哮喘兒童血清維生素D及其免疫相關因素的分析

（福建省泉州市兒童醫院呼吸科，福建 泉州 362000）

支氣管哮喘是一種以慢性氣道炎癥和氣道高反應性為特征的異質性疾病，常常引起不同程度的肺功能損害[1]。CVA是兒童慢性咳嗽的最常見病因之一[2]，它存在與CA相似的病理生理改變，約1/3CVA患者最終會發展為典型哮喘。二者均受遺傳、環境、理化及感染等多因素影響，并且受多種免疫因素的調控。維生素D是一組類固醇衍生物，是最具有生物活性的激素前體，研究證實維生素D與哮喘發病有相關性。本研究探討了哮喘兒童血清（25（OH）D）水平與肺功能及免疫功能的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2018年7月至2019年12月泉州市兒童醫院呼吸專科門診收治的CA患兒60例、CVA患兒65例作為研究對象，分別記為CA組、CVA組，均符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》診斷標準[2]。排除營養不良、遺傳代謝、免疫缺陷疾病、活動性佝僂病及心肝腎及甲狀腺疾病，無長期使用糖皮質激素、免疫抑制劑等影響機體維生素D水平的服藥者。另選取同期至我院兒童保健科進行體檢的健康同齡兒童50例作為對照組，既往無慢性咳嗽及哮喘史，既往無過敏史，入組時體格檢查均為陰性，胸片檢查無異常。三組均為5～14歲兒童，CA組共60例，女32例，男28例，平均年齡（8.46±2.48）歲；CVA組共65例，女39例，男26例，平均年齡（8.11±2.29）歲；對照組共50例，其中女30例，男20例，平均年齡（7.87±1.74）歲。三組的年齡、性別等一般資料有可比性（P＞0.05）。兒童家長同意并簽署知情同意書。

1.2 檢驗方法：所有兒童于入組當天清晨空腹狀態下，由檢驗科護士抽取靜脈2 mL，嚴格按照儀器及試劑盒上的說明操作。

1.2.1 25（OH）D及免疫指標的檢測：使用上海西門子醫學診斷產品有限公司的總維生素D測定試劑盒，采用化學發光法進行檢測。使用該公司的免疫球蛋白A、G、M測定試劑盒，采用散射比濁法進行檢測。使用上海碧迪醫療器械有限公司的細胞免疫流式細胞分析儀，采用流式細胞術法對樣本進行檢測。

1.2.2 肺功能檢測：使用比利時麥迪公司生產的肺功能儀測定常規肺通氣功能，測定前先由專業技術人員對測試系統進行校準，并記錄受試者姓名、身高、體質量等個人信息。3組兒童采用同一立位姿勢分別測定3次，取均值，結果判斷符合兒童肺功能系列指南[3]。

1.3 統計學分析：采用SPSS22.0，計數資料（n/%）和計量資料（±s）分別行卡方和t檢驗，采用皮爾遜相關系數描述兩定量變量之間的相關性，相關系數用r表示，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.2 三組兒童25（OH）D水平、肺功能指標的比較：CA組及CVA組25（OH）D水平均低于對照組（P＜0.05）。CA組患者大氣道指標低于CVA組和健康對照組（P＜0.05），CVA組肺功能指標略低于對照組，但差異無統計學意義（P＞0.05）。CVA組、CA組及健康對照組小氣道指標，CA組＜CVA組＜健康對照組，三組之間的差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.3 三組兒童體液免疫、細胞免疫指標的比較：CA組IgG、IgA均低于CVA組和健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.001）。IgM在3組間的差異無統計學意義。CA組CD4+、CD8+低于CVA組，但兩組均低于健康對照組（P＜0.001）。CVA組和CA組CD3+、CD4+/CD8+的平均值接近，但均低于健康對照組（P＜0.05）。見表2。

2.4 25（OH）D與肺功能相關指標關聯性分析：CA組25（OH）D水平與PEF有弱的正相關關系（P＜0.05），CA組和CVA組25（OH）D水平與FEF25、FEF50和FEF75均呈正相關關系（P＜0.05）。

表1 三組25（OH）D、肺功能比較（±s）

表1 三組25（OH）D、肺功能比較（±s）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與CA組比較，#P＜0.05；與CVA組比較，△P＜0.05

表2 三組體液免疫、細胞免疫比較（±s）

表2 三組體液免疫、細胞免疫比較（±s）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與CA組比較，#P＜0.05；與CVA組比較，△P＜0.05

2.5 25（OH）D與體液免疫、細胞免疫指標關聯性分析：CA組25（OH）D水平與IgA呈正相關關系（P＜0.05），CA組和CVA組25（OH）D水平與CD4+、CD4+/CD8+均呈正相關關系（P＜0.05），與CD8+呈負相關關系（P＜0.05）。

3 討 論

維生素D一直被認為是鈣磷離子穩態及骨骼重塑的主要調節物質之一，25（OH）D是目前國際上公認的衡量機體營養狀態及維生素D水平的可靠指標，維生素D的劃分標準為：血清維生素D濃度在75～250 nmol/L為適宜，50～75 nmol/L為不足，低于50 nmol/L為缺乏[4]。維生素D缺乏對兒童具有潛在的不良健康后果[5]，維生素D及其受體在免疫調節和免疫平衡中發揮著舉足輕重的作用。哮喘是一種異質性疾病，由多因素共同調控，其中免疫機制在哮喘的發病及進展中發揮著至關重要的作用。研究表明，體內維生素D水平缺乏與支氣管哮喘具有相關性[6]。維生素D缺乏能有效地預測兒童哮喘的風險增加[7]。有學者研究證實維生素D可能會降低嚴重哮喘急性發作和醫療資源利用的風險[8]。修小瑩等研究發現哮喘兒童血清維生素D水平越高，哮喘控制率越高[9]。由此說明提高維生素D水平可降低哮喘患者氣道高反應性。本研究結果與流行病學研究數據相符。

維生素D能誘導調節性T細胞的產生，維生素D不足可引起哮喘兒童體內Th1與Th2、Th17與調節性T細胞比例失調，且存在雙向調節作用。本研究結果顯示CA患兒存在體液免疫功能紊亂。CA組、CVA組患兒維生素D水平與細胞免疫功能指標有相關性，提示維生素D水平不足或缺乏時，可導致外周血輔助T淋巴細胞CD4+/CD8+比值下降，亦使B細胞分化和成熟障礙，從而導致細胞免疫、體液免疫功能下降。

維生素D還可參與肺功能調節。肺功能檢測是反映支氣管哮喘的病情嚴重程度及控制情況的重要指標。國外研究顯示哮喘患者的維生素D水平與肺功能大小氣道指標呈正相關[10]。國內修小瑩等研究發現哮喘兒童血清維生素D水平降低與肺功能大氣道指標無相關性。本研究結果與上述報道一致，表明CA組患兒大小氣道功能均有不同程度障礙，而CVA組存在小氣道功能障礙，考慮與血清維生素D水平低，對以小氣道受損為主的平滑肌細胞收縮影響更大有關，影響氣道重塑。但是，Kim等[11]通過問卷調查并未發現哮喘兒童維生素D水平與肺功能大氣道指標有顯著相關性。

綜上所述，CVA兒童的維生素D水平介于典型哮喘與健康兒童之間，CA及CVA兒童維生素D水平與肺功能指標、細胞免疫存在關聯性。因此可推測說明提高維生素D水平，可降低哮喘患者氣道高反應性，在防治哮喘的發生起到一定的作用。