 40～650。GC與MS之間連接溫度為300℃，溶劑延遲2 min。

1.5 數(shù)據(jù)分析

1.5.1表皮碳?xì)浠衔锏亩ㄐ苑治?/p>

首先通過(guò)氣相色譜的分離，得到水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏目偵V圖和各分離組分的出峰保留時(shí)間，然后按照Kovts(1965)的方法計(jì)算各組分的科瓦茨保留指數(shù)(Kovts Index, KI)。將獲得的質(zhì)譜圖離子碎片和各組分的保留時(shí)間與C7-C40標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間進(jìn)行比對(duì)，在NIST11數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索，初步確認(rèn)表皮碳?xì)浠衔锏慕Y(jié)構(gòu)。同時(shí)也將保留指數(shù)、特征離子峰和荷質(zhì)比等參數(shù)信息與已發(fā)表文獻(xiàn)所提供的表皮碳?xì)浠衔镞M(jìn)行比對(duì)(Gohetal., 1993; 雷妍圓等, 2017)，從而確定水椰八角鐵甲表皮碳?xì)浠衔锏姆N類。

1.5.2表皮碳?xì)浠衔锏亩糠治?/p>

根據(jù)水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏目偵V圖，分別對(duì)每一種表皮碳?xì)浠衔锏某龇迕娣e進(jìn)行積分，獲得相應(yīng)的各組分峰的面積(峰面積或峰高與組分的含量成正比)，再除以同條件下正十八烷內(nèi)參的積分面積來(lái)得到相對(duì)面積比率。將所有相對(duì)面積比率乘以內(nèi)參正十八烷的含量即得每種碳?xì)浠衔锏慕^對(duì)含量，以此作為試蟲表皮碳?xì)浠衔锘旌衔镏懈鹘M分的定量指標(biāo)。其中，正十八烷絕對(duì)含量減去內(nèi)參含量等于水椰八角鐵甲自身的含量。

1.5.3不同日齡和不同性別的水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏慕M成比較

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析利用SPSS 21.0軟件(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)進(jìn)行。其中，相同性別不同日齡的水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锝^對(duì)含量間的差異顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析(One-way ANOVA)和Tukey HSD多重比較的方法，而對(duì)相同日齡的水椰八角鐵甲雌成蟲和雄成蟲之間表皮碳?xì)浠衔锝^對(duì)含量的差異性比較則采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)(independent-samplettest)進(jìn)行。顯著性水平α均為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏姆N類

不同日齡和不同性別的水椰八角鐵甲成蟲的表皮碳?xì)浠衔镌诮M分上不存在差異，皆含有相同種類的正構(gòu)烷烴、單甲基烷烴、多甲基烷烴、正構(gòu)烯烴、單甲基烯烴和環(huán)烷烴等共6大類21種碳?xì)浠衔铮鼈兊奶兼滈L(zhǎng)度從18到30不等(表1)。其中，正構(gòu)烷烴的種類在所有碳?xì)浠衔镏械恼急茸畲螅瑸?2.38%。其次是正構(gòu)烯烴和環(huán)烷烴，皆占所有碳?xì)浠衔锓N類的14.29%。種類最少的為單甲基烷烴(9.52%)、多甲基烷烴(4.76%)和單甲基烯烴(4.76%)等支鏈碳?xì)浠衔铩＿@一結(jié)果表明，水椰八角鐵甲成蟲的表皮碳?xì)浠衔镆哉龢?gòu)烷烴等含碳數(shù)為20～30不等的直鏈飽和烴為主。

表1 水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏慕M成成分Table 1 Components of cuticular hydrocarbons in Octodonta nipae adults

續(xù)表1 Continued table 1

2.2 不同日齡的水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锖康膭?dòng)態(tài)變化

在21種水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔镏校煌正g的雄蟲只有5種化合物的含量發(fā)生了顯著變化，分別是正二十四烷(F3,16=5.573，P<0.05)、正二十六烷(F3,16=13.336，P<0.01)、2-甲基十九烷(F3,16=6.902，P<0.05)、10-甲基二十烷(F3,16=6.245，P<0.05)和1-二十烯(F3,16=12.019，P<0.01)(圖1)。其中，正二十四烷(最高156.89 ng/5頭)、正二十六烷(最高878.69 ng/5頭)和1-二十烯(最高832.19 ng/5頭)的平均絕對(duì)含量于10日齡前皆不存在顯著差異，10日齡后開(kāi)始顯著上升，在15日齡性成熟時(shí)達(dá)到最大，此時(shí)相對(duì)含量分別為1.15%、6.42%和6.08%。而2-甲基十九烷和10-甲基二十烷在不同日齡間的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律一致，它們的含量在剛羽化時(shí)(1日齡)最高，平均絕對(duì)含量分別為2 189.64 ng/5頭和2 668.15 ng/5頭，相對(duì)含量分別為15.35%和18.70%，隨后開(kāi)始顯著下降，5日齡、10日齡和15日齡之間沒(méi)有顯著差異。

圖1 水椰八角鐵甲雄性成蟲存在差異的表皮碳?xì)浠衔锏慕^對(duì)含量在不同日齡之間的變化Fig.1 Changes of the absolute content of cuticular hydrocarbons with significant difference in different ages of Octodonta nipae male adults注：圖中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。不同的小寫字母表示相同的表皮碳?xì)浠衔镌诓煌正g的成蟲中的絕對(duì)含量存在顯著差異(P<0.05)。下圖同。Note: Data are shown as mean±standard error (SE). Different small letters indicate that there are significant differences to absolute contents among adults of different ages with the same cuticular hydrocarbons. The same below.

然而，不同日齡的水椰八角鐵甲雌性成蟲之間含量發(fā)生顯著變化的表皮碳?xì)浠衔锕灿?2種，分別是正二十烷(F3,16=19.149，P<0.001)、正二十一烷(F3,16=5.391，P<0.05)、正二十三烷(F3,16=6.222，P<0.05)、正二十四烷(F3,16=7.274，P<0.05)、正二十六烷(F3,16=7.274，P<0.05)、正二十八烷(F3,16=6.758，P<0.05)、正三十烷(F3,16=4.799，P<0.05)、2-甲基十九烷(F3,16=5.391，P<0.05)、2,6,10,15-四甲基二十一烷(F3,16=12.350，P<0.01)、1-二十烯(F3,16=90.392，P<0.001)、反式-10-二十一烯(F3,16=8.388，P<0.01)和5-甲基-5-順式-二十二烯(F3,16=4.769，P<0.05)(圖2)。其中，在剛羽化(1 d)至性成熟(15 d)期間，正二十烷、正二十一烷、正二十三烷、正二十六烷、2-甲基十九烷、2,6,10,15-四甲基二十一烷、1-二十烯和反式-10-二十一烯的含量的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)基本相似，雖然這些化合物的含量在羽化5 d、10 d和15 d的雌成蟲之間不存在顯著差異，但是皆顯著低于1日齡時(shí)的含量，即它們的平均絕對(duì)含量和相對(duì)含量在剛羽化時(shí)最高，分別是854.09 ng/5頭(6.15%)、1 282.67 ng/5頭(9.24%)、824.91 ng/5頭(5.94%)、831.68 ng/5頭(5.99%)、1 455.24 ng/5頭(10.48%)、1 560.58 ng/5頭(11.24%)、846.09 ng/5頭(6.09%)和888.06 ng/5頭(6.40%)。 與1日齡(137.15 ng/5頭)相比，5日齡(21.69 ng/5頭)和15日齡(13.64 ng/5頭) 表皮正二十四烷的平均絕對(duì)含量皆顯著降低。而正二十八烷的含量在10日齡時(shí)才開(kāi)始顯著低于1日齡時(shí)的含量，平均絕對(duì)含量分別是75.75 ng/5頭和456.17 ng/5頭，相對(duì)含量分別為2.11%和3.29%。此外，正三十烷和5-甲基-5-順式-二十二烯的絕對(duì)含量只有在羽化1 d(分別是100.83 ng/5頭和185.60 ng/5頭)和羽化10 d(分別是21.91 ng/5頭和26.58 ng/5頭)之間存在差異。

圖2 水椰八角鐵甲雌性成蟲存在差異的表皮碳?xì)浠衔锏慕^對(duì)含量在不同日齡之間的變化Fig.2 Changes of the absolute content of cuticular hydrocarbons with significant difference in different ages of Octodonta nipae female adults

2.3 不同性別的水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锖康牟町?/h3>

雖然性成熟的水椰八角鐵甲雌雄成蟲之間表皮正二十二烷(t8=-2.259，P>0.05)、正二十三烷(t8=-2.649，P>0.05)、正二十五烷(t8=-1.041，P>0.05)、正二十七烷(t8=-0.411，P>0.05)、正二十八烷(t8=-0.758，P>0.05)、正二十九烷(t8=-1.218，P>0.05)、正三十烷(t8=-2.007，P>0.05)、2,6,10,15-四甲基二十一烷(t8=-1.596，P>0.05)、反式-10-二十一烯(t8=-0.847，P>0.05)、5-甲基-5-順式-二十二烯(t8=-1.911，P>0.05)、環(huán)二十四烷(t8=-1.105，P>0.05)、環(huán)十八烷(t8=-1.034，P>0.05)和環(huán)三十烷(t8=-1.920，P>0.05)的含量不存在顯著差異，但是正二十烷(t8=-3.608，P<0.05)、正二十一烷(t8=-4.996，P<0.05)、正二十四烷(t8=-6.418，P<0.01)、正二十六烷(t8=-4.113，P<0.05)、2-甲基十九烷(t8=-3.130，P<0.05)、10-甲基二十烷(t8=-2.660，P<0.05)、1-二十烯(t8=-8.152，P<0.01)和1-二十二烯(t8=-4.745，P<0.05)等8種化合物的含量皆差異顯著(圖3)。與性成熟的雌蟲相比，性成熟的雄蟲表皮正二十烷、正二十一烷、正二十四烷、正二十六烷、2-甲基十九烷、10-甲基二十烷、1-二十烯和1-二十二烯的平均絕對(duì)含量分別顯著升高1.31、2.62、10.50、2.97、1.35、1.35、5.66和4.32倍。這些結(jié)果表明，水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏暮烤哂行詣e二態(tài)性。

圖3 性成熟的水椰八角鐵甲雌雄成蟲的表皮碳?xì)浠衔锏慕^對(duì)含量Fig.3 Absolute content of cuticular hydrocarbons in mature male and female of Octodonta nipae adults注：圖中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。星號(hào)表示雌雄成蟲之間差異顯著(*，P<0.05；**，P<0.01)。Note: Data are shown as mean±standard error (SE). Asterisks indicate significant difference between male and female (*, P<0.05; **, P<0.01).

3 結(jié)論與討論

據(jù)前人報(bào)道，不僅黑腹果蠅Drosophilamelanogaster表皮7-二十三烯等直鏈烯烴(Scott, 1986)、刺舌蠅Glossinamorsitans表皮19,23-二甲基-1-三十三烯等甲基烯烴(Carlson and Schlein, 1991)、隱翅蟲Aleocharacurtula表皮15,19-二甲基三十七烷等甲基烷烴及順式-9-二十一烯等直鏈烯烴(Peschke and Metzler, 1987)和意大利蜜蜂Apismellifera表皮正十六烷等直鏈烷烴(Breed and Stiller, 1992)等多種碳?xì)浠衔锏暮烤诖菩院托坌灾g存在顯著差異，而且昆蟲也可以通過(guò)調(diào)控這些特異性表皮碳?xì)浠衔锏暮铣捎绊憘€(gè)體的交配行為，從而有利于個(gè)體的種群識(shí)別和配偶選擇(Peschke, 1987)。而本文研究結(jié)果表明，雖然日齡、性別和性成熟與否等昆蟲個(gè)體因素對(duì)水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏姆N類沒(méi)有影響，但是會(huì)影響正二十烷、正二十一烷、正二十三烷、正二十四烷、正二十六烷、正二十八烷、正三十烷、2-甲基十九烷、10-甲基二十烷、2,6,10,15-四甲基二十一烷、1-二十烯、反式-10-二十一烯、1-二十二烯和5-甲基-5-順式-二十二烯等多種化合物的含量。因此，不同日齡的水椰八角鐵甲成蟲表皮碳?xì)浠衔锏膭?dòng)態(tài)變化及性別差異可以為該蟲個(gè)體的種內(nèi)識(shí)別和配偶選擇提供化學(xué)信號(hào)和線索。然而這些絕對(duì)含量和相對(duì)含量發(fā)生顯著改變的表皮碳?xì)浠衔锏姆N類是否是誘導(dǎo)水椰八角鐵甲性成熟個(gè)體產(chǎn)生性選擇行為的關(guān)鍵因子目前還不清楚，有待進(jìn)一步證實(shí)。由于日齡和性別等個(gè)體因素引起該蟲的表皮碳?xì)浠衔锏牟町愔饕w現(xiàn)在物質(zhì)的含量上，而種類穩(wěn)定，說(shuō)明個(gè)體因素不影響利用表皮碳?xì)浠衔镞M(jìn)行近緣種的識(shí)別，可以提取種內(nèi)共有物質(zhì)作為種的特征峰，同時(shí)它們可以作為標(biāo)記性化合物，通過(guò)建立不同個(gè)體條件下水椰八角鐵甲的指紋圖譜，為在檢驗(yàn)檢疫監(jiān)測(cè)與防控工作中快速鑒定該蟲的日齡、性別及其性成熟狀態(tài)提供數(shù)據(jù)支持，從而明確該蟲的發(fā)生情況。

昆蟲剛羽化時(shí)為成蟲表皮碳?xì)浠衔锏暮铣沙跗冢藭r(shí)這些化合物的碳鏈長(zhǎng)度偏短且以結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的烷烴為主，而羽化后24 h才進(jìn)入主要合成期(Lockey, 1988)。隨著昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育，表皮碳?xì)浠衔飼?huì)經(jīng)過(guò)一系列脫羧反應(yīng)從而延長(zhǎng)碳鏈，并且在去飽和酶的作用下迅速增加不飽和烴類的含量(Flaven-Pouchonetal., 2016)。由本研究可知，水椰八角鐵甲雄性成蟲各類表皮碳?xì)浠衔锏暮炕九c這一合成規(guī)律相吻合，但是雌性成蟲表皮碳?xì)浠衔镌诓煌正g間的動(dòng)態(tài)變化似乎比雄性更為復(fù)雜，據(jù)此猜測(cè)雌性成蟲對(duì)于表皮碳?xì)浠衔锞哂懈泳?xì)的合成調(diào)控機(jī)制，這可能在雌性的配偶選擇或生殖過(guò)程中發(fā)揮重要作用。同時(shí)，Weddle等(2012)發(fā)現(xiàn)，短翅灶蟋Gryllodessigillatus表皮碳?xì)浠衔锏姆N類和含量存在明顯的性別二態(tài)性，這與本文在水椰八角鐵甲上的研究結(jié)果相一致。此外，環(huán)境因素和遺傳因素都可能影響到雌雄成蟲表皮碳?xì)浠衔锏姆N類和含量(Weddleetal., 2012)。所以，水椰八角鐵甲雌雄成蟲表皮碳?xì)浠衔锖考捌洳町愂欠袷黔h(huán)境因素和遺傳因素共同作用的結(jié)果有待進(jìn)一步確定，它們對(duì)表皮碳?xì)浠衔锖铣傻挠绊憴?quán)重也有待進(jìn)一步研究。然而，雌雄兩性表皮碳?xì)浠衔锏谋碛^遺傳差異所引起的行為偏好可以作為未來(lái)研究的熱點(diǎn)，這可以為水椰八角鐵甲的交配策略提供科學(xué)依據(jù)。