TP-ELISA與RPR檢測(cè)在梅毒篩查中的對(duì)比研究

宋文智

（河南省濮陽(yáng)惠民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 濮陽(yáng) 457000）

梅毒是一種系統(tǒng)性、慢性傳播疾病，可引起人體多系統(tǒng)、多臟器損害，梅毒的診斷和及時(shí)治療尤為重要。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是梅毒診斷的重要依據(jù)，快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）是目前最普遍的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，但各有優(yōu)劣[1]。本研究旨在探討TP-ELISA與RPR不同檢測(cè)在梅毒篩查中的應(yīng)用效果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年9月～2019年3月我院門診及住院疑似梅毒感染患者179例，其中男90例，女89例，年齡（20～55）歲，平均年齡（38.16±8.13）歲；患者知情并同意本研究。

1.2 方法 抽取患者晨起空腹靜脈血3ml，離心后取上清液，于當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)。所有標(biāo)本均采取RPR法、TP-ELISA法 檢 測(cè)，RPR法、TP-ELISA法檢測(cè)后標(biāo)本再通過(guò)TPPA法進(jìn)行復(fù)查，統(tǒng)計(jì)并分析檢測(cè)結(jié)果。RPR試劑盒為上海科華公司產(chǎn)品，TP-ELISA試劑盒為上海科華生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，TPPA試劑盒為日本富士瑞必歐株式會(huì)社產(chǎn)品。URIT-660型酶標(biāo)儀由桂林優(yōu)利特有限公司制造，Mindray MW-12A型洗板機(jī)由深圳邁瑞醫(yī)療電子有限公司制造，XK95I型多用振蕩器由江蘇江堰市新康儀器廠生產(chǎn)。本研究操作程序及結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書執(zhí)行，且保證所選試劑盒及試劑在有效期內(nèi)，所有患者的檢測(cè)均由專業(yè)的檢驗(yàn)科醫(yī)技人員負(fù)責(zé)。RPR檢測(cè)出的陽(yáng)性標(biāo)本需進(jìn)行1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32的倍比稀釋，最后再做半定量試驗(yàn)。TP-ELISA檢測(cè)結(jié)果通過(guò)酶標(biāo)儀讀取數(shù)據(jù)進(jìn)行判定，光密度值（OD值）超過(guò)臨界值（Cutoff）則檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，相反則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo) 以TPPA檢測(cè)為“金標(biāo)準(zhǔn)”，比較RPR、TP-ELISA檢測(cè)出梅毒的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 以SPSS 23.0分析，計(jì)數(shù)資料以（n，%）表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)結(jié)果 本研究179例疑似梅毒感染患者，經(jīng)TPPA檢查證實(shí)為梅毒感染患者103例；采用TP-ELISA檢測(cè)出梅毒感染患者100例；采用RPR檢測(cè)出梅毒感染患者62例。見(jiàn)表1。

表1 不同方法檢測(cè)結(jié)果

2.2 診斷效能 TP-ELISA檢測(cè)出梅毒感染靈敏度（97.09%）、特異度（90.79%）、準(zhǔn)確率（94.41%）高于RPR（60.19%、79.21%、59.78%）（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 診斷效能

3 討論

梅毒是一種性傳播疾病，隨著社會(huì)快速發(fā)展，發(fā)病率逐漸升高，其病原體是梅毒螺旋體，且人類是其唯一宿主，具有較高傳染性。一旦患病，會(huì)造成極大危害，如多器官感染、神經(jīng)損害、胎兒感染（導(dǎo)致胎兒畸形、早產(chǎn)、死胎）等，嚴(yán)重影響患者健康生活，因此，選擇敏感性強(qiáng)、特異性高的梅毒檢測(cè)方法對(duì)臨床診斷及治療有重要作用[2]。

TPPA是目前公認(rèn)梅毒血清學(xué)確證試驗(yàn)首選，是將提取Nichols株梅毒螺旋體特異性抗原包被紅色明膠顆粒，以檢測(cè)患者血清梅毒抗體的方法，且其批次間差距小、試劑穩(wěn)定，具有高度敏感性、特異性等特點(diǎn)，但TPPA檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜、試劑成本較高，檢測(cè)結(jié)果判斷難以自動(dòng)化，耗時(shí)較長(zhǎng)，原始數(shù)據(jù)難以保存，不適合大量標(biāo)本的篩查[3]。RPR法是采取心磷脂、卵磷脂、膽固醇作為抗原，其檢測(cè)的受體是機(jī)體在梅毒感染后，宿主細(xì)胞遭到破壞，發(fā)生裂解并釋放出類脂質(zhì)（反應(yīng)素），其檢測(cè)方法具有經(jīng)濟(jì)性、操作方便等優(yōu)點(diǎn)，但RPR法檢測(cè)的反應(yīng)素容易受到年齡、麻風(fēng)、腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等因素的影響，從而發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性[4]。TP-ELISA法是根據(jù)梅毒螺旋體的基因工程技術(shù)，將重組梅毒特異性抗原包被在酶標(biāo)板孔，采用雙抗原夾心法檢測(cè)梅毒特異性抗體、免疫球蛋白G（IgG）抗體及早期免疫球蛋白M（IgM）抗體的方法，具有操作簡(jiǎn)單快捷、全自動(dòng)化檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)，用酶標(biāo)儀比色判定結(jié)果，原始數(shù)據(jù)容易保存，適合大量標(biāo)本的篩查[5]。本研究179例梅毒感染患者分別進(jìn)行TP-ELISA、RPR檢測(cè)，結(jié)果顯示，TP-ELISA檢測(cè)出梅毒感染靈敏度（97.09%）、特異度（90.79%）、準(zhǔn)確率（94.41%）高于RPR（60.19%、79.21%、59.78%）（P＜0.05），表明與RPR檢測(cè)相比，TP-ELISA檢出梅毒感染準(zhǔn)確率較高，能減少漏診率、誤診率，為臨床梅毒的確診提供參考依據(jù)，促使患者得到早期診斷及治療。