諾氟沙星膠囊微生物限度檢查方法研究

周永海

（甘肅省臨夏回族自治州藥品檢驗檢測中心 731100）

諾氟沙星，又稱為氟哌酸、淋克小星、淋沙星等。諾氟沙星由于其廣譜抗菌性質，對需氧類細菌具有很好的抗菌性，但同時其弊端也很明顯諾氟沙星它對真菌無抑菌作用[1]。因此，在臨床上諾佛沙星多用來治療因敏感菌所導致的疾病，比如腸炎、前列腺炎等的感染。我院開展此項研究，報道如下：

1 儀器與材料

1.1 儀器 培養箱；生物類安全柜；集菌儀；電子天平；電熱恒溫培養箱-隔水式 。

1.2 樣品與試劑 本次實驗采用的樣品為諾氟沙星膠囊；干粉培養基： 氯化鈉蛋白胨緩沖液pH 值7.0、蛋白胨水溶液（濃度0.1%）、胰酪大豆胨培養基兩種分別為液體及瓊脂、沙氏葡萄糖培養基分別為液體及瓊脂、麥康凱培養基分別為液體及瓊脂；分析純：氯化鈉、硫酸鎂[2]

2 試驗方法

首先將枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌置于30℃ ～35℃的胰酪大豆胨液體培養基中，將其培養 18～24 h 后靜置，以備試驗時使用。在進行試驗時，先將上述培養物各取 1 mL，再使用 0.9% 無菌氯化鈉溶液進行稀釋，稀釋保持在10 倍稀釋液至 10-6 或10-3 的菌懸液。再將白色念珠菌在 20℃ ～25℃沙氏葡萄糖液體培養基中培養 2 ～3 d ，實驗開始取該培養基培養物1mL，同樣使用0.9%的無菌氯化鈉溶液保持10倍稀釋至 10-4 ～10-2 的菌懸液。然后在20℃ ～25℃的沙氏葡萄糖瓊脂斜面上培養黑曲霉，5-7 小時后取出該培養物。隨之加入5ml 的無菌氯化鈉溶液，將黑曲霉進行清洗。最后將清洗的孢子懸液取出1 ml，并用濃度為0.05 %的無菌氯化鈉溶液進行10 倍稀釋，直至稀釋到10-4 ～10-2 的孢子懸液[3]。

2.1 微生物計數方法適用性試驗

2.1.1 需氧菌總數計數

試驗組：取1ml 1 ∶10 的供試液，使用薄膜過濾法，使用800 ml無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液（pH7.0）進行沖洗，分8 次沖洗，每次取100mL 進行沖洗；沖洗之后濾干，隨之將濾膜菌進行轉移，并將濾膜菌正面朝上貼在胰酪大豆胨瓊脂培養基平板上。上述操作后，接著將其置于培養箱中，進行約為72 小時的培養，并每天觀察實驗變化結果[4]。

其中實驗需氧菌總數計數適用性試驗結果見表1。

表1 需氧菌總數計數適用性試驗結果

2.2.1 霉菌和酵母菌總數計數

試驗組： 取9.9mL 的1：10 供試液，在供試液中加入0.1 ml上述配制的試驗菌液，并混合均勻。取混合均勻的供試液1ml 注入平皿，隨之將其倒入沙氏葡萄糖瓊脂培養基中。然后將經過培養基培養的供試液置于20℃ ～25℃的培養箱中，培養約24 到120 小時之間，并做好每日實驗結果的記錄。

供試品對照組：將試驗組的操作進行重復操作，隨之進行培養計數。

菌液對照組： 將供試品對照組和試驗組中配備的菌液取適量，隨后用稀釋劑進行稀釋，并進行培養計數。霉菌和酵母菌總數計數適用性試驗結果如下：菌液對照組中的白色念珠菌有80 菌、試驗組有白色念珠菌75 菌、供試品對照組的白色念珠菌有0 菌，回收比值為1.0；菌液對照組中的黑曲霉有79 菌、試驗組中有黑曲霉69 菌、供試品對照組有黑曲霉0 菌，回收比值為：1.1。

3?討論

根據臨床試驗顯示，諾氟沙星膠囊抑菌性較強，若單獨采取薄膜過濾法，會導致最終試驗結果的回收效果不理想。為了研究微生物限度檢查方法的成效，我院對諾氟沙星膠囊進行生物限度檢查進行研究。

本次研究結果顯示：所實驗的各試驗菌其回收比值需要符合藥典規定，而大腸埃希菌則需要在控制菌檢查的陽性對照試驗檢中被檢出。諾氟沙星膠囊的抗菌活性則由中和劑硫酸鎂來去除。各項試驗數據表明，試驗方法可用于諾氟沙星膠囊的微生物限度檢查。

因此，對諾氟沙星膠囊進行微生物限度檢查，該方法價值較高，可大力推廣。