AFP、PIVKA-II聯合檢測對原發性肝癌的診斷價值

陳澤衍，陳曉靜，鄭文斌，蘭希，郭偉權，黃漢蓮，馬雯

1.南方醫科大學深圳醫院檢驗科，廣東 深圳 518110；

2.深圳大學總醫院檢驗科，廣東 深圳 518055

原發性肝癌(primary liver cancer，PLC)是臨床上常見的惡性腫瘤，隨著人們生活水平的提高和生活方式的改變，其發病率呈逐年上升趨勢[1]。原發性肝癌的臨床表現為肝區疼痛、全身乏力、消瘦、食欲下降等癥狀，且肝癌起病隱匿，病情發展迅速[2-3]。因此，早期預測并及時給予治療對原發性肝癌的發生發展及減少患者死亡率起重要作用。目前有關原發性肝癌的發病機制尚不明確，但較多研究發現，原發性肝癌是由多種病因導致血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein，AFP)、異常凝血酶原(abnormal prothrombin，PIVKA-Ⅱ)含量增高[4]。血清AFP 一直以來都是肝癌診斷的標志物，其與肝癌發生及發展密切相關，在多種腫瘤中能表現出較高濃度，也是多種腫瘤檢測的重要指標。血清AFP 是診斷肝癌的主要檢測指標，但單一檢測AFP 水平會存在特異性不足，檢測效果并不理想[5]。PIVKA-Ⅱ是由于癌細胞對凝血酶原前體合成產生異常，導致凝血酶原前體不足所生成的蛋白質，是近年來新發現的檢測原發性肝癌的標志物。原發性肝癌患者血清PIVKA-Ⅱ含量越高，反映其病情越嚴重，說明PIVKA-Ⅱ的水平變化對原發性肝癌具有診斷價值[6]。因此，血清AFP、PIVKA-Ⅱ的關系被較多研究關注[7]。本研究通過觀察AFP、PIVKA-Ⅱ的水平變化，為早期預測疾病提供依據，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019 年5 月～11 月南方醫科大學深圳醫院收治的56 例原發性肝癌患者作為觀察組。納入標準：(1)符合《原發性肝癌診斷標準》[8]診斷標準；(2)患者診療及隨訪依從性較好，能夠配合診療。排除標準：(1)有肝移植病史；(2)合并嚴重消化系統其他腫瘤者；(3)嚴重的心、腦、肺、腎臟疾病者。另選取50 例體檢健康者作為對照組。觀察組中男性35 例，女性21 例；年齡33～72 歲，平均(49.24±9.76)歲。對照組中男性28 例，女性22 例，年齡32～76 歲，平均(51.18±9.83)歲。兩組受檢者的性別和年齡比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，入選受檢者均知情并簽署同意書。

1.2 觀察指標與檢測方法 采集所有受檢者入組后第2天清晨空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min后分離血清于2 h 內完成檢測，若不能及時檢測，于-80℃凍存備檢。血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平的檢測均使用全自動電泳熒光免疫分析儀(μTASWakoi30)測定，試劑盒均使用日本富士膠片和先存藥株式會社公司生產的配套試劑盒。

1.3 判斷標準 血清正常參考范圍為PIVKA-Ⅱ≤40 mAU/m，AFP≤10 ng/mL，所有陽性值以大于正常范圍為判斷標準，兩項聯合檢測以一項或兩項均陽性為陽性標準。

1.4 統計學方法 應用SPSS18.0 軟件進行數據統計學分析，計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用t檢驗，并使用受試者工作特征曲線(ROC)分析血清AFP、PIVKA-Ⅱ的診斷效能，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組受檢者的AFP、PIVKA-Ⅱ水平比較 觀察組患者的血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平明顯高于對照組，差異均有顯著統計學意義(P＜0.01)，見表1。

表1 兩組受檢者的AFP、PIVKA-II水平比較

表1 兩組受檢者的AFP、PIVKA-II水平比較

組別觀察組對照組t值P值例數56 50 AFP(mAU/mL)132.63±17.24 2.35±0.78 84.287＜0.01 PIVKA-Ⅱ(ng/mL)1 562.56±129.32 20.08±2.13 53.359＜0.01

2.2 繪制ROC 曲線 AFP 診斷原發性肝癌的ROC 曲 線 下 面 積 為0.805，95%CI 為0.723～0.888，PIVKA-Ⅱ診斷原發性肝癌的ROC 曲線下面積為0.678，95%CI為0.577～0.779，AFP+PIVKA-Ⅱ診斷原發性肝癌的ROC 曲線下面積為0.914，95%CI 為0.890～0.939，AFP、PIVKA-Ⅱ單獨檢測分別和聯合檢測曲線下面積比較差異均有統計學意義(Z=1.855、2.688，P＜0.05)，見圖1。

圖1 血清AFP、PIVKA-II單獨檢測和聯合檢測原發性肝癌的ROC曲線

2.3 血清AFP、PIVKA-Ⅱ單獨檢測和聯合檢測對原發性肝癌的診斷效能 AFP+PIVKA-Ⅱ聯合檢測的敏感度、特異度及準確度明顯高于AFP及PIVKA-Ⅱ單獨檢測，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 血清AFP、PIVKA-II 單獨檢測和聯合檢測對原發性肝癌的診斷效能(%)

3 討論

原發性肝癌是發生在肝臟的惡性腫瘤，也是消化系統最常見的腫瘤，有數據統計，肝癌死亡率位居所有腫瘤死亡率的第二位，高發年齡為50 歲左右，男性多于女性[9-10]。原發性肝癌早期無明顯癥狀，增加了診斷難度，等到癥狀出現時往往已經發展到晚期，且該病的復發率和死亡率偏高。因此，早期診斷并發現疾病具有重要意義[11]。

臨床上治療原發性肝癌目前仍舊缺少有效的治療方式，故通過早期的診斷，爭取最佳的治療時間是延緩病情持續發展的關鍵。血清AFP 一直以來都是肝癌診斷的標志物，其與肝癌發生及發展密切相關，在多種腫瘤中能表現出較高濃度，也是多種腫瘤檢測的重要指標。但單一檢測AFP水平會存在特異性不足，檢測效果并不理想[12]。PIVKA-Ⅱ是近年來新發現檢測原發性肝癌的標志物，其是由于癌細胞對凝血酶原前體合成產生異常，導致凝血酶原前體不足所生成的蛋白質。PIVKA-Ⅱ可參與癌細胞的進展，在原發性肝癌診斷中敏感性要優于AFP，并具有更高的特異性[13-15]。因此，臨床上采取多種血清指標聯合檢測以提高診斷的準確率。

本研究結果顯示，原發性肝癌患者血清AFP水平顯著高于正常人群，且Ⅱ期患者血清AFP水平明顯低于Ⅲ期、Ⅳ期患者，Ⅲ期患者血清AFP 水平低于Ⅳ期患者[16]。提示，血清AFP 在原發性肝癌患者中含量偏高，且會隨著病情的嚴重程度而升高，可作為診斷原發性肝癌的重要指標。與周淑燕等[17]研究結果相似，血清AFP水平隨著疾病的嚴重而升高，其與疾病的嚴重性及病情進展密切相關。分析其原因可能是，AFP是人體內的一種糖蛋白，主要來源于胎兒肝細胞和卵黃囊。胎兒肝細胞由于未發育完全，會分泌出大量的AFP，在胎兒出生約兩周后，AFP 會在血液里消失，因此，正常人的AFP 含量一般在10 mAU/mL 以下。而原發性肝癌細胞是沒有分化完成的細胞，所以會在血清里分泌大量AFP。這也充分證明AFP 水平變化在原發性肝癌的診斷價值。當原發性肝癌患者病情嚴重，血清PIVKA-Ⅱ水平會隨之升高，可作為原發性肝癌的發病機制[18]。分析其原因可能是，PIVKA-Ⅱ是凝血功能異常產生的蛋白質，癌細胞會直接影響凝血功能，導致凝血酶過度表達，從而在血清中產生大量的PIVKA-Ⅱ。原發性肝癌患者血清PIVKA-Ⅱ含量越高，反映出病情的嚴重程度，也充分說明PIVKA-Ⅱ的水平變化對原發性肝癌的診斷價值。

本研究結果顯示，AFP診斷原發性肝癌的ROC曲線下面積為0.805，95%CI 為0.723～0.888，PIVKA-Ⅱ診斷原發性肝癌的ROC 曲線下面積為0.678，95%CI為0.577～0.779，AFP+PIVKA-Ⅱ診斷原發性肝癌的ROC曲線下面積為0.914，95%CI為0.890～0.939；且聯合檢測AFP+PIVKA-Ⅱ的特異度、準確度分別為92.67%、93.53%。邢瑞青等[18]研究也顯示，AFP+PIVKA-Ⅱ聯合檢測高于各種指標單獨檢測的診斷效能，對原發性肝癌早期預防更有意義，與本研究結果相似。本研究結果還顯示，AFP+PIVKA-Ⅱ聯合檢測的敏感度、特異度及準確度為96.43%、92.86%及94.64%，均明顯高于AFP的82.14%、76.79%、79.62%和PIVKA-Ⅱ的82.14%、75.00%、77.68%，差異均有統計學意義(P＜0.05)。其原因可能是，AFP+PIVKA-Ⅱ聯合檢測可為檢驗變量提高敏感性和特異性，更有助于預測原發性肝癌嚴重程度，提升診斷效能，且診斷價值高。

綜上所述，在原發性肝癌患者中AFP、PIVKA-Ⅱ的表達和病情嚴重程度之間存在著密切關系，為靶向藥物治療原發性肝癌提供了新思路，且聯合檢測具有較高的特異度、準確度，臨床應用價值高。但本研究時間較短，樣本量不足，為更深入地探討治療機制，后期將開展大樣本、多中心隨機對照研究，以便更好地指導臨床工作。