狼瘡抗凝物陽性系統性紅斑狼瘡患者凝血功能研究

喬 斌，龔衛杰，李 艷

(武漢大學人民醫院檢驗科，湖北武漢 430060)

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種免疫失調性疾病，因自身免疫細胞和細胞因子調節失控導致免疫系統、循環系統、內分泌系統等全身多個器官、系統受累[1-4]。凝血功能異常是SLE患者的主要特征之一，臨床常表現為紫癜、血栓、不明原因的習慣性流產等。目前研究表明，狼瘡抗凝物(LA)是SLE患者凝血功能異常的主要原因之一，30%～40%的SLE患者可檢測到LA陽性[5]。LA是一類免疫球蛋白復合物，在體內可以與β2-糖蛋白I、凝血酶原等蛋白質結合，進而與帶負電荷的磷脂形成抗磷脂復合物，抑制與磷脂相關的前列環素、蛋白C等內源性抗凝物質的功能，誘導血管內皮細胞凋亡而引起血栓。但在體外研究中，因為活化部分凝血活酶時間(APTT)的檢測需要磷脂的參與，而LA能與磷脂結合，從而使APTT及其他一些相關凝血指標異常[6-7]。正是由于LA在體內和體外發揮的功效不同，導致臨床無法對LA陽性SLE患者出血或血栓風險進行正確判斷，從而影響了患者的正確治療。因此，對LA陽性SLE患者凝血功能進行研究，可以為臨床醫師正確判斷患者的出血與血栓風險提供依據。目前，基于LA陽性SLE患者凝血功能的研究較少，本研究系統地評估了此類患者的凝血功能，以期為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2013年1月至2017年3月在本院住院的SLE 患者90例為研究對象，其中男28例、女62例，平均年齡(39.3±11.6)歲。SLE符合SLE的相關診斷標準[5]。根據LA標準化比值>1.2為陽性，≤1.2為陰性，將SLE患者分為LA陽性組40例，LA陰性組50例。LA陽性組中男12例、女28例，平均年齡(41.3±14.6)歲；LA陰性組中男16例、女34例，平均年齡(38.7±9.5)歲。收集同期本院健康體檢者50例為對照組,其中男12例、女38例,平均年齡(36.5±12.2)歲。納入標準：同意加入本研究，并簽署知情同意書。排除標準：LA陽性與陰性組排除類風濕關節炎、高血壓、感染性疾病、腎病及糖尿病患者；對照組排除自身免疫性疾病史及近6個月內出現感染性疾病、高血壓、腎病、糖尿病和其他全身性疾病史者。

1.2方法

1.2.1標本采集 入選者采血前2周內均未接受肝素、口服抗凝藥、抗血小板藥物及溶栓藥物治療。 空腹 12 h采集靜脈血分別置于專用試管中，其中2 mL置于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管中顛倒混勻；2 mL置于含3.2%的枸櫞酸鈉硅化試管中，枸櫞酸鈉與血液按照1∶9體積混合。

1.2.2凝血功能指標檢測 采用激光電阻抗法檢測血小板計數，所用儀器為日本Sysmex XE-2100型血細胞分析儀，操作過程嚴格按照說明書要求進行。采用凝固法檢測APTT、凝血酶原時間(PT)、凝血酶時間(TT)、纖維蛋白原(Fib)水平，操作過程嚴格按照說明書要求進行，并在4 h內完成檢測，所用儀器為日本Sysmex CA7000全自動血凝分析儀及德國Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH系列配套試劑盒、穩定劑、緩沖液和沖洗液等。

1.2.3LA檢測 待測血液標本進行2次離心，第一次2 000×g離心10 min，取上層血漿再以2 000×g離心10 min，獲得乏血小板血漿。LA篩查試驗及確證試驗采用稀釋蝰蛇毒時間(dRVVT)法，在日本Sysmex CA7000全自動凝血分析儀上完成，試劑采用德國Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH系列配套試劑盒，計算LA標準化比值。LA標準化比值=LA篩查試驗值/LA確證試驗值。

1.2.4臨床資料收集 收集患者的臨床資料，包括血栓事件：經彩色多普勒超聲掃描、血管造影、磁共振、CT等確診；出血事件：包括血腫、鼻衄、牙齦出血、咳血、便血、紫癜、蛛網膜下腔出血、胃腸道出血等。

2 結 果

2.13組臨床和實驗室資料比較 LA陽性組、LA陰性組和對照組血小板計數比較，差異無統計學意義(P>0.05)；LA陽性組LA標準化比值明顯高于LA陰性組和對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；LA陽性組血栓事件發生率明顯高于LA陰性組，差異有統計學意義(P<0.05)；LA陽性組出血事件發生率略低于LA陰性組，但差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組臨床和實驗室資料比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與LA陰性組比較，#P<0.05;—表示無數據。

2.23組凝血功能指標水平比較 LA陽性組APTT、PT、Fib水平均高于LA陰性組和對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；LA陰性組APTT、PT水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；TT水平在3組間比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 3組凝血功能指標水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與LA陰性組比較，#P<0.05。

3 討 論

血栓形成是SLE患者的主要臨床表現之一，除因廣泛血管損傷導致凝血功能增強外，LA水平升高對SLE患者血栓形成可能也起到重要的作用[8]。本研究發現，LA陽性組患者的血栓事件發生率明顯高于LA陰性組(P<0.05)?？沽字贵w(包括LA、抗β2-糖蛋白抗體、抗心磷脂抗體)被認為是獲得性高凝狀態的主要原因之一。LA可以結合到血管內皮細胞膜上，激活血管內皮細胞，釋放組織因子，活化血小板，促進血小板的黏附和血栓形成，同時干擾內皮細胞釋放纖溶酶原激活物而抑制纖溶途徑和抗凝血酶活性；LA可抑制與磷脂相關的內源性抗凝物質，例如抑制蛋白C抗凝途徑，增強血栓烷A的形成，促進血小板的激活，抑制血管內皮細胞前列環素的合成，從而增強血液的凝固性。這些病理性變化導致凝血、抗凝血、纖溶間動態平衡失調，使血栓形成的傾向更為顯著。但抗磷脂抗體導致凝血異常的確切機制目前尚未明確[9-10]。

LA是一種IgM、IgG或兩者混合存在的病理性抗磷脂抗體，可以抑制凝血酶原、凝血因子V等與磷脂的結合，產生抗凝效應，引起凝血時間延長，從而增加出血風險[11-13]。本研究也觀察到LA陽性組APTT、PT水平均明顯高于LA陰性組(P<0.05)，與饒繪等[14]的研究結果一致。同時LA陰性組APTT和PT水平明顯高于對照組(P<0.05)，這可能與SLE是一種復雜的全身性自身免疫性疾病，患者體內存在其他類型的凝血因子抑制物或抗凝物相關。本研究中LA陽性組Fib水平明顯高于LA陰性組和對照組(P<0.05)。這可能與Fib作為一種炎性反應指標，在SLE患者體內與多種物質相互作用，最終導致Fib水平明顯升高有關。此外，Fib是血栓形成的前體物質，可以介導血小板聚集，是反映體內高凝狀態的敏感指標。Fib增高反映凝血亢進和纖溶活力下降，提示SLE患者凝血活性增強，考慮這也是本研究觀察到的LA陽性組血栓事件發生率明顯高于LA陰性組的可能原因之一[15-17]。LA陽性患者被認為有較高的血栓風險，雖然LA陽性組患者APTT、PT水平均明顯高于LA陰性組，但是除非合并其他出血性疾病，一般情況下極少有LA陽性患者發生出血事件[9]，與本研究觀察到的LA陽性組出血事件發生率較低相符。

4 結 論

綜上所述，LA陽性SLE患者凝血功能異常，血栓形成風險增加。臨床上應注重對LA陽性SLE患者血栓風險的防治，采取有效的防治措施，進一步做到早期合理治療。