不同方法炮制當歸化學成分分析

王素霞

（河南省許昌市中醫院門診中藥房，河南 許昌 461000）

當歸性味溫、甘、辛，系傘形科植物，取其干燥根，去除水分后，藥用價值廣泛，具有活血調經、抗炎、抗血栓、補血、潤腸通便等功效［1］。當歸主要化學成分為揮發油、有機酸、氨基酸、多糖及其他成分，中藥炮制可增強藥效，降低毒性、增加藥物利用率等。中藥炮制方法多樣，常見有生當歸、酒浸炒當歸、拌炒當歸與當歸炭，不同炮制方法影響藥性和化學成分。本研究分析不同炮制方法對當歸化學成分的影響，報道如下。

1 材料與設備

原料。1kg當歸均購于本市大藥房，經省中藥鑒定所專家鑒定為當歸后，密封儲存。

儀器。1100 LC/DAD液相測譜儀［安捷倫科技有限公司，包括二極管陣列檢測器（DAD）、真空脫氣機、柱溫箱、恒溫自動進樣器、梯度泵和自帶化學工作站］，粉碎儀天津泰斯特儀器有限公司，梅特勒AG204電子稱，Milli-Q純水儀，OPTIMEL-80高速離心機（美國BECKMAN公司）。

試劑。阿魏酸對照品（批號408508）購自百靈威化學技術有限公司，Z-藁本內酯對照品（批號110825）購自上海融禾醫藥科技有限公司。

2 炮制方法

將當歸取出后分成4等份，分別采用如下方法進行炮制。

生當歸：取生當歸的原材料，清除當歸表面的雜質，洗凈后晾曬，切成薄片狀，或制成飲片。

酒當歸：將生當歸洗凈后，按照生當歸：黃酒=100∶10的比例攪拌均勻，直至黃酒被充分吸收，置于鍋內炒制，加熱生當歸至表面呈深黃色，取出后放涼。

土炒當歸：取適量土粉（每100kg當歸片加入30kg土粉），放入鍋內微火加熱炒制，再倒入當歸片一起炒制，直到當歸片上粘滿細土粉（俗稱掛土）時，取出，抖去多余土粉，放置陰涼干燥處。

當歸炭：將洗凈后的生當歸，放入鍋中采用中火進行炒制，炒至當歸表面呈現微黑色，噴灑少量清水，待火星滅盡后取出，放涼晾干。

3 化學檢測方法

應用高效液相色譜法（HPLC）對不同炮制下當歸的化學成分進行測定，分別取適量阿魏酸對照品和藁本內酯對照品于5ml的容量瓶中，加入30%甲醇，定容。精密稱取生當歸、土炒當歸、酒當歸以及當歸炭粉末各0.2g，均加入70%甲醇溶液25ml。對各樣品進行定量稱重后40min加熱回流處理，冷卻后再次稱定各樣品重量，加入濃度70%甲醇溶液用于補足缺少的樣品重量，混勻，采用0.45μm微孔濾膜過濾，色譜條件測定不同炮制方法下樣品中的阿魏酸和藁本內酯的峰面積，按照線性回歸方程，依次計算阿魏酸、藁本內酯的含量。采用水煮醇沉法分離提取當歸中的多糖。根據《中國藥典》（2015版）［2］中的烘干法對不同炮制方法下的當歸進行水分含量進行測定。

4 觀察指標

依次測定生當歸、酒當歸、土炒當歸與當歸炭等炮制樣本中阿魏酸、藁本內酯、多糖、水分等化學成分的含量。測量不同炮制方法前后，當歸質量的變化情況。 計算每種炮制方法前后，當歸質量變化率。質量變化率=（炮制前當歸質量-炮制后當歸質量）/炮制前當歸質量×100%。

5 統計學方法

用SPSS 20.0統計學分析軟件進行處理，計數資料用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

6 結 果

6.1 不同炮制方法當歸炮制樣品化學成分含量比較

不同炮制方法取得的當歸炮制樣本中阿魏酸、藁本內酯及多糖含量比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。其中生當歸各主要成分均為最高，其中阿魏酸、藁本內酯、多糖含量從高到低排序依次為生當歸、酒當歸、土炒當歸和當歸炭，水分含量從高到低排序依次為生當歸、土炒當歸、酒當歸和當歸炭，見表 1。

表1 不同炮制方法下當歸炮制樣品化學成分含量比較 （%）

6.2 不同炮制方法當歸炮制樣品質量變化比較

除了生當歸外，其他炮制方法炮制前后當歸質量及質量變化率比較差異明顯（P＜0.05），酒當歸炮制后當歸質量增加，土炒當歸、當歸炭炮制后當歸質量減少，見表2。

表2 不同炮制方法下當歸炮制樣品質量變化比較

7 討 論

藥理研究表明，當歸具有止血調經、潤腸、補血活血、抗血小板聚集、抗炎及清除自由基等功效［3］。當歸成分為揮發油、有機酸、多糖、氨基酸和少量微量元素。其中揮發油以藁本內酯等苯酞類化合物占多數，有機酸以阿魏酸為代表。研究表明，炮制前后不僅其化學成分的含量發生變化，其化學組成也發生改變［4］。中藥炮制的過程將對中藥的療效和有效成分產生直接影響［5］。

目前，提取和分離中藥化學成分的方法多種多樣，有機溶劑法、蒸餾法主要用于揮發油的分離和提取，其他還有薄層色譜法、硅膠柱色譜法［6］等。高效液相色譜法（HPLC）具有高壓、高效、高靈敏度的優點，被廣泛用于中藥成分的檢測。

當歸中各主要成分有不同的作用。藁本內酯作為其中揮發油的代表，能夠穩定心率、抑制心肌細胞肥大、緩解血管痙攣、抗心律失常；有機酸中大多數為阿魏酸，具有抗血小板凝集、保護血管內膜、清除自由基等功效；多糖能夠活血、提高人體免疫力，具有抗腫瘤的作用［7］。

研究結果顯示，不同炮制方法取得的當歸炮制樣本中阿魏酸、藁本內酯及多糖含量之前存在差異，其中生當歸各主要成分均為最高，其中阿魏酸、藁本內酯、多糖含量從高到低排序依次為生當歸、酒當歸、土炒當歸和當歸炭。水分含量從高到低排序依次為生當歸、土炒當歸、酒當歸和當歸炭。說明不同炮制方法能夠引起當歸化學成分的變化，從而影響當歸的藥性和治療效果。主要原因可能為土炒當歸和當歸炭都需高溫加熱、加速了藁本內酯的揮發，阿魏酸穩定性差、遇熱易分解，高溫環境進一步加重了多糖的碳化損傷［8］，而酒當歸能夠升高其中糖分的溶解度。

除了生當歸外，其他炮制方法炮制前后當歸質量及質量變化率比較差異明顯。酒當歸炮制后當歸質量增加，土炒當歸、當歸炭炮制后當歸質量減少，表明不同炮制方法能夠影響當歸的質量。當歸的干燥根具有一定吸水性，在酒浸漬過后體積增加，一部分質量來自于酒中大部分水的質量。而土炒當歸、當歸炭炮制法主要以加熱的方式，使當歸中的水分以蒸發的形式減少，從而炮制后當歸質量比炮制前減少。