林甲換 趙必允 夏臣杰
1 寧波城市職業技術學院(浙江寧波315100)
2 寧波市鄞州區中西醫結合醫院(浙江寧波315101)
3 浙江中醫藥大學(浙江杭州310053)4 寧波醫療中心李惠利醫院(浙江寧波315041)
絕經后骨質疏松癥(postmenopausal osteoporosis,PMOP)是一類以骨量流失,骨微結構異常導致骨骼脆性增加的代謝性疾病。高強度間歇運動(high intensity interval exercise,HIIE)是一種多次短時間高/低強度間隔的運動方式。臨床研究表明,運動具有加速骨質形成,提升骨量儲備,能有效干預PMOP[1]。HIIE 作為常見的運動處方之一,其干預PMOP 的分子機制尚不清楚。
經典Wnt/β-catenin信號通路在骨形成及骨穩態平衡維持起到重要作用,其過表達或缺失會導致骨量的激增或驟降[2,3]。深入研究發現,β-catenin 信號通路具有調控間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分化的作用,該通路激活后能夠促進MSCs 成骨分化,進而改善骨量丟失,是治療骨質疏松癥的潛在靶點[4,5]。本實驗通過HIIE干預去卵巢骨質疏松小鼠模型,探討HIIE 干預小鼠PMOP 的療效,并進一步探討其對βcatenin信號通路的影響。
雌性10 周齡C57BL/6 小鼠30 只,體重為20 g 左右,由寧波大學動物實驗中心提供。小鼠飼養在濕度為40%± 5%、溫度為23± 2℃、晝夜12小時更替的環境下,可自由飲水和進食。
戊巴比妥粉(中生瑞泰科技有限公司,中國),4%多聚甲醛(Solarbio 公司,中國),阿爾新藍/蘇木精(Alcian blue/ hematoxylon,ABH)染液(Sigma 公司,美國),Orange G 染液(Sigma 公司,美國),Triton X-100(Sigma公司,美國),檸檬酸鈉緩沖液(中杉金橋生物技術有限公司,中國),一抗:β-鏈蛋白(β-catenin)(Abcam,美國),Runt 相關轉錄因子2(Runx2,Abcam,美國),堿性磷酸酶(ALP,Arigo,中國),IgG-HRP二抗(中杉金橋生物技術有限公司,中國)。
小……