高鹽短期攝食對小鼠出血時間、凝血時間、空腹血糖影響的實驗研究

陳良廣，楊 想，黃利娟，李耀強，楊建鋒，王彩冰

(1.右江民族醫學院2015級臨床醫學本科生，廣西 百色 533000；2.右江民族醫學院2016級臨床醫學本科生，廣西 百色 533000；3.右江民族醫學院應用生理研究室，廣西 百色 533000)

世界衛生組織建議每天鹽攝入量不超過5 g，但在中國五分之四被調查群體中的每天平均攝入鹽量為12.5 g，可見我國大部分人處在高鹽攝食狀態[1]。據文獻報道，長期高鹽攝食危害心、肝、腎，造成血壓升高，加重中風的危險[2-3]。經檢索，高鹽攝食對止血系統和凝血系統的影響尚未發現有文獻報道。本課題組建立高鹽攝食小鼠模型，觀察短期高鹽攝食對機體小鼠出血時間(Bleeding time，BT)、凝血時間(Coagulation time，CT)和空腹血糖(Fasting blood glucose，FBG)的影響，并與止血藥物酚磺乙胺的量[4]按體表面積換算成小鼠用量給大鼠灌胃作比較分析，探索短期高鹽攝食對機體止血系統和凝血系統及糖代謝的影響。

1 材料與方法

1.1實驗動物：健康昆明小鼠(KM小鼠)40只，體質量20～25 g，雌雄各半，由右江民族醫學院動物中心提供(實驗動物生產許可證：SCXK桂2017-0003；實驗動物使用許可證：SCXK桂2017-0004)，分籠飼養，日照12 h，室溫20～25℃，濕度50%～60%。

1.2藥品、試劑及器械：酚磺乙胺注射液(遂成藥業股份有限公司，批號：41801281)；0.9%NaCl注射液(青州堯王制藥有限公司，批號：2219040201)；海藻碘鹽(江西晶昊鹽化有限公司，批號：GB2721)；小鼠飼料(北京科澳協力飼料有限公司，批號：20190513)；羅康全TM活力型血糖檢測儀(德國羅氏診斷有限公司，型號：Accu-Chek Active)；羅康全活力型血糖測試紙(德國羅氏診斷有限公司，批號：23470633)。

1.3高鹽飼料的制備過程：取180 g和360 g海藻碘鹽分別加入6 kg的小鼠飼料混勻用少量蒸餾水攪拌，捏成手指頭大小的飼料條在陽光下曬干，分別制成3%和6%的高鹽小鼠飼料。

1.4動物分組、給藥、喂養：取KM小鼠40只，按FBG值隨機分四組：正常對照組、3%高鹽組、6%高鹽組均給予0.9%NaCl注射液灌胃，酚磺乙胺組給予30 mg/ml酚磺乙胺溶液灌胃，灌胃量按小鼠體質量10 ml/kg計算，1次/d；正常對照組和酚磺乙胺組給小鼠飼料喂養，3%高鹽組和6%高鹽組分別給予3%和6%的高鹽小鼠飼料喂養，各組小鼠自由飲水；連續4周。

1.5小鼠BT和CT的檢測：末次灌胃前禁食12 h、禁水2 h，末次灌胃30 min橫剪小鼠尾端約0.5 cm，每10秒用濾紙吸血一次，計算血液自行流出到自行停止的時間為小鼠BT。測定BT后擠出尾部一滴血拭去，再次擠出另一滴鮮血滴放玻片上，每10秒用清潔針頭從血滴邊緣向內輕挑1次，直至挑起血絲為止，計算血滴放玻片到挑起血絲的時間為小鼠CT。

1.6小鼠FBG的檢測：在檢測BT后，將血糖測試紙安放在血糖檢測儀的檢測區域，從小鼠尾端擠出血液滴放在血糖測試區域，記錄血糖檢測儀顯示的血糖濃度值。

2 結果

2.1各組小鼠BT、CT的結果比較：酚磺乙胺組的BT、CT均明顯短于正常對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，3%高鹽組和6%高鹽組的BT、CT均明顯長于正常對照組和酚磺乙胺組，差異有統計學意義(P<0.01)，6%高鹽組的BT明顯長于3%高鹽組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2各組小鼠FBG的結果比較：各組小鼠實驗前及實驗后的FBG兩兩比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組小鼠BT、CT、FBG的結果比較

3 討論

臨床上，檢測BT、CT來判斷機體止血系統和凝血系統是否正常，檢測FBG來判斷機體對糖代謝及利用的情況。血小板參與了生理性止血和血液凝固的過程，酚磺乙胺是通過增加血小板數量和功能發揮止血和凝血作用的[4-5]。

本實驗結果顯示，酚磺乙胺組的BT、CT均明顯短于正常對照組，說明本研究用的小鼠對止血藥有正常的反應，小鼠能夠用于檢測止血系統和凝血系統的研究；3%高鹽組和6%高鹽組的BT、CT均明顯長于正常對照組和酚磺乙胺組，6%高鹽組的BT明顯長于3%高鹽組，說明短期高鹽攝食使生理性止血時間和凝血時間延長；各組小鼠實驗前及實驗后的FBG兩兩比較無顯著性差異，說明短期高鹽攝食對機體的糖代謝與利用未造成明顯影響。

長期高鹽攝食對心、肝、腎功能有影響，并導致血壓升高和加重腦缺血，因此有必要控制鹽的攝入[3,6]。從本實驗的結果表明，短期高鹽攝食可延長BT、CT，提示手術、外傷、造血功能障礙的患者不要高鹽攝食；而對于易導致高凝狀態的機體(如血栓、血小板增多癥患者)，能否短期高鹽攝食作為輔助治療手段，有待于研究。

臨床常用于止血藥物的酚磺乙胺能增加血小板數量和增強功能而發揮作用，而高鹽攝食是否能降低血小板途徑發揮延長BT、CT的作用有待于今后的進一步研究。