紅芪多糖1聯合吉非替尼對肺癌A549細胞凋亡的作用及機制探討

閆立萍 劉華 王小軍 羅天雯

甘肅省人民醫院呼吸與危重癥醫學科,蘭州730000通信作者：劉華,Email:13919965016@163.com

分子靶向治療是目前臨床針對晚期非小細胞肺癌尤其是存在基因突變的肺腺癌的最新治療手段。2018年我國最新版肺癌治療指南中將酪氨酸激酶抑制劑 (tyrosine kinase inhibitors,TKI)藥物單用或聯合含鉑藥物化療作為有EGFR 基因突變腺癌患者(Ⅱ、Ⅲ期)的一線治療方案。在眾多TKI藥物中,吉非替尼是上市最早、療效肯定、經典型TKI藥物代表。然而,早期出現耐藥是TKI藥物臨床治療的硬傷。由此,提高TKI藥物敏感性、降低耐藥性是目前聯合用藥,尤其聯合中藥制劑治療的探索方向。紅芪多糖 (hedysarum polysaccharides,HPS)是甘肅省道地藥材,在前期研究中,顯示HPS具有顯著抑制腫瘤細胞增殖、誘導腫瘤細胞分化和凋亡的作用[1-3]。HPS由3種單糖組成,其發揮主要作用的組份為HPS1。本研究旨在探討HPS1 聯合吉非替尼誘導肺癌細胞凋亡,以及調節Bax和Bcl-2蛋白表達的機制,以期為中藥聯合抗腫瘤研究提供新的思路和數據支持。

1 材料與方法

1.1 細胞株及藥物 人肺腺癌A549細胞株購自武漢大學保藏中心。HPS1由蘭州大學藥學院提取并鑒定,為白色絮狀粉末,蛋白含量為0.2%,相對分子質量為9.4×104,為均一多糖。吉非替尼購自 英 國 阿 斯 利 康 公 司,DMSO 溶 解 至500 mmol/L,置-20 ℃冰箱保存備用。

1.2 試劑 DMEM (美國Gibco公司),胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司),胰酶(美國Difco公司),TRIzol提取試劑盒、反轉錄試劑盒和實時熒光定量PCR 試劑盒 (日本Ta KaRa公司),MTT (美國Amresco公司),Annexin Ⅴ-FITC/PI凋亡檢測試劑盒 (美國Beckman Coulter公司),實時熒光定量PCR 引物[寶生物工程 (大連)有限公司]。……