木薯抗細(xì)菌性枯萎病生理特性研究

吳美艷 羅興錄 樊鑄硼 劉繼忠 金相宇

摘要：【目的】探討木薯抗細(xì)菌性枯萎病的生理特性，為木薯抗細(xì)菌性枯萎病品種選育提供依據(jù)。【方法】以木薯品種新選048為試驗(yàn)材料，采用桶栽方式室外種植木薯，在木薯苗期和塊根形成期以針刺法接種細(xì)菌性枯萎病病原菌，以不接種病原菌的木薯葉片為對(duì)照，分別于接種后7和14 d采樣測(cè)定脯氨酸（Pro）、丙二醛（MDA）、可溶性糖和可溶性蛋白含量及過(guò)氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性，對(duì)比分析人工接種侵染后發(fā)病葉與健康葉的生理指標(biāo)差異。【結(jié)果】細(xì)菌性枯萎病病原菌接種侵染后，木薯發(fā)病葉片的Pro含量及POD、PPO和CAT活性均高于對(duì)照。苗期接種7和14 d后，接種病原菌葉片的Pro含量分別較對(duì)照極顯著提高83.3%和112.5%（P<0.01，下同），塊根形成期接種7和14 d后，接種病原菌葉片的Pro含量分別較對(duì)照極顯著提高110.2%和120.2%;苗期和塊根形成期接種14 d后，接種病原菌葉片的MDA含量分別較對(duì)照顯著降低30.9%和17.9%（P<0.05，下同），POD活性分別較對(duì)照極顯著提高66.7%和96.4%，PPO活性分別較對(duì)照顯著提高43.1%和30.4%，CAT活性分別較對(duì)照顯著提高31.2%和28.9%。苗期和塊根形成期2次接種侵染后發(fā)病葉片的可溶性糖含量、SOD活性和PAL活性多無(wú)顯著差異（P>0.05）。【結(jié)論】木薯葉片的Pro和MDA含量及POD、PPO和CAT活性與木薯抗細(xì)菌性枯萎病有密切關(guān)系，這些指標(biāo)可作為木薯抗細(xì)菌性枯萎病評(píng)價(jià)的生理指標(biāo)。

關(guān)鍵詞： 木薯;細(xì)菌性枯萎病;抗性;生理特性

Abstract：【Objective】The physiological characteristics of cassava resistance to bacterial wilt were studied to provide a basis for breeding of cassava varieties that were resistant to bacterial wilt. 【Method】In this experiment，cassava variety Xinxuan 048 as the research material，the cassava was grown outdoors in a barrel planting method. At the cassava seedling stage and the root formation stage， the bacterial wilt pathogen was inoculated by acupuncture， and the cassava leaves without inoculation were used as controls. 7 and 14 d after inoculation， samples were taken to determine the contents of proline（Pro）， malondialdehyde（MDA）， soluble sugar and soluble protein，? activities of catalase（POD）， polyphenol oxidase（PPO）， superoxide dismutase（SOD）， catalase（CAT） and phenylalanine ammonia-lyase（PAL）， comparative analysis of physiological indexes of diseased leaves and healthy leaves after artificial inoculation was conducted. 【Result】The measurement results of physiological indexes after infection of bacterial wilt pathogens showed that the contents of Pro and the activities of POD， PPO and CAT in cassava diseased leaves after inoculation were higher than those of the control. After 7 and 14 d of seedling inoculation， the Pro in inoculated? pathogenic leaves extremely increased by 83.3% and 112.5% compared to the control（P<0.01，the same below）， and after 7 and 14 d of tuber inoculation， the Pro in inoculated pathogenic leaves extremely increased by 110.2% and 120.2%， respectively， compared to the control. At 14 d after ino-culation at the stage and the root formation stage， the MDA content of the leaves inoculated with pathogens significantly reduced by 30.9% and 17.9% respectively（P<0.05，The same below）， and the POD activities of the leaves inoculated with pathogens were increased by 66.7% and 96.4% compared with the control. PPO activities significantly increased by 43.1% and 30.4% respectively， and CAT activities of pathogen-inoculated leaves increased by 31.2% and 28.9% respectively compared with the control. Soluble sugar content， SOD activity， and PAL activity of infected leaves inoculated twice at the seedling stage and tuber formation stage had no significant difference（P>0.05）. 【Conclusion】It can be seen that the contents of Pro， MDA and the activities of POD， PPO and CAT in cassava leaves are closely related to the resistance to bacterial wilt. These indicators can be used as physiological indicators for the evaluation of cassava resistance to bacterial wilt.

Key words： cassava; bacterial wilt; resistance; physiological characteristics

0 引言

【研究意義】木薯（Manihot esculenta Crantz）為大戟科木薯屬植物，亦稱(chēng)樹(shù)薯，是世界三大薯類(lèi)作物之一，是一種用途較廣、經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的作物，也是一種發(fā)展?jié)摿薮蟮目稍偕茉醋魑铮‵okunang et al.，2001;劉紀(jì)霜等，2013）。木薯細(xì)菌性枯萎病（Cassava bacterial blight，CBB）又名流膠病，由地毯草黃單胞菌屬木薯萎蔫致病變種（Xanthomonas axonopodis pv. manihotis，Xam）引起（岑貞陸等，2006），該病主要危害木薯葉片和莖部，受害葉片出現(xiàn)病斑，枯黃萎蔫，受害嫩莖或枝條枯死，塊根淀粉含量下降，可造成12%～90%的產(chǎn)量損失，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致全株死亡，是全球范圍內(nèi)威脅木薯產(chǎn)量和制約相關(guān)產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素之一（Ogunjobi et al.，2010;曾小榮和鄭剛輝，2011;盧昕等，2013）。因此，研究木薯抗細(xì)菌性枯萎病的生理機(jī)制，對(duì)我國(guó)木薯抗枯萎病品種選育及病害防治具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】目前，國(guó)內(nèi)已有一些關(guān)于植物抗枯萎病病原菌生理機(jī)制的相關(guān)報(bào)道。胡莉莉（2006）研究表明，香蕉接種枯萎病病原菌后，假莖部位的多酚氧化酶（PPO）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）、過(guò)氧化物酶（POD）等防御酶活性與抗病性呈極顯著正相關(guān)，與丙二醛（MDA）含量和脯氨酸（Pro）含量呈極顯著負(fù)相關(guān)。樊春俊等（2012）研究表明，不同木薯品種接種細(xì)菌性枯萎病病原菌后，POD和PPO活性顯著升高后又下降，過(guò)氧化氫酶（CAT）活性無(wú)明顯變化，而超氧化物歧化酶（SOD）活性呈下降趨勢(shì)。潘存祥（2014）研究表明，SOD、POD、CAT、PPO和PAL等防御保護(hù)酶活性升高能增強(qiáng)西瓜對(duì)枯萎病的抵抗能力，是評(píng)價(jià)西瓜抗枯萎病的重要生理生化指標(biāo)。吳超等（2015）研究表明，香蕉的CAT、POD和PPO活性與香蕉抗枯萎病呈正相關(guān)，可作為評(píng)價(jià)香蕉抗枯萎病的生理評(píng)價(jià)指標(biāo)。張曼（2016）研究表明，香蕉接種枯萎病病原菌后，香蕉的抗病性與POD、PPO、幾丁質(zhì)酶和p-1，3-葡聚糖酶活性呈正相關(guān)，與PAL活性存在一定的相關(guān)性。時(shí)濤等（2017）研究表明，木薯抗細(xì)菌性枯萎病與氨基轉(zhuǎn)移酶、葡萄糖—果糖氧化還原酶活性有關(guān)。李伯凌（2017）研究表明，木薯接種細(xì)菌性枯萎病病原菌后，木薯葉片可溶性糖含量無(wú)明顯變化，抗病品種的POD、PPO和PAL活性均大于感病品種，Pro含量略高于感病品種，而接種前期可溶性蛋白含量呈下降趨勢(shì)。李海明等（2019）研究表明，山苦瓜幼苗接種枯萎病病原菌后，POD、SOD和PAL活性與抗病性呈正相關(guān)，MDA含量與抗病性呈負(fù)相關(guān)。【本研究切入點(diǎn)】近年來(lái)，關(guān)于木薯抗細(xì)菌性枯萎病的研究主要集中在木薯品種的抗性鑒定及防治方面，而針對(duì)木薯抗病生理特性的研究較少。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】采用桶栽方式室外種植木薯，在木薯苗期和塊根形成期，以針刺法接種細(xì)菌性枯萎病病原菌，以不接種病原菌的木薯葉片為對(duì)照，分別于接種后7和14 d采樣測(cè)定生理指標(biāo)，對(duì)比分析人工接種侵染后發(fā)病葉與健康葉的生理指標(biāo)差異，探討木薯抗細(xì)菌性枯萎病的生理特性，為木薯抗細(xì)菌性枯萎病品種選育提供依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

供試木薯品種為對(duì)細(xì)菌性枯萎病較敏感的新選048，由廣西大學(xué)木薯課題組提供。

供試菌株為Cax-03，采自廣西北海市合浦縣農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所試驗(yàn)基地具有細(xì)菌性枯萎病癥狀的木薯病葉，由廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院分離鑒定。

1. 2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2018年在廣西大學(xué)科研教學(xué)基地進(jìn)行。采用桶栽法，塑料桶高39 cm，上底直徑56 cm，下底直徑40 cm，設(shè)有排水口。桶內(nèi)裝70 kg大田土壤，栽種前每桶施0.65 kg有機(jī)肥作基肥，肥料與土壤充分混勻后栽種木薯，木薯種莖砍成15 cm長(zhǎng)的莖段，采用斜插法植入種植桶。

將菌株Cax-03在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（蛋白胨5 g、牛肉膏3 g、蔗糖10 g、瓊脂15 g、水1000 mL）上平板涂布培養(yǎng)48 h，然后挑取1個(gè)單菌落放入150 mL的三角瓶，置于搖床（130 r/min、28 ℃）24 h，用液體培養(yǎng)基（無(wú)瓊脂）配成濃度為108 CFU/mL的菌懸浮液（菌液濃度在OD600為0.6）供接種用。在木薯苗期和塊根形成期，選擇生長(zhǎng)正常的木薯植株，采用針刺法在倒4葉進(jìn)行接種病原菌處理，即通過(guò)針刺把菌液接到木薯的葉片上，同時(shí)以接種滅菌液體培養(yǎng)基（不接種病原菌）的木薯葉片為對(duì)照。每處理種10桶，3次重復(fù)。不同處理分開(kāi)放置，其他栽培管理措施同常規(guī)桶栽。分別在苗期和塊根形成期接種后的7和14 d（苗期6月21日、6月28日，塊根形成期8月21日、8月28日）進(jìn)行葉片采樣，測(cè)定各項(xiàng)生理指標(biāo)。

1. 3 測(cè)定項(xiàng)目及方法

Pro含量采用磺基水楊酸法測(cè)定（張憲政，1992），MDA含量采用硫代巴比妥酸法測(cè)定（李合生，2000）;可溶性糖含量采用蒽酮比色法測(cè)定，可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測(cè)定（孔祥生和易現(xiàn)峰，2008），POD活性采用愈創(chuàng)木酚比色法測(cè)定（李合生，2000），PPO活性采用碘量法測(cè)定（李合生，2000），SOD活性采用氮藍(lán)四唑光化還原法測(cè)定（李合生，2000），CAT活性采用紫外吸收法測(cè)定（李合生，2000），PAL活性采用分光光度法測(cè)定（張福平和李秋紅，2008）。

1. 4 統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)的整理分析及制圖，以SPSS 18.0進(jìn)行單因素方差分析和顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2. 1 細(xì)菌性枯萎病菌侵染對(duì)木薯葉片Pro含量的影響

由表1可知，接種細(xì)菌性枯萎病病原菌后，發(fā)病葉片的Pro含量均高于對(duì)照，且差異均達(dá)極顯著水平（P<0.01，下同），其中，苗期接種7和14 d后，接種病原菌葉片Pro含量分別較對(duì)照提高83.3%和112.5%，塊根形成期接種7和14 d后，接種病原菌葉片Pro含量分別較對(duì)照提高110.2%和120.2%。可見(jiàn)，木薯被細(xì)菌性枯萎病菌侵染后，會(huì)刺激Pro合成，使葉片中Pro含量大幅度增加，推測(cè)木薯對(duì)細(xì)菌性枯萎病的抗性與Pro含量有密切關(guān)系。

2. 2 細(xì)菌性枯萎病菌侵染對(duì)木薯葉片MDA含量的影響

由表2可知，在苗期接種侵染7 d時(shí)，接種病原菌葉片的MDA含量較對(duì)照提高23.5%，而在苗期接種14 d時(shí)，接種病原菌葉片的MDA含量較對(duì)照降低30.9%，差異均達(dá)顯著水平（P<0.05，下同）。在塊根形成期接種侵染7 d，接種病原菌葉片的MDA含量與對(duì)照差異不顯著（P>0.05，下同），而接種14 d時(shí)，接種病原菌葉片的MDA含量較對(duì)照顯著下降17.9%。由此可見(jiàn)，木薯在接種后期隨著細(xì)菌性枯萎病病原菌侵染時(shí)間的延長(zhǎng)MDA合成會(huì)減少。

2. 3 細(xì)菌性枯萎病菌侵染對(duì)木薯葉片可溶性糖含量的影響

由表3可知，苗期接種后7和14 d，接種病原菌葉片的可溶性糖含量高于對(duì)照，但差異未達(dá)顯著水平;塊根形成期接種后7和14 d，接種病原菌葉片的可溶性糖含量低于對(duì)照，但差異也不顯著。可見(jiàn)，細(xì)菌性枯萎病菌侵染對(duì)木薯葉片可溶性糖的合成無(wú)明顯影響。

2. 4 細(xì)菌性枯萎病菌侵染對(duì)木薯葉片可溶性蛋白含量的影響

由表4可知，在苗期接種后7和14 d，接種病原菌葉片的可溶性蛋白含量均低于對(duì)照，且差異達(dá)顯著水平;而在塊根形成期接種后7和14 d，接種病原菌葉片的可溶性蛋白含量高于對(duì)照，其中接種后14 d兩者差異顯著。可見(jiàn)，木薯苗期遭受細(xì)菌性枯萎病菌侵染會(huì)抑制葉片可溶性蛋白的合成，而在塊根形成期細(xì)菌性枯萎病菌侵染會(huì)刺激葉片可溶性蛋白的合成。

2. 5 細(xì)菌性枯萎病菌侵染對(duì)木薯葉片防御酶活性的影響

2. 5. 1 POD活性變化 由圖1可看出，在木薯苗期接種后7 d，接種病原菌葉片的POD活性低于對(duì)照，但接種后14 d接種病原菌葉片的POD活性迅速提高，較對(duì)照極顯著提高66.7%。在塊根形成期接種后7和14 d，接種病原菌葉片的POD活性分別比對(duì)照提高85.2%和96.4%，差異達(dá)顯著或極顯著水平。可見(jiàn)，木薯遭受細(xì)菌性枯萎病菌侵染后會(huì)刺激葉片POD活性提高，以抵御病菌的侵染。

2. 5. 2 PPO活性變化 由圖2可看出，在苗期和塊根形成期接種后7 d，接種病原菌葉片與對(duì)照葉片的PPO活性無(wú)顯著差異;但苗期和塊根形成期接種后14 d，接種病原菌葉片的PPO活性分別較對(duì)照顯著提高43.1%和30.4%。可見(jiàn)，病原菌接種初期對(duì)木薯葉片PPO的刺激作用不明顯，隨著接種后時(shí)間的推移，木薯葉片PPO對(duì)病原菌侵染的反應(yīng)增強(qiáng)，PPO活性迅速提高。

2. 5. 3 CAT活性變化 由圖3可看出，在木薯苗期和塊根形成期接種侵染后7 d，接種病原菌葉片的CAT活性與對(duì)照差異不顯著，但接種侵染后14 d，接種病原菌葉片的CAT活性分別較對(duì)照提高31.2%和28.9%，達(dá)顯著差異水平。說(shuō)明接種侵染初期木薯葉片的CAT反應(yīng)不強(qiáng)烈，但隨著侵染時(shí)間的推移，木薯葉片CAT反應(yīng)增強(qiáng)，使葉片CAT活性提高。

2. 5. 4 SOD活性變化 由圖4可看出，塊根形成期接種侵染后7 d，接種病原菌葉片的SOD活性顯著高于對(duì)照，而其他時(shí)間點(diǎn)接種病原菌葉片的SOD活性均與對(duì)照無(wú)顯著差異。表明木薯葉片SOD對(duì)細(xì)菌性枯萎病菌的侵染反應(yīng)較遲鈍，木薯對(duì)細(xì)菌性枯萎病的抗感與葉片SOD活性的關(guān)系不明顯。

2. 5. 5 PAL活性變化 由圖5可看出，無(wú)論是苗期還是塊根形成期，接種病原菌葉片與對(duì)照的PAL活性均無(wú)顯著差異。說(shuō)明木薯葉片的PAL對(duì)遭受細(xì)菌性枯萎病菌侵染的響應(yīng)不明顯。

3 討論

植物受到逆境脅迫時(shí)，體內(nèi)系統(tǒng)會(huì)積累大量Pro來(lái)調(diào)節(jié)滲透壓以防止細(xì)胞脫水（劉紅亮和柏樂(lè)，2012）。郭紅蓮等（2003）利用灰斑病菌侵染6個(gè)不同抗、感性的玉米品種，發(fā)現(xiàn)Pro含量與品種的抗病性呈正相關(guān)。李伯凌（2017）在研究木薯抗細(xì)菌性枯萎病機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，感病品種的Pro含量高于抗病品種。本研究結(jié)果顯示，無(wú)論是苗期還是塊根形成期，被細(xì)菌性枯萎病菌侵染后木薯葉片的Pro含量均顯著提高，說(shuō)明木薯遭受細(xì)菌性枯萎病菌侵染后，其葉片Pro合成量增加，以抵御病菌的侵染，葉片Pro含量與木薯抗細(xì)菌性枯萎病有密切關(guān)系。

MDA是細(xì)胞膜膜脂過(guò)氧化作用的最終產(chǎn)物之一，其含量可在一定程度上反映細(xì)胞膜的損壞程度和對(duì)逆境條件反應(yīng)的強(qiáng)弱（張鈺等，2008）。李伯凌（2017）研究發(fā)現(xiàn)，感病品種的MDA含量高于抗病品種。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，苗期木薯葉片受到病原菌侵染7 d后，接種病原菌處理的MDA含量高于對(duì)照，而苗期和塊根形成期接種14 d的發(fā)病葉片MDA含量低于對(duì)照，說(shuō)明苗期接種7 d后木薯葉片的細(xì)胞膜正受到傷害，而接種14 d后發(fā)病葉片MDA含量低于對(duì)照，可能是植物組織中各物質(zhì)的互作對(duì)病原菌產(chǎn)生了抵抗作用，減緩了細(xì)胞膜膜脂過(guò)氧化作用，使細(xì)胞膜損害程度減輕。

可溶性糖不僅是維持植物體內(nèi)滲透壓平衡的碳水化合物，還是高等植物光合作用的主要產(chǎn)物（李赤等，2007）。但有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，植物體內(nèi)可溶性糖含量變化與植物抗逆性并無(wú)很明確的關(guān)系（李赤等，2007;王佳星等，2019）。本研究中，無(wú)論是苗期還是塊根形成期，接種病原菌葉片的可溶性糖含量與對(duì)照均無(wú)顯著差異，與李赤等（2007）研究得出的富貴竹中可溶性糖含量與抗病性無(wú)直接關(guān)系的結(jié)論相似，表明細(xì)菌性枯萎病菌侵染對(duì)木薯葉片的可溶性糖含量無(wú)直接影響。但本研究中苗期侵染后接種病原菌葉片的可溶性糖含量高于對(duì)照，而塊根形成期侵染后低于對(duì)照，表明不同生育期接種病原菌對(duì)木薯葉片可溶性糖含量的影響存在一定差異，其具體原因有待進(jìn)一步探究。

蛋白質(zhì)是基因表達(dá)的產(chǎn)物之一，是所有生命活動(dòng)的基礎(chǔ)，植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中可溶性蛋白含量會(huì)發(fā)生變化，當(dāng)植物組織受外界侵染時(shí)其可溶性蛋白含量也會(huì)有所變化（李躍建等，2003;王大平等，2006）。本研究結(jié)果表明，木薯苗期接種病原菌葉片的可溶性蛋白含量較對(duì)照呈下降趨勢(shì)，但在塊根形成期較對(duì)照呈上升趨勢(shì)，可能是苗期接種時(shí)，蛋白質(zhì)水解酶活性增強(qiáng)，蛋白質(zhì)被降解，使得蛋白質(zhì)含量降低;而塊根形成期接種時(shí)，木薯葉片衰老速度減緩，蛋白質(zhì)水解過(guò)程變慢，使可溶性蛋白參與到抗病的過(guò)程中。苗期和塊根形成期中接種得到的可溶性蛋白含量趨勢(shì)不一致，可溶性蛋白含量是否與木薯抗細(xì)菌性枯萎病有關(guān)系還需進(jìn)一步研究。

在逆境脅迫或植物衰老過(guò)程中，植物體內(nèi)會(huì)生成大量的自由基，而植物體內(nèi)的保護(hù)酶系統(tǒng)會(huì)相應(yīng)發(fā)生變化以抵御不良環(huán)境。POD具有代謝H2O2的功能，以H2O2為電子受體，將酚類(lèi)化合物還原形成的自由基聚合物形成木質(zhì)素（王榮娟等，2010）。PPO主要參與酚類(lèi)氧化為醌及木質(zhì)素前體的聚合作用，與植物抗病密切相關(guān)（胡瑞波和田紀(jì)春，2004）。POD和PPO在苯丙烷代謝途徑中起重要作用，使植物對(duì)逆境或細(xì)胞組織衰老做出應(yīng)激反應(yīng)，其活性增加與植物抗病性呈正相關(guān)（張鈺等，2008）。CAT和SOD也在防御酶系統(tǒng)里起重要作用，前者可催化H2O2分解為H2O和O2從而維持細(xì)胞膜系統(tǒng)的穩(wěn)定性，后者可清除氧自由基（Ge et al.，2014;李伯凌，2017）。PAL是苯丙烷類(lèi)代謝的關(guān)鍵酶和限速酶，其活性與酚類(lèi)化合物的合成密切相關(guān)（黃銳，2007）。本研究結(jié)果表明，無(wú)論是苗期還是塊根形成期，接種病原菌14 d后木薯葉片的POD、PPO和CAT活性均高于對(duì)照。說(shuō)明病原菌與植物組織互作，相關(guān)酶機(jī)制開(kāi)始啟動(dòng)，保護(hù)細(xì)胞不受病原菌侵害，從而起到抵抗作用。無(wú)論是苗期還是塊根形成期，木薯葉片接種病原菌侵染后，發(fā)病葉的SOD活性（8月21日除外）和PAL活性多與對(duì)照無(wú)顯著差異，說(shuō)明SOD和PAL的作用機(jī)制相對(duì)較復(fù)雜，生理機(jī)制對(duì)其活性的影響是否能起到抗病作用還需進(jìn)一步探究。

4 結(jié)論

木薯遭受細(xì)菌性枯萎病菌侵染后，葉片Pro含量升高，MDA含量降低，POD、PPO和CAT活性明顯增強(qiáng)。表明葉片Pro和MDA含量及POD、PPO和CAT活性與木薯抗細(xì)菌性枯萎病有密切關(guān)系，這些指標(biāo)可作為木薯抗細(xì)菌性枯萎病評(píng)價(jià)的生理指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)：

岑貞陸，黃思良，任建國(guó)，謝玲，袁高慶，賴(lài)傳雅. 2006. 木薯品種（組合）抗細(xì)菌性枯萎病性鑒定初報(bào)[J]. 廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué)，25（2）：134-135. [Cen Z L，Huang S L，Ren J G，Xie L，Yuan G Q，Lai C Y. 2006. Preliminary report on resistance of cassava cultivars and combinations to bacterial blight[J]. Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science，25（2）：134-135.]

樊春俊，時(shí)濤，李超萍，郭涵，黃貴修. 2012. 4種防御酶在木薯—細(xì)菌性枯萎病菌反應(yīng)中的活性變化[J]. 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)，32（5）：31-34. [Fan C J，Shi T，Li C P，Guo H，Huang G X. 2012. Activity changes of four defensive enzymes in cassava resistant reaction to Xanthamonas axonopodis pv. manihotis[J]. Chinese Journal of Tropical Agriculture，32（5）：31-34.]

郭紅蓮，陳捷，高增貴. 2003. 游離脯氨酸在玉米灰斑病抗性機(jī)制中作用的研究[J]. 玉米科學(xué)，11（1）：83-85. [Guo H L，Chen J，Gao Z G. 2003. Study on the role of proline in resistance mechanism to gray leaf spot of corn[J]. Journal of Maize Sciences，11（1）：83-85.]

胡莉莉. 2006. 香蕉抗枯萎病生理生化基礎(chǔ)的研究[D]. 儋州：華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué). [Hu L L. 2006. Studies on basic of physiological and biochemical resistance of banana to fusarium wilt[D]. Danzhou：South China University of Tropical Agriculture.]

胡瑞波，田紀(jì)春. 2004. 小麥多酚氧化酶研究進(jìn)展[J]. 麥類(lèi)作物學(xué)報(bào)，24（1）：81-85. [Hu R B，Tian J C. 2004. Review on wheat polyphenol oxidase（PPO）[J]. Journal of Triticeae Crops，24（1）：81-85.]

黃銳. 2007. 雜交稻及其親本抗瘟性與幾種酶活性及丙二醛含量的關(guān)系[D]. 雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué). [Huang R. 2007. The relationship between blast resistance of hybrid rice or their parent and enzyme activities or MDA content[D]. Yaan：Sichuan Agricultural University.]

孔祥生，易現(xiàn)峰. 2008. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社. [Kong X S，Yi X F. 2008. Experimental techniques in plant physiology[M]. Beijing：China Agriculture Press.]

李伯凌. 2017. 木薯抗細(xì)菌性枯萎病的生理機(jī)制研究[D]. 海口：海南大學(xué). [Li B L. 2017. Research on the physiolo-gical mechanism of cassava resistance to bacterial blight[D]. Haikou：Hainan University.]

李赤，于莉，劉付東標(biāo)，肖凌艷. 2007. 富貴竹中可溶性糖、蛋白質(zhì)含量與細(xì)菌性莖腐病的關(guān)系[J]. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，29（6）：620-622. [Li C，Yu L，Liufu D B，Xiao L Y. 2007. Relation between contents of soluble sugar and protein in Dracaena sanderiana virens and bacterial stem rot[J]. Journal of Jilin Agricultural University，29（6）：620-622.]

李海明，吳水金，林江波，鄒暉，李躍森，戴藝民. 2019. 山苦瓜資源對(duì)枯萎病的抗性評(píng)價(jià)及理化分析[J]. 北方園藝，（5）：21-26. [Li H M，Wu S J，Lin J B，Zou H，Li Y S，Dai Y M. 2019. Resistance evaluation to wilt and physiological germplasm resources of Momordica charantia[J]. Northern Hortculture，（5）：21-26.]

李合生. 2000. 植物生理生化原理和技術(shù)[M]. 北京：高等教育出版社. [Li H S. 2000. Plant physiological and biochemical experimental techniques[M]. Beijing：Higher Education Press.]

李躍建，彭云良，高榮，劉世貴. 2003. 條銹菌侵染后小麥體內(nèi)蛋白質(zhì)的變化[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，16（4）：1-3. [Li Y J，Peng Y L，Gao R，Liu S G. 2003. Changes of protein in wheat after the infection of stripe rust disease（Puccinia striiformis）[J]. Southwest China Journal of Agricultural Scien-ces，16（4）：1-3.]

劉紅亮，柏樂(lè). 2012. 不同抗病性油菜品種中脯氨酸和可溶性蛋白的動(dòng)態(tài)分析[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，（18）：95-96. [Liu H L，Bai L. 2012. Dynamic analysis of proline and soluble protein in different disease resistant rape varieties[J]. Modern Agricultural Science and Technology，（18）：95-96.]

劉紀(jì)霜，羅興錄，樊吳靜，黃冬飛，楊鑫，曾文丹. 2013. 保水劑對(duì)土壤理化性狀和木薯產(chǎn)量影響研究[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，29（33）：253-258. [Liu J S，Luo X L，F(xiàn)an W J，Huang D F，Yang X，Zeng W D. 2013. Effects of water retai-ning agent on the physical and chemical biological character of soil and the root tubers yield of cassava[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin，29（33）：253-258.]

盧昕，李超萍，時(shí)濤，蔡吉苗，黃貴修. 2013. 國(guó)內(nèi)木薯主產(chǎn)區(qū)細(xì)菌性枯萎病病原鑒定[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，40（21）：84-87. [Lu X，Li C P，Shi T，Cai J M，Huang G X. 2013. Pathogen identification of cassava bacterial blight from several main cultivation area in China[J]. Guangdong Agricultural Sciences，40（21）：84-87.]

潘存祥. 2014. 西瓜抗枯萎病生理生化機(jī)理的研究[D]. 蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué). [Pan C X. 2014. Research on physiological and biochemical mechanism of watermelon resistance to Fusarium wilt[D]. Lanzhou：Gansu Agricultural University.]

時(shí)濤，蔡吉苗，李超萍，陳奕鵬，李博勛，黃貴修. 2017. 7個(gè)木薯細(xì)菌性萎蔫病菌致病性相關(guān)突變體的鑒定及插入位點(diǎn)基因的分子分析[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào)，38（9）：1688-1693. [Shi T，Cai J M，Li C P，Chen Y P，Li B X，Huang G X. 2017. Identification and molecular analysis of integration flanking genesfrom seven Xanthomonas axonopodis pv. manihotis pathogenicity-related mutants[J]. Chinese Journal of Tropical Crops，38（9）：1688-1693.]

王大平，曾明，朱鈞，李道高. 2006. 綠斑病藻寄生對(duì)夏橙葉片光合作用特性的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，17（6）：1141-1144. [Wang D P，Zeng M，Zhu J，Li D G. 2006. Effects of Apatococcus lobatus parasitization on leaf photosynthesis characteristics of orange（Citrus cv. Olinda）[J]. Chinese Journal of Applied Ecology，17（6）：1141-1144.]

王佳星，余國(guó)源，謝瑛，黃琛斐，廖飛勇. 2019. 土壤鎘脅迫對(duì)紫金牛生理特性的影響[J]. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，47（5）：25-29. [Wang J X，Yu G Y，Xie Y，Huang C F，Liao F Y. 2019. Effects of Cd stress on physiological characteristics of Ardisia japonica[J]. Journal of Northeast Forestry University，47（5）：25-29.]

王榮娟，戚亞平，宋備舟，黃彬，王雷，姚允聰，姬謙龍. 2010. 蘋(píng)果果實(shí)發(fā)酵液對(duì)草莓防御酶系活性及抗病性的影響[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，26（16）：250-255. [Wang R J，Qi Y P，Song B Z，Huang B，Wang L，Yao Y C，Ji Q L. 2010. Influences of apple fruit broth on activities of defense enzymes and disease resistance on strawberry[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin，26（16）：250-255.]

吳超，畢可可，黃華枝，何世慶. 2015. 香蕉枯萎病抗性防御酶的測(cè)定[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，43（3）：107-109. [Wu C，Bi K K，Huang H Z，He S Q. 2015. Analysis of defensive enzymes activities of banana Fusarium wilt[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences，43（3）：107-109.]

曾小榮，鄭剛輝. 2011. 木薯主要病蟲(chóng)害的發(fā)生及防治[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，（18）：200. [Zeng X R，Zheng G H. 2011. Occurrence and control of main diseases and insect pests of cassava[J]. Modern Agricultural Science and Techno-logy，（18）：200.]

張福平，李秋紅. 2008. 溫度對(duì)黃皮果實(shí)PAL、POD和PPO活性的影響[J]. 食品與發(fā)酵業(yè)，34（11）：69-71. [Zhang F P，Li Q H. 2008. Effects of different storage temperatures on PAL，POD and PPO activity of wampee fruit[J]. Food and Fermentation Industries，34（11）：69-71.]

張玨，吳小芹，施士爭(zhēng)，瞿紅葉. 2008. 潰瘍病侵染對(duì)6個(gè)柳樹(shù)無(wú)性系丙二醛及相關(guān)酶活性的影響[J]. 江蘇林業(yè)科技，35（6）：9-12. [Zhang J，Wu X Q，Shi S Z，Qu H Y. 2008. Effect of canker on malonaldehyde and its related enzyme activities of among the six willow clones[J]. Journal of Jiangsu Forestry Science and Technology，35（6）：9-12.]

張曼. 2016. 抗香蕉枯萎病品種的抗性機(jī)理及對(duì)土壤微生物群落的影響[D]. 海口：海南大學(xué). [Zhang M. 2016. The mechanism of disease-resistant varieties to banana Fusa-rium wilt disease and the effects on soil microbial community strucyuret[D]. Haikou：Hainan University.]

張憲政. 1992. 作物生理研究法[M]. 北京：農(nóng)業(yè)出版社. [Zhang X Z. 1992. Crop physiological research method[M]. Beijing：Agriculture Press.]

Fokunang C N，Tomkins P T，Dixon A G O，Tembe E A，Salwa B，Nukenine E N，Horan L. 2001. Cyanogenic potential in food crop and its implication in cassava（Manihot esculenta Crantz）production[J]. Pakistan Journal of Biological Sciences，4（7）：926-930.

Ge Y J，He X Y，Wang J F，Jiang B，Ye R H，Lin X C. 2014. Physiological and biochemical responses of Phoebe bournei seedlings to water stress and recovery[J]. Acta Phy-siologiae Plantarum，36（5）：1241-1250.

Ogunjobi A A，F(xiàn)agade O E，Dixon A G O，Bandyopadhyay R. 2010. Assessment of large population of cassava accessions for resistant to cassava bacterial blight infection in the screen house environment[J]. Journal of Agricultural Biotechnology and Sustainable Development，50：132-138.

（責(zé)任編輯 王 暉）