羅甸縣2019年豬瘟免疫抗體監(jiān)測與討論

韋永江 汪洪發(fā) 梁國慶 汪勇 王潔 楊通會 李治芳

豬瘟俗稱“爛腸瘟”，是一種由豬瘟病毒引起的具有高度傳染性疫病，致死率高，是威脅養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一。其臨床典型特征是全身皮膚、漿膜、黏膜和內(nèi)臟器官有不同程度的出血，而現(xiàn)在臨床上的普遍情況是非典型化的、亞臨床感染、持續(xù)感染及隱性感染等。 2017年起貴州省羅甸縣豬瘟退出強制免疫范疇，為評估羅甸縣生豬養(yǎng)殖場戶豬瘟自主免疫效果，本次試驗對養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖大戶、散養(yǎng)戶三個來源不同的生豬血清樣品開展豬瘟免疫抗體檢測，結(jié)果表明養(yǎng)殖場豬瘟免疫抗體合格率明顯高于養(yǎng)殖大戶和散養(yǎng)戶，養(yǎng)殖大戶高于散養(yǎng)戶。

為有效做好豬瘟的防疫工作，羅甸縣在每年給各市縣發(fā)放豬瘟疫苗，進行春、秋2季集中免疫。為切實了解2019年豬瘟疫苗免疫實施情況和評估免疫效果，根據(jù)免疫計劃要求，所有發(fā)放疫苗的區(qū)（市）縣的部分規(guī)模場、散養(yǎng)戶和屠宰廠采集血清樣品，采用豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒對采集樣品進行免疫抗體水平的檢測。

一、材料與方法

1、試驗材料

豬瘟抗體檢測試劑盒（生產(chǎn)廠家為深圳真瑞生物科技有限公司，批號為2019061802）、豬血清樣品（共計307份樣品）、酶標儀、移液器、吸頭、量筒等。

本次試驗集中采樣時間為7天，采樣范圍覆蓋全縣9個鄉(xiāng)鎮(zhèn)、8個養(yǎng)殖場、15個養(yǎng)殖大戶和49個散養(yǎng)戶，被采樣生豬均為60日齡以上健康豬，實驗室檢測時間為1天。

2、試驗方法

采用阻斷ELISA法，在酶標板條微孔上預(yù)包被豬瘟抗原。在試驗中，加入稀釋后的待檢血清，經(jīng)過溫育后，若樣品中含有豬瘟抗原特異性抗體，則與包被板上的抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其它成分后，再加入酶標的抗豬瘟抗體，樣本中的抗體阻斷了酶標抗體與包被板上抗原的結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在微孔中加入TMB底物液，經(jīng)酶催化產(chǎn)生的藍色信號與樣本中的抗體含量成反比，加入終止液終止反應(yīng)后，用酶標儀450nm波長測定反應(yīng)孔中的吸光度。

3、檢測結(jié)果判定

用酶標儀于450nm讀取吸光度OD值，試驗成立條件為陰性對照（N）OD值>0.5，同時陽性對照（P）阻斷率>50%，計算方法為PI（阻斷率）=1-（樣品OD值/陰性O(shè)D值）。當PI（阻斷率）>40%則判斷為陽性，當PI≦40%且>30%時為可疑，當PI≦30%則判斷為陰性。

二、結(jié)果與分析

通過檢測得出，養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖大戶、散養(yǎng)戶受檢樣品的豬瘟免疫抗體合格率分別為85.44%、57.27%，23.4%，總體合格率為56.35%，結(jié)果表明不同來源樣品的豬瘟免疫抗體合格率存在明顯差異，養(yǎng)殖場高于養(yǎng)殖大戶和散養(yǎng)戶，養(yǎng)殖大戶高于散養(yǎng)戶，詳見表一。

三、討論

2017年豬瘟退出強制免疫范疇后，政府不再對豬瘟免疫作強制要求，豬瘟免疫模式變?yōu)轲B(yǎng)殖場戶自主免疫。從檢測結(jié)果來看，豬瘟免疫抗體合格率以養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖大戶、散養(yǎng)戶逐漸呈“階梯式”下降，出現(xiàn)這樣的結(jié)果可能與養(yǎng)殖場戶自身的防疫意識有很大關(guān)系。經(jīng)調(diào)查了解，本次采樣的養(yǎng)殖場均建有詳細的免疫程序，場內(nèi)各項管理制度相對規(guī)范，防疫設(shè)施較為齊全，且場主自身防疫意識較強;養(yǎng)殖大戶有一定的防疫意識，但防疫措施落實效果不理想;而散養(yǎng)戶基本上不主動實施免疫，防疫意識較為淡薄。截止目前，全國已發(fā)生多起非洲豬瘟疫情，其中大部分疫情發(fā)生在中小規(guī)模養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶，中小規(guī)模養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶由于防疫意識不強、 防疫設(shè)施不健全、 防疫措施落實不到位，對非洲豬瘟疫情防控工作帶來重大隱患。因此，進一步提高全縣養(yǎng)殖場戶自主防疫意識及防疫條件迫在眉睫。

研究表明：在加強豬瘟診斷和免疫監(jiān)測的同時，必須從源頭控制，從種源入手扎實抓好種豬場豬瘟的防疫工作。為避免免疫失敗，淘汰隱性感染或潛伏感染的種豬。同時制定科學合理的免疫程序，適當加大免疫劑量，保證豬群具有抵抗豬瘟病毒感染的抗體水平。加強飼料管理，優(yōu)先選用配合飼料，保證豬群的營養(yǎng)全面，使機體擁有較強的免疫力。豬場必須實施嚴格的生物安全措施，定期對圈舍、墊草、糞水和用具等進行徹底消毒;來訪人員和工作人員進入豬場必須經(jīng)過淋浴等消毒程序;禁止外來人員或車輛進入豬場。需引進豬時，必須做好隔離觀察和免疫檢測。

綜上所述： 本次試驗對養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖大戶、散養(yǎng)戶三個來源不同的生豬血清樣品開展豬瘟免疫抗體檢測，結(jié)果表明養(yǎng)殖場豬瘟免疫抗體合格率明顯高于養(yǎng)殖大戶和散養(yǎng)戶，養(yǎng)殖大戶高于散養(yǎng)戶。因此，需要做好相應(yīng)的預(yù)防和控制措施，只有這樣，才能有效的確保養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。

（作者單位：550100貴州省羅甸縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局）