不同提取方法對益氣復脈膠囊中五味子醇甲和五味子乙素含量的影響

王立鵬

摘要：目的 考察不同溶媒對益氣復脈膠囊中五味子醇甲和五味子乙素含量的影響。方法 用水提-乙醚萃取、乙酸乙酯超聲、甲醇超聲提取。結果? 五味子醇甲在0.2084μg～2.084μg范圍內峰面積值與進樣量呈良好的線性關系（r=0.9998）其平均回收率為100.24%，RSD為0.91%;五味子乙素在0.1996μg～1.996μg范圍內峰面積值與進樣量呈良好的線性關系（r=0.9997）其平均回收率為99.77%，RSD為0.69%。結論 其中用甲醇超聲提取效率最高，該方法簡便、準確，分離效果好。

關鍵詞：益氣復脈膠囊;五味子醇甲;五味子乙素;HPLC

益氣復脈膠囊由紅參、麥冬、北五味子等藥味加工而成。具有益氣復脈、養陰生津;改善冠狀動脈循環、降低心肌耗氧量之功效。用于氣陰兩虧，心悸氣短，脈微自汗，冠心病、心絞痛和衰老等癥[1]。北五味子具收斂固澀、益氣生津、補腎寧心之功效[2]，采用不同提取溶媒，用HPLC法測定益氣復脈膠囊中五味子醇甲和五味子乙素的含量。

一、 儀器與試藥

（一）儀器

高效液相色譜儀LC-20AT，SPD-20A紫外檢測器;電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司，型號BS224S，d=0.1mg）微量分析天平（湘儀天平儀器廠，型號TG332A，d=0.01mg）

（二）試藥

五味子醇甲對照品（110857-200709）、五味子乙素對照品（110765-200804）均由中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測定用;甲醇為色譜純（SIGMA公司）;其余試劑為分析純，水為超純水;益氣復脈膠囊為安康正大制藥有限責任公司生產（批號 20130104，20130306，20130512）

二、 方法與結果

（一）色譜條件

色譜柱： Inertsil ODS-SP（4.6x150mm，5μm），柱溫： 30℃，流動相：甲醇-水（63：37），流速：1.0mL.min-1，檢測波長：254nm。精密吸取對照品溶液、供試品溶液10μL注入色譜儀。理論板數按五味子醇甲峰計，不得低于3000。圖譜如下：

（二）對照品溶液的制備

分別精密稱取五味子醇甲和五味子乙素對照品適量，加甲醇溶解并稀釋至刻度，制成每1mL含五味子醇甲20.84μg，含五味子乙素19.96μg的混合對照品液。

（三） 供試品溶液的制備

1.提取溶劑及提取方法的考察? 分別用乙酸乙酯加熱回流1h、乙酸乙酯超聲處理30min、乙醚超聲處理30min及甲醇超聲處理30min，結果發現甲醇超聲提取最為完全，故選擇甲醇作為提取溶劑。

2. 制備方法? ?取本品20粒，傾出內容物，稱取約0.75g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL，超聲處理30min，濾過，取續濾液，微孔濾膜濾過，即得。

（四） 線性關系的考察

精密稱取五味子醇甲對照品10.42mg、五味子乙素對照品9.98mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取2、4、6、8、10和20μL，在上述色譜條件下測得峰面積。以濃度為橫坐標（X）以峰面積為縱坐標（Y）繪制標準曲線，并對測得數據進行回歸分析，得回歸方程：五味子乙素? Y=266091.7X+1469.1，r=0.9997。結果表明五味子乙素在0.1996～1.996μg范圍內呈良好的線性關系。五味子醇甲 Y=110171.6X+77.33，r=0.9998。結果表明五味子醇甲在0.2084～2.084μg范圍內呈良好的線性關系。

（五）精密度試驗

精密吸取同一混合對照品溶液10μL，連續進樣6次，分別以五味子醇甲和五味子乙素峰面積計算，RSD分別為0.51%和0.78%。

（六） 穩定性試驗

取供試品溶液分別在0、4、8、12、16、20、24h進樣，五味子醇甲和五味子乙素峰面積RSD分別為0.21%和0.46%，表明樣品在24h內穩定。

（七）加樣回收率試驗

取已知含量的益氣復脈膠囊樣品（20130104），研細，精密稱取約0.38g，平行稱樣6份，分別精密加入五味子醇甲和五味子乙素混合對照品溶液適量，精密加入甲醇適量，使加入液體總量為20mL，超聲處理30min，濾過，取續濾液，微孔濾膜濾過，即得。按供試品溶液方法進樣，測定含量，計算回收率。

（八） 樣品測定

取益氣復脈膠囊3批（批號 20130104，20130308，20130612），按2.3項下方法處理，進樣測定，結果見表3。根據測定結果，暫定其每粒含五味子醇甲及五味子乙素分別不得低于0.3mg和0.04mg。

三、討論

原質量標準為水溶解后取續濾液，用乙醚萃取5次，萃取液用水洗滌2次，水洗液再用乙醚萃取1次，揮干乙醚液，60～80℃減壓干燥，殘渣加甲醇溶解并轉移定容至10mL量瓶。該方法操作步驟多，易造成目標成分損失，故在制備供試品溶液時，我們對提取方法及提取溶媒分別進行了考察，分別對乙酸乙酯回流1h，甲醇超聲30min，乙酸乙酯超聲30min，乙醚超聲30min進行了對比。結果表明：甲醇超聲30min提取率較高，五味子醇甲及五味子乙素的提取率比其他提取方法分別高30%和100%以上。且有較好的分離度;乙醚超聲提取30min次之;乙酸乙酯回流1h和乙酸乙酯超聲30min提取率較低，而且二者結果接近，故選擇甲醇超聲30min的提取方法最為合理。

參考文獻：

[1]《國家藥品監督管理局 藥品標準 新藥轉正標準》[S].第18冊.194-195

[2]中國藥典2010年版一部[S].一部.2010：61-62