金昌地區無償獻血者血液樣本血清學和核酸檢測情況分析

楊靜 梁丹丹

【摘要】目的：了解金昌地區無償獻血者血液樣本血清學檢測和核酸檢測情況。方法：分別用2種ELISA試劑對我市2017年至2019年14038份無償獻血者樣本進行HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP檢測，對ELISA檢測陰性的樣本檢測HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA。對HBsAg-/HBV-DNA+獻血者標本進行血清學補充試驗。結果：14038份血液樣本ELISA檢測共檢出陽性188份，陽性率為1.339%，剩余13850份ELISA陰性樣本核酸檢測檢出陽性26份，均為HBV-DNA+。26份HBsAg-/HBV-DNA+樣本血清學補充試驗中有24份樣本抗-HBc呈陽性反應（R），陽性率占92.31%，HBsAg和HBeAg均為陰性。結論：金昌地區無償獻血者血清學檢測陽性率較高，獻血人群中有較高的梅毒攜帶者，應采用金標試劑進行獻血前篩查。獻血者血液樣本HBsAg經ELISA檢測合格后，通過輸血傳播HBV風險仍然較高（188/10萬），選擇ELISA聯合核酸檢測模式能有效降低血液病毒窗口期、OBI等輸血殘余風險。

【關鍵詞】血清學檢測;核酸檢測;無償獻血

[中圖分類號]R512.62 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249（2020）15-00-02

《血站技術操作規程》（2019版）將血液檢測策略由原來的兩遍酶免修改為HIV、HBV、HCV應至少采用核酸和血清學試劑各檢測一次，對于HIV、HBV、HCV酶免檢測反應性標本可不再進行核酸檢測[1]。本論文對金昌地區無償獻血者血液樣本血清學檢測和核酸檢測情況進行了統計和分析，目的皆在通過數據充分了解樣本檢測質量，研究制定更為合理的血液檢測策略，在降低血液報廢率的同時進一步提高血液檢測質量。

1 材料與方法

1.2材料 收集我市2017年至2019年無償獻血者血液樣本14038份，所有樣本經HBsAg膠體金試劑（英科新創（廈門）科技有限公司）和ALT（QL1000多通道生化分析儀）初篩合格。

1.2試劑 ELISA檢測HBsAg、抗-HCV、抗-TP分別由北京萬泰生物藥業和英科新創（廈門）科技有限公司提供。HIV抗原/抗體由BIO-RAD和北京萬泰生物藥業提供;核酸檢測試劑（PCR熒光法）由上海浩源生物科技有限公司提供;質控品均由北京康徹斯坦生物提供。所用試劑和質控血清均在有效期內使用。

1.3儀器 ELISA采用Uranus AE120全自動酶免分析儀（深圳愛康）;核酸檢測設備為JANUAS核酸純化儀，EZ Bead核酸提取儀，ABI7500熒光定量PCR儀。

1.4血清學檢測 使用兩種廠家試劑對所有樣本進行HBsAg、抗HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP檢測，雙試劑檢測均為陰性則判定為血清學（ELISA）檢測陰性;雙試劑陽性或單試劑為陽性及灰區則判定為血清學（ELISA）檢測陽性。

1.5核酸檢測 采用熒光PCR法對ELISA檢測陰性標本進行核酸檢測，先用8份樣本合并為1個Pool的方式檢測HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA，合并檢測結果出現反應性時，挑出對應Pool中的樣本進行單人份檢測，結果為陽性者判定為核酸檢測陽性。

1.6血清學補充檢測 對核酸檢測HBV-DNA+者，血漿袋取樣后外送定量檢測HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc。

2 結果

2.1血清學（ELISA）檢測結果 14038份樣本HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP血清學檢測，不合格率為1.339%，具體檢測結果見表1。

2.2核酸檢測結果 ELISA檢測均陰性的13850份樣本核酸檢測檢出陽性26份，其中HBV-DNA+26份，陽性率為0.188%，HCV RNA 0份，HIV RNA 0份。

2.3核酸檢測陽性樣本血清學補充試驗結果 26份HBsAg-/HBV-DNA+乙肝五項結果中，24份樣本抗-HBc呈陽性反應（R），抗-HBc陽性率為92.31%，檢測結果見表2。

3 討論

14038份樣本HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP血清學檢出陽性188份，不合格率為1.339%，高于何輝[2]報道的0.64%，其中抗-TP陽性率最高，為0.442%，說明金昌地區獻血人群中梅毒攜帶率人數較多。其次是乙型肝炎病毒（HBV）感染數量較多，陽性率為0.399%，目前乙型肝炎病毒酶免檢測試劑主要用于HBsAg的檢測，在隱匿性感染、血清轉換前窗口期等情況下易發生HBV漏檢。第三為丙型肝炎，陽性率為0.370%，高于謝家日[3]報道的0.16%，低于涼山地區0.53%的抗HCV陽性率，我國約有3.2%人口感染HCV，感染人數高除與獻血人群結構有關外，還與檢測試劑有關，采供血機構用于血液篩查的診斷試劑靈敏度高而特異性又相對較低，因而存在相當比例的假陽性，尤其是ELISA檢測單試劑反應性標本，假陽性率更高[4]。第四為艾滋病，此次分析結果顯示金昌地區獻血者艾滋病陽性率為0.128%，與實際確認陽性率平均為0.142‰（2/14038）比較，低于全國HIV感染率，這與當地的低流行因素有關，但假陽性率偏高，應進一步分析原因。

因血清學抗原抗體檢測“窗口期”較長，而核酸檢測能顯著縮短病毒檢測的窗口期，提高病毒的檢出率，降低輸血傳播病毒的殘余危險度[5]，本次核酸檢測結果中，13850份ELISA檢測陰性的血液樣本采用核酸檢測后，檢出陽性樣本26份，均為HBV-DNA+，該比例較高（188/10萬），說明ELISA聯合核酸檢測可優勢互補，能降低因ELISA“窗口期”漏檢而導致的經輸血傳播HBV的風險，有助于進一步提高血液檢測質量。

血清學補充試驗中，26例HBsAg-/HBV-DNA+樣本有24例抗-HBc呈陽性反應（R），抗-HBc陽性率占92.31%，其中2例（7.69%）僅抗-HBc陽性;6例（23.08%）抗-HBs和抗HBc同時呈陽性反應;11例（42.31%）抗-HBe和抗HBc同時呈陽性反應;5例（19.23%）抗-HBs、抗HBe、抗HBc均呈陽性反應。抗-HBcAb陽性的獻血者不宜獻血，研究發現這部分獻血者處于感染窗口期或屬于隱匿性HBV感染。1例（3.85%）抗-HBs呈陽性反應，此類獻血者可能之前注射過疫苗但仍被病毒感染。另有1例（3.85%）為HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc均陰性，是否為“窗口期”和或乙肝“隱匿性”感染，還需對獻血者進行后續追蹤檢測[6]，HBsAg和HBeAg均為陰性。

綜上所述，我們應增加獻血前梅毒快速篩查，降低源頭不合格血液的采集，同是應選擇聯合檢測模式對獻血者血液標本進行檢測，以降低經輸血傳播病原體風險發生率。

參考文獻

[1] 趙艷梅， 李艷， 史志旭， 畢星秀等無償獻血者標本血清學和核酸檢測情況分析臨床血液學雜志[J]. 2019. 32（8）： 604-608.

[2] 何輝. 韶關市無償獻血者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP檢測結果分析[J]. 中國國境衛生檢疫雜志， 2019， 42（01）： 56-58.

[3] 謝家日. 南寧地區無償獻血人群HCV篩查陽性情況分析[J]. 檢驗醫學與臨床， 2019， 16（15）： 2158-2160-2163.

[4] 王瑞， 葛紅衛， 黃力勤， 等. 使用相同抗-HCV ELISA試劑的6家血站實驗室灰區設定分析[J]. 中國輸血雜志， 2018， 31（2）： 105-109.

[5] 王志宏， 余東娟. 血清學與核酸檢測對獻血者血液篩查結果的對比分析[J]. 廣西醫科大學學報， 2017， 34（3）： 452-454.

[6] 何水珍， 蘇成豪， 沈理通， 等. 廈門市自然人群中乙型肝炎病毒隱匿性感染狀況調査[J]. 中華預防醫學雜志， 2015， 49（2）： 132-136.