敲減CDC7對膀胱癌T24細胞增殖、遷移、侵襲能力的影響

張 琪，卓 棟

(皖南醫學院第一附屬醫院弋磯山醫院 泌尿外科，安徽 蕪湖 241001)

膀胱癌是泌尿系統中僅次于前列腺癌的第二常見的腫瘤[1]，發病率居男性惡性腫瘤第6位, 女性惡性腫瘤第11位[2]，也是人類癌癥相關死亡的第八大原因[3]。有相關研究表明膀胱癌復發的高危因素包括性別、腫瘤體積、病灶數量等[4-5]。但目前還沒有可靠的參數來明確腫瘤復發的風險，在抑制腫瘤行為和判斷預后方面比較困難[6]，因此探索膀胱癌的發病機制，尋找并獲得早期治療的新方向十分重要。

細胞分裂周期7 (CDC7)蛋白是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶，其在DNA復制的起始和G1/S相變調控中起關鍵作用[7]，在某些細胞類型中，CDC7可促進細胞周期中初始階段的發生[8]。本研究通過對膀胱癌T24細胞敲減CDC7基因后進行CCK8實驗、劃痕實驗、Transwell實驗，探討敲減CDC7對T24細胞的增殖、侵襲、遷移能力的影響，以判斷其在膀胱癌發生發展中的作用，初步探討其是否可成為膀胱癌治療的新方向。

1 材料和方法

1.1細胞與試劑從中國科學院細胞庫購入人膀胱癌T24細胞株。1640培養基、胎牛血清從Hyiclone公司購買。FastKing cDNA第一鏈合成試劑盒、qRT-PCR試劑盒購自天根公司，引物購于銳博公司，轉染試劑LIPO3000購于Invitrogen公司。Transwell小室于美國Corning公司購買。CCK-8購于貝博公司。

1.2實時定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)收集皖南醫學院弋磯山醫院泌尿外科正常膀胱組織10例及新鮮膀胱癌組織10例。所有患者術前均未行特殊治療，所有癌灶標本經病理科證實為膀胱癌，在離體后盡快置于-80 ℃冰柜中保存。充分研磨組織，按照Trizol試劑說明書提取組織總RNA，選擇經檢測純度較高的RNA用于后續實驗?！?br>