杭州地區(qū)水稻惡苗病流行原因及防治對(duì)策

王國(guó)迪 陳瑞* 汪彥欣 趙麗 張宇

（1 杭州市植保土肥服務(wù)總站，杭州310020；2 浙江農(nóng)林大學(xué)，杭州311300；第一作者：893772886@qq.com；

*通訊作者：chenrui0307@126.com）

水稻惡苗病是危害水稻地上部分，主要由種子傳播的一種常見(jiàn)的真菌性病害，引起該病的病原菌為藤倉(cāng)鐮刀菌[1-3]。近年來(lái)，隨著浙江省水稻集中育秧的推廣，水稻惡苗病的發(fā)生日趨加重，嚴(yán)重威脅早稻的安全生產(chǎn)[4]。當(dāng)前防治水稻惡苗病的主要措施是采用化學(xué)藥劑對(duì)種子進(jìn)行消毒處理，25%氰烯菌酯懸浮劑作為防治水稻惡苗病的適宜藥劑在浙江稻區(qū)大量使用，長(zhǎng)期單一使用化學(xué)殺菌劑極易產(chǎn)生抗藥性[5-6]。已有報(bào)道在浙江紹興地區(qū)分離到對(duì)氰烯菌酯高抗的惡苗病菌，田間試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用氰烯菌酯浸種處理對(duì)水稻惡苗病的防效較差[7-8]。2019 年杭州市錢塘新區(qū)河莊街道早稻用25%氰烯菌酯懸浮劑對(duì)種子進(jìn)行浸種消毒處理，水稻秧苗惡苗病仍大量發(fā)生，發(fā)病率嚴(yán)重的達(dá)到100%，造成大量的經(jīng)濟(jì)損失。為此我們開(kāi)展了一系列試驗(yàn)，一方面測(cè)定了種子帶菌率和惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性，另一方面從生產(chǎn)實(shí)踐出發(fā)篩選了有效的種子浸種處理藥劑，通過(guò)研究力求科學(xué)防控水稻惡苗病的發(fā)生，保障糧食生產(chǎn)安全。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試水稻品種：中早39 號(hào)（浙江勿忘農(nóng)公司）；供試藥劑：96%氰烯菌酯原藥（江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司）、25%氰烯菌酯懸浮劑（江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司）、25%咪鮮胺乳油（江蘇輝豐生物農(nóng)業(yè)股份有限公司）、4.23%甲霜·種菌唑微乳劑（愛(ài)利思達(dá)生物化學(xué)品有限公司）。

1.2 種子帶菌率測(cè)定

圖1 惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗性測(cè)定及濃度設(shè)置

將稻種用無(wú)菌水清洗后，先用70%酒精浸泡1 min，再用3%（有效氯）次氯酸鈉溶液浸泡3 min，最后用無(wú)菌水清洗3 遍，將種子在超凈臺(tái)中晾干后接種到加有100 μg/mL 鏈霉素和100 μg/mL 卡那霉素的馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基平板上，每張平板均勻接種7 個(gè)稻種，25℃黑暗培養(yǎng)3 d，觀察稻種表面及周圍的菌落情況。

1.3 惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性測(cè)定

1.3.1 惡苗病菌分離

選取錢塘新區(qū)水稻育秧基地表現(xiàn)明顯惡苗病癥狀的水稻秧苗，從莖基部剪取約2～3 cm 的莖段，用自來(lái)水沖洗干凈，先用70%酒精浸泡消毒1 min，再用3%（有效氯）次氯酸鈉溶液浸泡消毒3 min，無(wú)菌水沖洗3次，超凈臺(tái)中晾干，將莖段切成約5 mm 的小塊，接種在含100 μg/mL 鏈霉素和100 μg/mL 卡那霉素的PDA培養(yǎng)基平板上，25℃黑暗培養(yǎng)5 d 后，根據(jù)菌落顏色、形態(tài)判斷為鐮刀菌的菌株轉(zhuǎn)接到新的PDA 培養(yǎng)基平板上，25℃黑暗培養(yǎng)，備用。

1.3.2 抗藥性測(cè)定

采用區(qū)分劑量法測(cè)定惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性。將氰烯菌酯原藥用丙酮配制成100 000 μg/mL 的母液，然后配制成含氰烯菌酯質(zhì)量濃度為0 μg/mL、0.25 μg/mL、1 μg/mL、50 μg/mL 和200 μg /mL 的PDA平板。將分離菌株用打孔器切成直徑5 mm 的菌餅，將菌餅接種至含氰烯菌酯的PDA 平板上，每個(gè)平板接種7 個(gè)菌餅，每個(gè)菌株每濃度處理重復(fù)3 次。25 ℃培養(yǎng)4 d 后觀察菌落生長(zhǎng)情況，具體設(shè)置見(jiàn)圖1。不能在含0.25 μg/mL 氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為敏感菌株；能在0.25～1 μg/mL 氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為低水平抗藥性菌株；能在1～50 μg/mL 氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為中等水平抗藥性菌株；能在200 μg/mL 氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為高水平抗藥性菌株[5]。

表1 惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗性水平及抗性頻率

表2 不同藥劑處理對(duì)水稻惡苗病的防治效果

1.4 藥劑篩選試驗(yàn)

試驗(yàn)在杭州市錢塘新區(qū)河莊鎮(zhèn)進(jìn)行，試驗(yàn)作物為早稻，品種為中早39。試驗(yàn)設(shè)7 個(gè)處理：處理1，清水浸種（CK）；處理2，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400 倍液浸種；處理3，4. 23%甲霜·種菌唑微乳劑600 倍液浸種；處理4，25%氰烯菌酯懸浮劑2000 倍液浸種；處理5，25%氰烯菌酯懸浮劑750 倍液浸種；處理6，25%咪鮮胺乳油2 000 倍液浸種；處理7，25%咪鮮胺乳油2 000 倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2 000 倍混液浸種。

2019 年4 月8 日浸種，每個(gè)處理用水量2 000 mL，用種量1 500 g，各處理按設(shè)計(jì)濃度配制好藥液并充分?jǐn)嚢韬蟮谷敫煞N子，撈去秕粒，浸種48 h 后催芽，催芽1 d 后播種，每個(gè)處理播9 個(gè)秧盤，每個(gè)秧盤用種量166 g；播后4 d 擺盤灌水。分別于播種后11 d、18 d調(diào)查水稻秧苗惡苗病發(fā)病情況，記錄發(fā)病株數(shù)，并計(jì)算各處理的病株率和防治效果。

病株率（%）=病苗數(shù)/調(diào)查總苗數(shù)×100；

防治效果（%）=（對(duì)照區(qū)病株率-處理區(qū)病株率）/對(duì)照區(qū)病株率×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 種子帶菌率

在供試的66 粒稻種中，長(zhǎng)出惡苗病菌的種子52粒，帶菌率為78.79%。

2.2 惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性

由表1 可見(jiàn)，共分離得到51 株惡苗病菌，其中氰烯菌酯高抗菌株49 株，抗藥性頻率為96.08%，為優(yōu)勢(shì)致病菌株；另2 株為氰烯菌酯中高抗菌株，頻率為3.92%；本次樣品中未檢測(cè)到低抗和中抗菌株，也沒(méi)有檢測(cè)到敏感菌株。

2.3 藥劑篩選

從表2 可以看出，不同藥劑處理對(duì)水稻惡苗病的防治效果存在顯著差異，25%氰烯菌酯懸浮劑對(duì)水稻惡苗病的防治效果最差，2 000 倍液和750 倍液處理的水稻秧苗病株率分別為62.01%和38.47%，防治效果僅37.44%和61.10%；而25%咪鮮胺乳油2 000 倍液、25%咪鮮胺乳油2 000 倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2 000 倍液混配、4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400 倍液和600 倍液對(duì)水稻惡苗病的防治效果好，播種后18 d 的防效均達(dá)到99.00%左右，這3 種藥劑浸種處理間差異不顯著，均極顯著高于25%氰烯菌酯懸浮劑2 000 倍液和750 倍液處理。

3 小結(jié)與討論

從供試惡苗病株分離的惡苗病菌已經(jīng)對(duì)氰烯菌酯產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性，而且供試稻種的帶菌率也非常高，是導(dǎo)致該地2019 年早稻惡苗病大發(fā)生的主要原因。因此，應(yīng)該加強(qiáng)稻種帶菌以及惡苗病菌對(duì)主要浸種藥劑抗藥性的早期檢測(cè)與預(yù)警，科學(xué)選用藥劑，從而實(shí)現(xiàn)水稻惡苗病的有效防控。本試驗(yàn)表明，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400 倍液和600 倍液、25%咪鮮胺乳油2 000 倍液、5%咪鮮胺乳油2 000 倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2000 倍液混配液浸種48 h 對(duì)惡苗病防效較好，顯著優(yōu)于25%氰烯菌酯懸浮劑750 倍液和2 000倍液浸種處理，適合在老（重）病區(qū)和對(duì)氰烯菌酯抗性較高的地區(qū)輪換使用來(lái)控制惡苗病的發(fā)生為害。