卡式微柱凝膠試驗在臨床輸血檢驗中的那些事兒

文丨劉治紅（四川省南充市身心醫院）

現代社會經濟的發展，雖然提升了人們的生活質量與幸福感，但隨之而來的各種事故也對人們的生命造成了極大的威脅，重傷患者往往出現大量失血，這就使得輸血成為急救中最為關鍵的環節，而安全、快速的輸血也能夠為患者的治療及預后提供保障，減少醫患糾紛的發生。當然，也并不只是重傷患者需要輸血，一些危重癥患者在治療中也需要輸血，這就對輸血安全提出了更高的要求。

狹義的輸血是指輸注全血，而廣義的輸血則是輸注包括全血在內的各種由血液制備的成分，嚴格意義上來說，造血干細胞移植也是一種特殊的輸血。輸血在人類醫療史上已經有超過三百年的歷史，而在1900年奧地利醫學家Landsteiner博士發現了人類ABO血型及凝集規律，為現代輸血提供了堅實的病理生理學基礎，在隨后的20年里，其他醫生又逐步建立了血液抗凝和交叉配血技術，輸血成為了一種常規治療方法，在所有醫院都可以進行。有了ABO血型及凝集規律后，輸血變得更為安全，但隨著更多血型系統被發現，單純的ABO同血型輸血已經不能夠滿足現代輸血的安全要求。因此，在輸血前對供血者與受供者進行交叉試驗是保證輸血安全的常見方式，傳統的輸血檢驗方式為鹽水法，但其往往只能檢測出不相匹配的鹽水抗體即IgM抗體，但無法檢測出免疫同種抗體IgG抗體，有一定幾率會導致交叉配血假陰性結果，使臨床輸血存在較大安全隱患。凝聚胺試驗也是常用的輸血檢驗方式，雖然其敏感性較高，但操作步驟較繁瑣，且易受到凝集、肝素等因素的影響，也不具備較高的臨床應用價值。

在20世紀90年代，微柱凝膠試驗走入大眾視野，它是將抗原抗體反應與凝膠分子篩技術相結合，其本質就是一種凝血試驗，我們用較為簡單的方式解釋其原理：紅細胞在微柱凝膠管中與相應抗體結合形成紅細胞凝集團塊，在分子篩和離心力的作用下，凝集團塊會位于膠表面或膠中，而未與抗體結合的紅細胞則會通過分子篩沉到微柱管的尖底部。卡式微柱凝膠試驗操作相對簡便，需要準備卡式微柱凝膠免疫試劑卡，觀察凝膠卡外觀，如有干膠、雜質、氣泡不可使用，將卡放置室溫（18-25℃）平衡，再用專用離心機離心5分鐘。之后進行紅細胞懸液制備，用EDTA抗凝管采集受血者靜脈血，供血者標本為枸櫞酸鹽抗凝全血，全血量2～3mL，3000r/min 離心3min或3500r/min 離心將受血者與供血者的血漿與紅細胞分離，離心后無溶血、無凝塊及明顯乳糜。各取壓積紅細胞10μl，加入含有1ml低離子強度的鈉溶液中，顏色應為淡紅色且沒有絮狀物。之后進行操作，首先需要在試管上做好供血者與受血者的信息標注，注意分清主側管與次側管，將50μl獻血者紅細胞懸液與50μl受血者血漿先后加入主側管中，將50μl受血者紅細胞懸液與50μl獻血者血漿先后加入次側管中，加入樣品后的試劑卡，在37℃的環境下孵育15min，使用專用離心機離心5分鐘（900rpm2分鐘，1500 rpm3分鐘），取出肉眼觀察結果。若紅細胞完全沉降于凝膠管底部，表明受血者與獻血者無對應的抗原抗體，此為陰性結果；若紅細胞抗原與相應抗體在微柱凝膠中形成的特異性抗原抗體復合物浮在凝膠表面或膠中，發生在主側管表明受血者有針對獻血者紅細胞抗原相對應的抗體，發生在次測管表明獻血者血漿中有針對受血者紅細胞抗原相對應的抗體，即交叉配血不相合，此為陽性結果。

就檢測結果而言，卡式微柱凝膠交叉配血試驗的一次性正確率能夠達到95%以上，甚至有部分可以達到100%，而作為比較的鹽水法往往在75%-85%之間，兩種檢測方法的差距可以說是一目了然。除了檢測結果更為準確以外，卡式微柱凝膠試驗本身操作簡單，不需要進行洗滌，對陰性不需要再次確證試驗，能夠在檢驗程序上得到一定的簡化，使得臨床常規應用成為可能。與此同時，卡式微柱凝膠試驗還能夠多份樣本一次性離心處理，這就為大批量樣本檢測提供了可能。另外，卡式微柱凝膠試驗還具有標本用量少，檢測結果保存時間久，易于標準化、自動化操作等優點。當然，卡式微柱凝膠試驗也并非就沒有缺點，首先，卡式微柱凝膠試驗的成本較傳統的檢驗方式更高，出于經濟考慮并非首選，其次是卡式微柱凝膠試驗中的抗體篩查及配血過程需要進行孵育，這就使得檢驗時間有所延長，并不適用于緊急情況下的輸血。

卡式微柱凝膠試驗的檢驗結果相對更為準確，而為了保證這樣準確的檢驗結果，我們需要檢驗中注意標準化加樣、規范化操作，從而避免由于人為原因對檢驗結果的影響，其中按照要求準備標本，能夠防止溶血、纖維蛋白等影響檢驗結果，而按要求準備試劑卡，則能夠防止由于試劑卡問題影響檢驗結果。還需要注意的是，卡式微柱凝膠試驗中可能出現陰性對照孔假陽性的情況，那么首先需要觀察樣本，判斷其是否存在溶血、細胞黏連等情況，如果并非樣本問題，則需要了解患者的臨床信息，判斷其是否存在自身凝集、冷凝集等情況。必要時可以對細胞進行洗滌，重新選用試劑卡，按照標準流程進行重復檢驗。

本文寫到這里，我們已經了解，輸血并不是單純的將ABO血型相同的血液輸注到患者身體里那么簡單，在臨床輸血前，還需要進行輸血檢驗，才能夠保證輸血的安全性，而卡式微柱凝膠試驗具有操作簡單、敏感度高且準確率高的優點，臨床應用價值高。