流式細胞術在臨床檢驗中的應用研究

【摘要】：目的? 探究臨床檢驗中應用流式細胞術的作用價值。方法? 在2019年1月-2019年12月中采用多次嚴謹性的實驗來分析實驗數據，確保實驗的真實性、嚴謹性，通過資料回顧性分析，總結臨床檢驗中流式細胞術的可行性。結果? 最終實驗數據顯示，在臨床檢驗中應用流式細胞術，可以有效檢驗淋巴細胞亞群、腫瘤標志物、HLA-B27抗原、臨床微生物。結論? 臨床檢驗應用流式細胞術的價值顯著，現已在多個醫學領域中得到應用。

【關鍵詞】流式細胞術;臨床檢驗;應用價值

流式細胞術是借助流式細胞儀實現單細胞的定量分選、分析技術，該技術可以在短時間內分析數以萬計的細胞，在每個細胞中獲取的參數具有多樣性，將其應用于臨床檢驗中，具有方便快捷、高精度、準確性佳的優勢。現階段在臨床上流式細胞術可以檢測受染細胞內部、表面的病毒抗體，但是由于流失細胞術檢測多是單細胞，因此在進行受染細胞檢測時具有一定的局限性，多將其用于血液標本、尿液標本、灌洗液（支氣管）標本的檢驗中[1]。在整個檢驗的過程中，需要開展DNA-RNA的熒光標記工作，將蛋白探針、代謝的活性呈現出來，作為細胞定量分析最為先進的技術，現已成為臨床檢測的重要組成部分。本文重點探究臨床檢驗中應用流式細胞術的作用價值，以供有關人士參考，現將報道數據整理如下。

1.資料與方法

1.1一般資料

本文研究開展時間為2019年1月-2019年12月，在該時間段內收集流式細胞術的臨床檢驗資料，依據資料收集結果發現，流式細胞術檢驗技術為細胞分選、細胞定量分析，其用于實驗的細胞有很多，如腎上皮細胞、骨肉瘤細胞、乳腺癌細胞等。此次研究的實驗進行獲得了倫理委員會的批準。

1.2方法

首先，檢驗醫師需要進行細胞培養，其涉及到的工作步驟包括鋪板、細胞轉染、細胞分板放置、樣本上機制備、藥物刺激、細胞獲得、細胞處理、試劑配制等。在這個操作過程中，需要對細胞的數量加強控制，確保每瓶的細胞數在1X107之下，在細胞計數之前需要在鋪板環節分化細胞，如果所計數的細胞存在高密度的情況，為了確保計數的準確性，需要用試劑來稀釋細胞，使細胞倍數合理。具體在鋪板時需要在培養皿中置于合適數量的細胞，然后需要晃動培養皿，避免細胞出現聚集的情況，確保其分布的均勻性，在晃動培養皿時要注意以水平為方向，并且要注意動作的輕柔性，以免培養液灑出，在完成上述工作后，將培養箱作為細胞的盛放容器，對細胞進行轉染。

在細胞的轉染環節，首要操作是選擇適宜的染色劑，然后需要借助載體將基因質粒構建出來，當前臨床常用的載體為DEF-FN，在轉染之前需要檢查細胞密度，只有密度值在50%-60%之間時才可以開展轉染，當轉染時長超過12小時，需要以1：3的比例將細胞分板，在分板時主要以細胞密度為依據，確保最終的細胞密度處于30%[2]。

在選擇陽性對照物時，主要有兩種，即轉染質粒、藥物處理細胞等，細胞鋪板超過1天，開展藥物刺激，培養1天后對獲取的細胞進行處理，在收集培養液這一過程中，需要將適宜劑量的胰酶加入到相應規格板中，等待期消化完全后再開展胰酶的中和工作。在上述工作結束后，需要間隔4小時以上在冰箱等儲存容器中取出細胞樣本，之后用1XPBS進行清洗與混合，并將其置于水浴鍋中進行半小時的避光處理，從而有效完成細胞樣本的制備工作中。

處理分選樣本時，需要在細胞貼壁處進行相關的培養，在培養環節選擇細胞板規格在10cm，之后要充分消化培養酶，在細胞脫壁后，應該選擇5ml左右的培養液進行中和處理，確保細胞分散的均勻性，與此同時，需要進行轉染效率的測定工作，以測定結果為依據，合理選擇分選模式，對細胞濃度進行合理的調節，確保上樣速率的數值在每秒1000-3000個。

2.結果

本文調查結果顯示，流式細胞技術應用優勢體現在同時在單個細胞中獲取多個參數，定量對受染細胞進行檢驗，準確測定樣本中存在的病毒、病毒抗原，現階段流式細胞技術常用于淋巴細胞亞群、腫瘤標志物、HLA-B27抗原、臨床微生物等方面。

3.討論

腫瘤標志物的檢測主要是分析患者是否存在細胞癌變，主要是在檢測時，對腫瘤細胞DNA進行染色處理，分析其含量，掌握細胞增值能力，以其為依據對治療方案進行科學的制定。HLA—B27基因主要分析患者是否患有關節炎、脊柱炎，借助流式細胞術進行檢驗，需要采用CD3/HLA抗體，先將T淋巴細胞亞群測定出來，之后分析細胞表面HLA—B27的組織抗原，臨床微生物檢測有助于科學選取抗病菌藥物，降低細胞的耐藥性，主要是在檢測的過程中應用熒光染料，依據發光輕度來判斷。

綜上所述，流式細胞術在臨床檢驗中廣泛應用于淋巴細胞亞群、腫瘤標志物、HLA-B27抗原、臨床微生物等方面，有利于疾病的診斷與治療，因此流式細胞術值得臨床進一步應用與推廣。

參考文獻：

[1]李文波，李文華. 流式細胞術在臨床檢驗中的應用探究[J]. 影像研究與醫學應用，2018，2（19）：219-220.

[2]王師，張孟源，童能勝，張火兵. 流式細胞術在臨床檢驗中的應用[J]. 檢驗醫學與臨床，2017，14（06）：897-898+902.

作者簡介：李必生，男，1969年7月出生，四川南充人，漢族，本科，副主任技師，現為河北省醫學遺傳學會委員