淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平與兒童原發性腎病綜合征預后的關系研究

壽曉霞,劉佳誼

(內蒙古醫科大學附屬醫院：1.兒科；2.檢驗科，內蒙古呼和浩特 010050)

原發性腎病綜合征(PNS)是兒童常見腎臟疾病，其發病率僅次于急性腎炎[1]。PNS以水腫、高脂血癥、大量蛋白尿和低蛋白血癥為主要臨床表現，目前一般采用激素類藥物治療該病，但治療后預后較差，易反復發作。有學者認為，若能找到特異性的指標，對PNS進行有效的預后評估，針對預后較差的患者進行密切隨訪，早期干預，對于改善預后、減少復發具有重要意義[2]。有研究發現，PNS發病與炎癥介質和細胞免疫功能紊亂有關，而淋巴細胞亞群參與機體免疫反應，提示其可應用于PNS的預后風險評估[3]。轉化生長因子-β1(TGF-β1)能引起腎臟纖維化，超敏C反應蛋白(hs-CRP)是炎性反應標志物，二者在PNS的疾病進展中發揮著一定作用，但目前關于hs-CRP、TGF-β1在PNS患兒預后風險評估應用中的研究較少[4]。因此，本研究探討了淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)、hs-CRP、TGF-β1與PNS患兒預后的關系，旨在為臨床預后評估提供依據，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年6月至2018年12月本院兒科收治的PNS患兒110例作為研究組，同期60例體檢健康兒童作為對照組。研究組男75例，女35例，平均年齡(8.64±2.54)歲；預后良好60例，預后不良50例。對照組男32例，女28例；平均年齡(8.53±2.42)歲。納入標準：(1)符合中華醫學會兒科學分會腎臟病學組《兒童常見腎臟疾病診治循證指南》中PNS的診斷標準[5]，尿蛋白定性陽性，且24 h尿蛋白定量>3.5 g，血漿清蛋白<30 g/L，膽固醇>5.7 mmol/L，有不同程度水腫；(2)未經激素類藥物治療的初診患兒。排除標準：(1)合并其他過敏性疾病；(2)合并惡性腫瘤；(3)臨床資料不完整；(4)病情危重，生命體征不平穩。研究組與對照組性別、年齡等一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，有可比性。本研究經本院倫理委員會批準，所有研究對象家屬均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1治療方法 研究組患兒確診PNS后，給予利尿，調節水、電解質與酸堿平衡治療，同時給予醋酸潑尼松片(天津天藥藥業股份有限公司，國藥準字H12020689)起始量2 mg/(kg·d)，每日最大劑量不超過40 mg，晨起口服。監測患兒尿蛋白、24 h尿蛋白定量、血脂水平，觀察患兒臨床癥狀(包括尿量、水腫情況、食欲、一般狀態等)。根據病情將醋酸潑尼松片逐漸減量，改為隔日頓服，每2周減2.5 mg，最終可減至10.0 mg/d維持治療。維持治療28 d后，依據患兒疾病恢復情況逐漸減量到停藥。隨訪時間：患兒一般狀態好轉，水腫消退后可出院，出院后每3周到門診隨訪1次；病情穩定者激素維持治療期間可每5周到門診隨訪1次；停藥后可每25周到門診隨訪1次，直至隨訪1年。隨訪期間收集患兒的臨床資料，包括身高、體質量、病程、住院時間、尿蛋白轉陰時間及實驗室相關指標。

1.2.2檢測方法 抽取5 mL靜脈血，置于真空采血管中，采用JIDI-5D型低速離心機(廣州吉迪儀器有限公司)分離血清，置于-70 ℃冰箱保存備用。采用酶聯免疫吸附試驗檢測hs-CRP、TGF-β1水平，儀器為南京基蛋生物科技股份有限公司生產的CM800型全自動生化分析儀;采用中生北控生物科技股份有限公司生產的ZS-BFA流式細胞儀檢測淋巴細胞亞群，包括CD3+、CD4+、CD4+/CD8+，試劑盒購自中生北控生物科技股份有限公司，所有操作嚴格按照說明書進行。

1.3觀察指標 比較研究組(治療前)與對照組的淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平。分析影響PNS患兒預后的獨立危險因素，預后良好判斷標準：臨床癥狀全部消失，尿蛋白轉陰，血漿清蛋白正常，血脂正常，反復多次檢查結果均正常，且患兒未再次出現尿中有泡沫、食欲減退、肢體水腫等癥狀；預后不良判斷標準：臨床癥狀未消失，且患兒病情反復，實驗室檢查提示蛋白尿、高脂血癥、低蛋白血癥等。分析淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨及聯合檢測對PNS預后的預測價值。

2 結 果

2.1研究組與對照組淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平比較 研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；研究組hs-CRP、TGF-β1水平均高于對照組，差異有統計學差異(P<0.05)。見表1。

表1 研究組與對照組淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平比較

2.2影響PNS預后的單因素分析 單因素分析結果顯示，性別、年齡、身高、體質量、病程、住院時間與PNS預后無關(P>0.05)；CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、hs-CRP、TGF-β1、尿蛋白轉陰時間是PNS預后的影響因素(P<0.05)。見表2。

2.3影響PNS預后的多因素Logistic回歸分析 將單因素分析中的影響因素(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、hs-CRP、TGF-β1、尿蛋白轉陰時間)納入多因素Logistic回歸分析模型。結果顯示，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、TGF-β1、hs-CRP是影響PNS預后的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

2.4淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨及聯合檢測對PNS預后的預測價值 ROC曲線分析結果顯示，TGF-β1預測PNS預后的靈敏度最高，為98.0%，hs-CRP預測PNS預后的特異度最高，為100.0%。CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、hs-CRP及TGF-β1 5項聯合檢測的曲線下面積(AUC)為0.985，高于各項指標單獨檢測。見圖1、表4。

表2 影響PNS預后的單因素分析

表3 影響PNS預后的多因素Logistic回歸分析

圖1 淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨及聯合檢測預測PNS預后的ROC曲線

表4 淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1聯合檢測對PNS預后的預測價值

注：—為無數據。

3 討 論

PNS是一種臨床常見腎臟疾病，為多種原因所導致的腎小球濾過膜通透性改變，大量蛋白從尿液排出，血漿清蛋白水平下降。目前，臨床上主要應用激素治療PNS，但治療后極易復發，最終導致患兒病程延長，免疫力低下，嚴重影響患兒預后。近年來，隨著醫療技術水平的不斷提高，ARUMUGAM等[6]研究發現，找出靈敏度、特異度高的標志物，對PNS預后進行早期評估，并采取有效的措施，對減少患兒機體受損，提高治療效果有重要價值。因此，本研究探討了淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平與PNS預后的關系，以期為臨床預后判斷提供依據。

PNS為免疫系統紊亂及炎性反應相關性疾病，與淋巴細胞亞群、細胞炎癥因子、生長因子有關[7]。淋巴細胞亞群是機體免疫系統內功能最強的一群細胞，可維持機體正常免疫功能。其中CD4+與CD8+具有輔助和抑制作用，可形成細胞網絡來維持機體免疫系統平衡，二者水平下降和升高都可影響機體免疫功能[8-9]。本研究發現，研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對照組(P<0.05)；CD3+、CD4+、CD4+/CD8+是影響PNS預后的獨立危險因素(P<0.05)，與ABEDINI[10]的研究結果一致，提示淋巴細胞亞群水平在PNS患兒中明顯降低，可能與疾病的發生、發展和預后有關。

TGF-β1能作用于腎臟，通過纖維化因子調節細胞生長、分化，增加細胞基質分泌，誘導酶原激活抑制物產生等引起腎臟纖維化，最終導致腎小球硬化[11]。本研究中，研究組TGF-β1水平高于對照組(P<0.05)；TGF-β1是影響PNS預后的獨立危險因素(P<0.05)，提示TGF-β1水平與PNS的發生、發展及預后有關。hs-CRP為特異性炎性反應標志物，是機體在炎性反應出現時大量合成的急性時相反應蛋白，可釋放到局部組織并有效控制炎性反應[12]。以往研究顯示，PNS患兒病情發展與hs-CRP水平呈正相關，即PNS病情越嚴重，hs-CRP水平越高[13]。本研究中，研究組hs-CRP水平高于對照組(P<0.05)；hs-CRP是影響PNS預后的獨立危險因素(P<0.05)，提示hs-CRP與PNS的發生、發展有關，且可用于評估患兒預后。有研究發現，尿蛋白轉陰時間>7 d的患者預后較≤7 d的患者差，提示尿蛋白轉陰時間可影響PNS的預后[14]。本研究中，尿蛋白轉陰時間是影響PNS患兒預后的危險因素，與上述研究結果類似，但多因素Logistic回歸分析發現，尿蛋白轉陰時間并不是影響PNS患兒預后的獨立危險因素。

采用ROC曲線進一步分析淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨及聯合檢測對PNS預后的預測價值，發現聯合檢測對PNS患兒預后的預測價值明顯優于各項指標單獨檢測，提示臨床可將淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1聯合檢測作為監測PNS病情發展及預后的重要評估指標。

4 結 論

綜上所述，淋巴細胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平與PNS的預后密切相關，聯合檢測對PNS患兒的預后評估具有一定價值，能有效指導PNS患兒的臨床管理。