赤霉素對浙產華重樓種子萌發的影響

姜武，詹建勇，商建宏，童健全，吳志剛，陶正明*

(1.浙江省亞熱帶作物研究所，浙江 溫州 325005； 2.淳安縣農業農村局，浙江 淳安 311701；3.淳安縣中藥材發展服務中心，浙江 淳安 311701)

重樓是百合科(Liliaceae)多種植物的統稱，為我國特有的名貴藥材，2015版《中華人民共和國藥典》僅收載滇重樓(Parispolyphyllavar.yunnanensis)和七葉一枝花(Parispolyphyllavar.chinensis)為藥材重樓的基原植物[1]。七葉一枝花又名華重樓，主要分布在湖北、湖南、江西、貴州、浙江等長江中下游地區[2]。重樓以干燥根莖入藥，具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚等功效，民間多用于治療無名腫毒和毒蛇咬傷[3]。重樓具有廣闊的開發應用前景，是云南白藥系列、宮血寧等多種中成藥的主要原料。近年來需求量逐年增加，現有藥源遠不能滿足市場需要，加之主產區亂采濫挖，忽視對重樓資源的保護和繁育，野生種質資源遭到嚴重破壞[4]。重樓是當前浙江省林下經濟產業發展的重要栽培品種。中藥材種子種苗是決定中藥材質量的內在因素，是中藥材規范化生產的保證[5]。重樓近年來的需求量大，而重樓種子休眠時間長，需經2冬1夏才能萌發，且自然萌發率低，種子從萌發到入藥需要5～10 a左右，資源再生困難，實現重樓的快速繁育是當前亟須解決的難題。因此，人工打破重樓種子休眠提高萌發率是實現重樓大量繁育的關鍵。本試驗以不同濃度赤霉素處理華重樓種子，在120 d內統計萌發率，并測定內源性赤霉素和脫落酸含量，以期為浙產華重樓種子的萌發及種子育苗關鍵技術提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

2019年8月份采集成熟浙江產華重樓種子(圖1)，樣品經浙江省農業科學院專家鑒定為七葉一枝花。挑選浙產華重樓(七葉一枝花)大小一致、無病害與損傷的成熟種子為試驗材料，處理前統一去除紅色外種皮。

圖1 供試華重樓的種子

1.2 處理設計

試驗設7個赤霉素濃度處理，分別為0(CK)、100、200、300、400、500和600 mg·L-1。具體方法，將去種皮后的種子在(25±2)℃泡水12 h，再用10%稀H2SO4浸泡12 h后用純凈水沖洗干凈。分別于不同赤霉素濃度在(25±2)℃條件下浸種36 h，取出后清水清洗，與3倍體積噴施多菌靈的沙子混合，進行變溫處理2～25～4～25 ℃各24 h，然后讓其萌發。

1.3 測定項目

萌發率。分別于30、40、60、90、120 d調查各濃度處理的種子萌發率，標準以長出胚根為準。

內源性赤霉素和脫落酸。測定500 mg·L-1赤霉素處理和對照種子在萌發0、30、60、90 d的內源性赤霉素和脫落酸。采用高效液相色譜法，Agilent Technologies 1200 Series色譜儀，C18色譜柱，柱溫 35 ℃，進樣量10 μL，流速0.8 mL·min-1，紫外檢測波長254 nm，流動相：甲醇∶乙腈∶0.6%乙酸水溶液50∶5∶45。

2 結果與分析

2.1 種子萌發率

如表1所示，100～600 mg·L-1赤霉素處理對華重樓種子的萌發均有不同程度的促進作用。500 mg·L-1赤霉素處理的萌發率最高，對萌發具有顯著的促進作用，且隨著萌發天數的增加，萌發率比對照增加也越多，120 d時為85.7%，比對照的34.7%，高51.0百分點；400 mg·L-1處理效果次之。顯示500 mg·L-1赤霉素有利于打破華重樓種子休眠，提高萌發率。

表1 不同赤霉素濃度對華重樓種子萌發率影響表

2.2 對內源激素含量的影響

由表2可知，內源赤霉素含量500 mg·L-1處理隨時間的增加呈上升趨勢，而對照則呈現先下降后上升的趨勢；赤霉素處理顯著高于對照；90 d時含量達480.38 ng·g-1，而對照僅為390.28 ng·g-1。表明外源赤霉素的施用可促進華重樓種子內源赤霉素的合成。

表2 華重樓種子萌發過程中內源赤霉素含量變化

由表3可知，種子萌發過程中內源脫落酸含量會下降，且500 mg·L-1赤霉素處理內源脫落酸含量下降幅度比對照更大。90 d時，赤霉素處理內源脫落酸含量為5.28 ng·g-1，比0 d下降6.58 ng·g-1；而同期對照僅下降4.93 ng·g-1。表明外源赤霉素的施用可有效促進華重樓種子內源脫落酸的分解。

表3 華重樓種子萌發過程中內源脫落酸含量變化

2.3 種子萌發的關鍵技術

采用成熟華重樓種子，去除紅色假種皮，清水浸泡24 h，再用10%稀H2SO4浸泡24 h后洗凈，在25 ℃下用500 mg·L-1赤霉素浸泡36 h，取出種子與3倍體積的沙子混合，采取2～25～4～25 ℃變溫處理各24 h，25 ℃沙藏1周后播種。育苗基質主要成分為腐殖土、椰糠、腐熟有機肥(3∶1∶1)，鋪在苗床上厚2.0～2.5 cm，保持苗床濕度65%～70%，遮陰度65%～70%，出苗后及時除草，翌年4月份噴灑多菌靈2～3次，輔以植物生長調節劑。

3 小結與討論

種子內激素含量反應種子的萌發狀態，赤霉素可誘導物質與能量代謝相關水解酶的合成與分泌，脫落酸則具有抑制種子萌發和胚芽鞘伸長的效應，兩者具拮抗作用。赤霉素與脫落酸比值越大，越能促進種子的萌發和胚芽鞘的伸長。試驗結果表明，500 mg·L-1赤霉素有利于打破華重樓種子休眠，提高萌發率，且證明外源赤霉素的施用可促進華重樓種子內源赤霉素的合成和內源脫落酸的分解。

重樓育苗技術研究與推廣，既可拯救瀕危野生資源，又能滿足市場及社會需要，良好的示范推廣可為山區農民勞動力就業提供一條新途徑。按照目前市場價格，重樓種苗1.2～2.5元·株-1，重樓塊根約1 600元·kg-1(干品)，不管是種苗銷售還是留種栽種，均有較好的經濟效益。試驗結果可為浙江山區發展林下重樓藥材種子育苗技術提供理論依據。